熒光素也就是FDAFDA可透過細(xì)胞膜并作為熒光素積蓄在活細(xì)胞內(nèi),。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低,,因此熒光素從細(xì)胞中滲漏的量也高。FDA也可用于流式細(xì)胞儀。熒光素的激發(fā)和發(fā)射波長分別為488nm和530nm,。熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,,其中更有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyralis的螢火蟲體內(nèi)的熒光素酶。在相應(yīng)化學(xué)反應(yīng)中,,熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應(yīng)體系中也包括三磷酸腺苷(ATP),。沒有熒光素酶的情況下,,螢光素與氧氣反應(yīng)的速率非常慢,而鈣離子的存在常??梢赃M(jìn)一步加速反應(yīng)(與肌肉收縮的情況相似),。[1]熒光生成反應(yīng)通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光,。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,,只有越10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M,。熒光素或熒光素酶不是特定的分子,,而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應(yīng)的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同,。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應(yīng),。D-熒光素鉀鹽長期保存條件是-20℃干燥避光?;窗矡晒馑剽c鹽D-熒光素鉀鹽供應(yīng)商
luciferin)的分子結(jié)構(gòu)如右圖所示:,,在氧氣、ATP存在的條件下和熒光素酶發(fā)生反應(yīng),,生成氧化熒光素(oxyluciferin),,分子結(jié)構(gòu)如右圖所示,并產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象,。但是該底物熒光素以前大多依賴進(jìn)口,,產(chǎn)品價格昂貴。而且由于該產(chǎn)品容易降解,、受潮影響使用效果,。所以,需要國產(chǎn)化的方式生產(chǎn),,一方面可以降低成本,,一方面可以增強使用效果。作者:科遠(yuǎn)迪鏈接:zhuanlan./p/來源:知乎著作權(quán)歸作者所有,。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權(quán),,非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處。D-luciferin,potassiumsalt熒光素產(chǎn)品說明書發(fā)光原理哺乳動物生物發(fā)光,,一般是將Fireflyluciferase基因(由554個氨基酸構(gòu)成,,約50KD)即熒光素酶基因整合到預(yù)期觀察的細(xì)胞染色體DNA上以表達(dá)熒光素酶,培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞株,,當(dāng)細(xì)胞分裂,、轉(zhuǎn)移、分化時,熒光素酶也會得到持續(xù)穩(wěn)定的表達(dá),?;颉⒓?xì)胞和活題動物都可被熒光素酶基因標(biāo)記,。將標(biāo)記好的細(xì)胞接種到實驗動物體內(nèi)后,,當(dāng)外源(腹腔或靜脈注射)給予其底物熒光素(D-luciferin,potassiumsalt,,以下均簡稱熒光素),,即可在幾分鐘內(nèi)產(chǎn)生長發(fā)生光現(xiàn)象。所發(fā)的光波長在540-600nm,。這種酶在ATP,,氧存在的條件下,催化熒光素的氧化反應(yīng)才可以發(fā)光,。南通熒光素酶D-熒光素鉀鹽應(yīng)用南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽比較靠譜,。
我們將與LgBiT具有極強親和作用的。HiBiT作為一種易于檢測且具有高靈敏度的蛋白質(zhì)標(biāo)簽,,具有多種功能,,例如當(dāng)與基于CRIPSR的標(biāo)簽一起使用時,可以創(chuàng)建內(nèi)源性報告基因模型,。[1]2020Lumit?技術(shù)隨著NanoBiT?技術(shù)的發(fā)展,,人們認(rèn)識到可以利用該系統(tǒng)通過結(jié)合免疫測定的組分檢測多種分析物,。由此產(chǎn)生的平臺(現(xiàn)稱為“Lumit”)提供了具有高靈敏度的簡化免疫檢測法,。螢光素酶(英語:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,,其中**有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyralis的螢火蟲體內(nèi)的螢光素酶。在相應(yīng)化學(xué)反應(yīng)中,,熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化,,有些情況下反應(yīng)體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有螢光素酶的情況下,,螢光素與氧氣反應(yīng)的速率非常慢,,而鈣離子的存在常常可以進(jìn)一步加速反應(yīng)(與肌肉收縮的情況相似),。螢光生成反應(yīng)通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧螢光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量,,幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光,。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有約10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M,。螢光素或螢光素酶不是特定的分子。
故根據(jù)熒光反應(yīng)的情況可以檢測樣品中的微生物含量,。APT熒光檢測儀***用于食品,、飲用水、餐飲器具等的微生物快速檢測,。1970年,,科學(xué)家***次測定了螢火蟲熒光素酶的結(jié)構(gòu);1985年,,科學(xué)家***克隆了一種螢火蟲熒光素酶基因,并在大腸桿菌中表達(dá),,從而得到了具有活性的熒光素酶,;1986年,科學(xué)家們測定了該種螢火蟲熒光素酶的基因序列,。隨后,,各種螢火蟲熒光素酶基因相繼克隆成功,熒光素酶的研究和應(yīng)用不斷發(fā)展,。目前,,熒光素酶發(fā)光系統(tǒng)的分析技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用到醫(yī)學(xué)、生命科學(xué),、環(huán)境科學(xué),、微生物學(xué)等許多領(lǐng)域。以醫(yī)學(xué)領(lǐng)域為例,,**們將熒光素酶基因嵌入到*細(xì)胞中,,再注入熒光素,使*細(xì)胞發(fā)光,,通過探測熒光,,就能監(jiān)測*細(xì)胞的擴散和轉(zhuǎn)移。同理,,用這種方法能對致病基因,、***免疫機制等進(jìn)行研究,對某些疾病進(jìn)行診斷,,監(jiān)測疫苗,、藥物和治療方法的效力。做D-熒光素鉀鹽測試品牌有哪些,?
