luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量,,幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光,。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,,只有越10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M(fèi),。分析熒光素或熒光素酶不是特定的分子,,而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應(yīng)的酶的統(tǒng)稱,,雖然它們各不相同,。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應(yīng),。更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotusoleariu')或許多海洋生物都不相同,。在螢火蟲中,,發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,,如叩頭蟲,,含有多種不同的熒光素酶,能夠催化同一熒光素底物,而發(fā)出不同顏色的熒光,。螢火蟲有2000多種,,而叩甲總科(包括螢火蟲、叩頭蟲和相關(guān)昆蟲)則有更多,,因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用,。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyrali')。應(yīng)用熒光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,,并被用于多種不同的實驗,。D-熒光素有時候也叫游離酸。鎮(zhèn)江熒光素D-熒光素鉀鹽濃度
故根據(jù)熒光反應(yīng)的情況可以檢測樣品中的微生物含量,。APT熒光檢測儀***用于食品,、飲用水、餐飲器具等的微生物快速檢測,。1970年,科學(xué)家***次測定了螢火蟲熒光素酶的結(jié)構(gòu),;1985年,,科學(xué)家***克隆了一種螢火蟲熒光素酶基因,并在大腸桿菌中表達(dá),,從而得到了具有活性的熒光素酶,;1986年,科學(xué)家們測定了該種螢火蟲熒光素酶的基因序列,。隨后,,各種螢火蟲熒光素酶基因相繼克隆成功,熒光素酶的研究和應(yīng)用不斷發(fā)展,。目前,,熒光素酶發(fā)光系統(tǒng)的分析技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用到醫(yī)學(xué)、生命科學(xué),、環(huán)境科學(xué),、微生物學(xué)等許多領(lǐng)域。以醫(yī)學(xué)領(lǐng)域為例,,**們將熒光素酶基因嵌入到*細(xì)胞中,,再注入熒光素,使*細(xì)胞發(fā)光,,通過探測熒光,,就能監(jiān)測*細(xì)胞的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。同理,,用這種方法能對致病基因,、***免疫機(jī)制等進(jìn)行研究,對某些疾病進(jìn)行診斷,監(jiān)測疫苗,、藥物和治療方法的效力,。揚(yáng)州體外研究D-熒光素鉀鹽公司熒光素酶作用下的D-熒光素鉀鹽。
D-熒光素鉀鹽是一種化學(xué)品,。中文別名:(S)-4,5-二氫-2-(6-羥基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸鉀鹽英文別名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxybenzothiazol-2-yl)thiazole-4-carboxylicacidpotassiumsalt產(chǎn)品描述D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,,普遍應(yīng)用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是體內(nèi)活題成像技術(shù),。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,,熒光素底物能夠被氧化發(fā)光。當(dāng)熒光素過量時,,產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性(見下圖),。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的慢病毒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株,構(gòu)建原位腫大的瘤模型,,之后注入熒光素底物,,通過IVIS系統(tǒng)來檢測光強(qiáng)度變化,從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或進(jìn)行藥物藥效評價等,。也可以利用ATP對此反應(yīng)體系的影響,,根據(jù)生物發(fā)光強(qiáng)度的變化來指示能量或生命體征。注:在抗腫大的瘤藥物藥效評價試驗中,,由于生物自發(fā)光檢測需要根據(jù)熒光素表達(dá)標(biāo)定腫大的瘤大小,,受腫大的瘤生長所發(fā)生的腫大的瘤內(nèi)部壞死影響,生物自發(fā)光并不能很覆蓋面廣的評價腫大的瘤生長,,在抗腫大的瘤藥效評價有較高要求的實驗中,,建議使用小動物核磁成像系統(tǒng)檢測腫大的瘤生長。D-熒光素也常用于體外研究,。
熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,,其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,,同時近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶(Gaussluciferase),。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),,可通過熒光測定儀設(shè)備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應(yīng)用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究,。螢火蟲螢光素酶**通用和**常見的報告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,,該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度(體內(nèi))甚至沒有毒性,,可用于原核和真核細(xì)胞,。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒(12518)使用無DTT**配方來定量活細(xì)胞和細(xì)胞提取物中的螢光素酶活性,。該測定基于螢火蟲熒光素酶,螢火蟲熒光素酶是一種單體的61kD酶,,可催化熒光素的兩步氧化,,在560nm處產(chǎn)生光。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒特點(diǎn):具有優(yōu)化的“混合讀取”測定規(guī)程,,可與HTS液體處理儀器兼容具有高靈敏度,。D-熒光素鉀鹽使用的注意事項。
注意事項1)本品(fireflyluciferin)和甲蟲熒光素(beetleluciferin),、螢光素鉀鹽只是不同別名,,以CAS號115144-35-9為準(zhǔn)。2)注射方式,、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學(xué)曲線,確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間,。3)如果要進(jìn)行ATP的檢測,,盡量避免外源ATP的污染,如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,,在進(jìn)行熒光素的溶解時應(yīng)使用ATP-free無菌水,。4)為避免反復(fù)凍融,本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存,。為防止氧化,如有條件,,可以對儲存液充氮?dú)饣驓鍤夂蟊4妗?)對于檢測靈敏度要求特別高的實驗,,建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品。6)在進(jìn)行D-熒光素鉀鹽的溶解時,,應(yīng)使用無鈣鎂離子的DPBS,,因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性,此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響,,從而影響檢測,。7)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。8)本產(chǎn)品只作科研用途,!D-熒光素鉀鹽短期保存條件是4℃干燥避光。常州熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽應(yīng)用
D-熒光素鉀鹽測試怎么樣,?鎮(zhèn)江熒光素D-熒光素鉀鹽濃度
從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或藥物的***功效等,。也可以利用ATP對此反應(yīng)體系的影響,根據(jù)生物發(fā)光強(qiáng)度的變化來指示能量或生命體征,。,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O分子量:g/mol純度:高級純()應(yīng)用:1)活細(xì)胞,、組織或生物體內(nèi)luc標(biāo)記基因和熒光素酶-融合基因體內(nèi)/體外表達(dá)的成像分析,;2)***用于報告基因分析,免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析,;Protocol1:InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1)配制成100mM的儲存液(200×,,濃度30mg/ml)?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存,。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液,配制工作液(終濃度150μg/mL),。3)去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基直至無殘留,。4)圖像分析前立即向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液,然后進(jìn)行圖像分析(或者細(xì)胞放在37℃短時間孵育后檢測可增強(qiáng)信號),。D-熒光素鉀鹽注:螢光素,、螢光素酶、螢火蟲螢光素酶,、螢光素鉀鹽,、螢光素鉀鹽鹽也經(jīng)常被稱作熒光素、熒光素酶,、螢火蟲熒光素酶,、熒光素鉀鹽、熒光素鈉鹽,。Protocol2:Invivoanalysisinmice/小鼠***成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+,、Ca2+)配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/mL),,。一旦使用,,保持冰冷且避光。鎮(zhèn)江熒光素D-熒光素鉀鹽濃度
南京翌科生物科技有限公司是一家有著雄厚實力背景,、信譽(yù)可靠,、勵精圖治、展望未來,、有夢想有目標(biāo),,有組織有體系的公司,堅持于帶領(lǐng)員工在未來的道路上大放光明,,攜手共畫藍(lán)圖,,在江蘇省等地區(qū)的商務(wù)服務(wù)行業(yè)中積累了大批忠誠的客戶粉絲源,也收獲了良好的用戶口碑,,為公司的發(fā)展奠定的良好的行業(yè)基礎(chǔ),,也希望未來公司能成為*****,努力為行業(yè)領(lǐng)域的發(fā)展奉獻(xiàn)出自己的一份力量,,我們相信精益求精的工作態(tài)度和不斷的完善創(chuàng)新理念以及自強(qiáng)不息,,斗志昂揚(yáng)的的企業(yè)精神將**南京翌科生物科技供應(yīng)和您一起攜手步入輝煌,,共創(chuàng)佳績,一直以來,,公司貫徹執(zhí)行科學(xué)管理,、創(chuàng)新發(fā)展、誠實守信的方針,,員工精誠努力,,協(xié)同奮取,以品質(zhì),、服務(wù)來贏得市場,,我們一直在路上!