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ArcticZymes Technologies提供獨(dú)特特性的鹽活性核酸酶(Salt Active Nucleases,,SANs)系列產(chǎn)品,主要包含SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,。這兩款酶都是非特異核酸內(nèi)切酶,,跟Benzonase一樣能高效降解任何形式(雙鏈、單鏈,、線狀,、環(huán)狀)的DNA和RNA;都來(lái)自于深海microbes,,通過(guò)Pichia pastoris發(fā)酵生產(chǎn)得到,。這兩款酶的區(qū)別在于發(fā)揮酶活的適宜鹽濃度不同,——M-SAN HQ中鹽核酸酶的適宜鹽濃度在175mM-250mM,,而SAN HQ高鹽核酸酶的適宜鹽濃度在400mM-600mM,。衢州高鹽核酸酶售后服務(wù)哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 ,。廣東上海倍篤生物高鹽核酸酶
殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì),,其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風(fēng)險(xiǎn),。相關(guān)研究表明,,基因的大小普遍在200bp以上,,因此大于200bp有可能會(huì)有一定的致病性,而且殘留DNA片段越大,,生物制品的風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)越高,。因此,各國(guó)監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)其提出了嚴(yán)格要求,。美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)在《關(guān)于人類基因zhiliao新產(chǎn)品生產(chǎn)指導(dǎo)文件》中明確指出HCD的片段要小于200bp,。2022年5月,國(guó)家藥品監(jiān)督管理局藥品評(píng)審中心(CDE)發(fā)布的《體內(nèi)基因藥物產(chǎn)品藥學(xué)研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則(試行)》中也明確指出需對(duì)DNA殘留量和殘留片段大小進(jìn)行控制,,建議盡量將DNA殘留片段的大小控制在200bp以下,。山西高鹽條件高鹽核酸酶70921-150SAN HQ高鹽核酸酶有兩個(gè)級(jí)別,分別是生物工藝級(jí)別SAN HQ和GMP級(jí)別SAN HQ GMP,。
桿狀病毒表達(dá)載體體系Baculovirus/Sf9(Baculovirusexpression vector,,BEV),是應(yīng)用桿狀病毒表達(dá)載體(BEV)系統(tǒng)infect昆蟲(chóng)細(xì)胞Sf9,,是一種替代哺乳動(dòng)物包裝細(xì)胞系的生產(chǎn)方案,。整個(gè)系統(tǒng)包含兩種BEV,其中一個(gè)BEV攜帶兩側(cè)有ITRs的目的基因,,另一BEV則攜帶rep/cap基因,。這兩種BEV同時(shí)infectSf9即可組裝AAV。由于桿狀病毒具有輔助功能,,因此BEV系統(tǒng)與可以穩(wěn)定表達(dá)rep的Sf9細(xì)胞相結(jié)合,,可用于靈活的、高滴度的大規(guī)模載體生產(chǎn),。BEV體系安全性好,infection效率高,生產(chǎn)工藝較之sTT更易放大,,有更高的體積生產(chǎn)率優(yōu)勢(shì)。
ArcticZymes Technologies于2017年推出了SAN HQ高鹽核酸酶及其對(duì)應(yīng)的SAN HQ ELISA kit,。該試劑盒原理是采用雙抗夾心法定量檢測(cè)各種生物制品的中間品,、半成品和成品中SAN HQ高鹽核酸酶的殘留含量,特異性的anti-SAN作為捕獲抗體偶聯(lián)在96-well plate,,生物素Biotin標(biāo)記anti-SAN作為檢測(cè)抗體,,鏈霉親和素-HRP偶聯(lián)物起到信號(hào)放大作用,TMB是終反應(yīng)底物,。該試劑盒特異識(shí)別SAN HQ高鹽核酸酶,,對(duì)其它核酸酶沒(méi)有特異性結(jié)合。它的定量范圍是0.4-25.6ng/ml,,檢測(cè)精確度高RSD<=15%,,2-8℃條件下保存12個(gè)月。SAN HQ提高核酸污染去除效率,同時(shí)提高目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量,。
市售的SAN HQ高鹽核酸酶有三個(gè)規(guī)格,,分別是25kU、500kU及5MU,,分別滿足研發(fā)初期及大規(guī)模生產(chǎn)各階段的要求,。通過(guò)SDS-PAGE檢測(cè)蛋白純度在98%以上?;贏rcticZymes Technologies的30年的酶學(xué)開(kāi)發(fā)及大規(guī)模生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn),,SAN HQ的生產(chǎn)體系穩(wěn)定,產(chǎn)品純度高,,批次一致性好,,無(wú)蛋白酶活性。廠家開(kāi)發(fā)出特異的緩沖液體系,,使SAN HQ保存起來(lái)更加穩(wěn)定,,-15℃ - -30℃條件下有效期3年左右。研究數(shù)據(jù)表明,,經(jīng)過(guò)5-6次的反復(fù)凍融,,SAN HQ高鹽核酸酶活性沒(méi)有明顯變化。江蘇高鹽核酸酶價(jià)格哪家好呢,,歡迎咨詢上海倍篤生物 ,。北京SAN HQ TF高鹽核酸酶
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在生物工藝流程中,,需要使用核酸酶去除終產(chǎn)品中的核酸污染,,而核酸酶作為外源成份,,也需要在生產(chǎn)流程中去除。核酸酶去除工藝包括熱滅活法,、酶抑制劑,、離子交換和親合層析法等。AAV衣殼亞種之間因表面電荷的差異導(dǎo)致不同的的等電點(diǎn),,——空衣殼pI在6.3左右,,包裝了完整基因組DNA后的病毒顆粒pI大致為5.9。而來(lái)自于S.marcescens的全能核酸酶pI 6.85左右,,SAN HQ高鹽核酸酶pI 9.6左右,。因此,在同樣的條件下,,從AAV溶液中去除SAN HQ高鹽核酸酶比去除Benzonase全能核酸酶更容易,、更徹底。廣東上海倍篤生物高鹽核酸酶