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甘肅等滲條件中鹽核酸酶70950-202

來源: 發(fā)布時間:2024-08-27

細胞基因藥物領域的進展使得對高質(zhì)量基因轉(zhuǎn)移技術的需求急劇增加,包括高質(zhì)量慢病毒載體(LV)的大規(guī)模生產(chǎn),。宿主細胞DNA殘留(HCD)是一類主要的工藝相關雜質(zhì),,對下游純化帶來很大挑戰(zhàn),。根據(jù)相關法規(guī)要求,,需要去除HCD才能達到臨床級LV,。HCD去除是通過核酸酶處理聯(lián)合下游工藝(DSP)共同實現(xiàn)的,。文章作者研究了兩款核酸酶M-SAN HQ中鹽核酸酶(ArcticZymes Technologies)和Benzonase(Merck)對HCD去除效率的差別,,其下游工藝包含過濾澄清及TFF超濾,。M-SAN HQ中鹽核酸酶在細胞培養(yǎng)條件或生理鹽濃度下具有較高活性,。甘肅等滲條件中鹽核酸酶70950-202

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大多數(shù)研究級別的慢病毒是通過批次濃縮而不是粗制劑之后應用的,濃縮基本上是通過兩步離心法產(chǎn)生的,。在70000g通過超速離心濃縮后的慢病毒再通過蔗糖緩沖(50000g)純化,,然后溶解在配方緩沖液中。一種改進,,特別是純度方面的改進,,基于離心/色譜聯(lián)用的純化方法。例如,,Kutner等評估了組合純化/濃縮方法,。蔗糖緩沖的超速離心結(jié)合陰離子交換層析獲得了88.2%的收率,而相反的組合則獲得了77.6%的收率,。在兩種方法中,,濃縮都超過了100倍,病毒滴度都超過了1010TU/ml(VSV-g包被的慢病毒),。M-SAN HQ中鹽核酸酶上海中鹽核酸酶產(chǎn)品質(zhì)量哪家好呢,,歡迎咨詢上海倍篤生物 。

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此外,,文章作者對每個步驟的樣品進行納米顆粒分析(NTA),,結(jié)果發(fā)現(xiàn):澄清環(huán)節(jié)后,M-SAN HQ中鹽核酸酶和Benzonase處理組才出現(xiàn)比較明確的LV病毒顆粒峰,;TFF處理后,,回流液樣品的LV病毒顆粒峰更加尖銳,表明病毒顆粒分散度更好,、穩(wěn)定性更高,。回流液的NTA結(jié)果進一步表明,,M-SAN HQ中鹽核酸酶處理組只有一個病毒顆粒峰,,而Benzonase處理組的回流液中有三個峰。作者推測Benzonase處理組的病毒顆粒還有嚴重的病毒團聚現(xiàn)象,,而呈現(xiàn)多峰現(xiàn)象,。

M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下的優(yōu)勢,讓其成為生物生產(chǎn)工藝中去除核酸污染的更好選擇。經(jīng)過多年的市場宣傳,,M-SAN HQ中鹽核酸酶品質(zhì)已得到多個全球TOP CDMOs認可,,納入其工藝開發(fā)篩選平臺。此外,,目前全球有10+臨床項目涉及的病毒載體生產(chǎn)用到M-SAN HQ中鹽核酸酶,。對于同一個項目,用M-SAN HQ替代Benzonase全能核酸酶,,酶量減少,、HCD去除效果更優(yōu)、病毒載體產(chǎn)量也有一定程度的提高,,酶相關成本降為原有的1/5以內(nèi),,極大降低了病毒載體生產(chǎn)成本。徐州中鹽核酸酶價格哪家好呢,,歡迎咨詢上海倍篤生物 ,。

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市售的M-SAN HQ中鹽核酸酶有三個規(guī)格,分別是25kU,、500kU及5MU,,分別滿足研發(fā)初期及大規(guī)模生產(chǎn)各階段的要求。通過SDS-PAGE檢測蛋白純度在99%以上,?;贏rcticZymes Technologies的30年的酶學開發(fā)及大規(guī)模生產(chǎn)經(jīng)驗,M-SAN HQ的生產(chǎn)體系穩(wěn)定,,產(chǎn)品純度高,,批次一致性好,無蛋白酶活性,。廠家開發(fā)出特異的緩沖液體系,,使M-SAN HQ保存起來更加穩(wěn)定,-15℃ - -30℃條件下保存4年沒有活性下降,。研究數(shù)據(jù)表明,,經(jīng)過5-6次的反復凍融,M-SAN HQ中鹽核酸酶活性沒有明顯變化,。衢州中鹽核酸酶款式哪家好呢,,歡迎咨詢上海倍篤生物 。黑龍江上海倍篤生物中鹽核酸酶

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Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ,中鹽核酸酶),,是用Pichia pastoris表達的重組非特異內(nèi)切核酸酶,,廣泛應用于生產(chǎn)工藝流程中,在生理鹽條件下去除雙鏈及單鏈的DNA及RNA。這款核酸酶的適宜pH范圍很廣(pH 7.2-8.7),,且在125-250 mM鹽濃度內(nèi)具有適宜活性,。在細胞培養(yǎng)液或收獲的培養(yǎng)上清中,不需調(diào)整任何組分,,直接加入M-SAN HQ即可表現(xiàn)高核酸酶活性。相比傳統(tǒng)的全能核酸酶,,M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下,,對HCD的去除更高效、更徹底,。因此,,M-SAN HQ中鹽核酸酶非常適合部分病毒載體(如慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒及溶瘤病毒等)的生產(chǎn),。甘肅等滲條件中鹽核酸酶70950-202