tetrametrylrhodarnineisothiocyante,,TRITC)是一種紫紅色粉末,較穩(wěn)定,是羅達(dá)明(rhodamine)的衍生物,。更大吸收光譜550urn,,更大發(fā)射光譜620urn呈橙紅色熒光,與FITC發(fā)射的黃綠色熒光對比鮮明,,常用于雙標(biāo)記染色,。按照抗原抗體反應(yīng)的結(jié)合步聚,免疫熒光法可分為以下三種,。1.直接法用熒光素標(biāo)記的特異性抗體直接與相應(yīng)的抗原結(jié)合,,以檢查出相應(yīng)的抗原成分。2.間接法先用特異性抗體與相應(yīng)的抗原結(jié)合,,洗去未結(jié)合的抗體,,再用熒光素標(biāo)記的抗特異性抗體(間接熒光抗體)與特異性抗體相結(jié)合,形成抗原一特異性抗體一間接熒光抗體的復(fù)合物,。在此復(fù)合物上帶有比直接法更多的熒光抗體,,所以,此法較直接法靈敏,。3.補體法用特異性的抗體和補體的混合液與標(biāo)本上的抗原反應(yīng),,補體就結(jié)合在抗原抗體復(fù)合物上,再用抗補體的熒光抗體與之相結(jié)合,,就形成了抗原一抗體一補體一抗補體熒光抗體的復(fù)合物,。熒光顯微鏡下所見到的發(fā)出熒光的部分即是抗原所在的部位。補體法具有敏感性強的優(yōu)勢,,同時適用于各種不同種屬來源的特異性抗體的標(biāo)記顯示,,在各種不同種屬動物抗體的檢測上為更常用的技術(shù)方法熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱。D-熒光素鉀鹽使用的是什么技術(shù),?上海熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽應(yīng)用
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熒光素酶的基因可以被合成并插入到生物體中或轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,。研究者利用基因工程已經(jīng)使得小鼠,、家蠶、馬鈴薯等一些生物可以合成熒光素酶,。間接體外成像是一種強大的研究手段,,可以對整個動物體中的細(xì)胞群落進(jìn)行分析:將不同類型的細(xì)胞(骨髓干細(xì)胞、T細(xì)胞等)標(biāo)記上(即表達(dá))熒光素酶,,就可以用高敏感度的CCD相機進(jìn)行對動物體內(nèi)進(jìn)行活ti觀察而不會傷害到動物本身,。在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以放出熒光,而發(fā)出的光子可以被光敏感元件,,如熒光探測器或改進(jìn)后的光學(xué)顯微鏡探測到,。這就使得對包括影響在內(nèi)的多種生命活動進(jìn)程進(jìn)行觀察成為可能,。例如,熒光素酶可以被用于檢測血庫中所存血液中的紅血球是否開始破裂,。法醫(yī)可以用含有熒光素酶的溶液來檢測犯罪現(xiàn)場中殘留的血跡,。醫(yī)院用熒光素酶的發(fā)光來發(fā)現(xiàn)特定的疾病。熒光素酶還可以作為“報告蛋白”被用于分子生物學(xué)研究中,,例如,,用于在轉(zhuǎn)染過熒光素酶的細(xì)胞中檢測特定啟動子的轉(zhuǎn)錄情況或用于探測細(xì)胞內(nèi)的ATP的水平;這一技術(shù)被稱為報告基因檢測法或熒光素酶檢測法(LuciferaseAssay),。熒光素酶是一個熱敏感蛋白,,因此經(jīng)常被用于研究蛋白熱變性過程中熱休克蛋白的保護(hù)能力?;窗矡晒馑剽c鹽D-熒光素鉀鹽供應(yīng)商