詳細步驟如下：1.75％酒精浸泡大鼠尾巴30min；2.將尾巴剪開,、去掉皮毛,，并剪成小段（3cm左右），抽出銀色的尾鍵,；3.把剪碎的尾鍵置于150ml,，0.1％消過毒的醋酸中，4℃放置，并不時振蕩,；4.48h后取上清,，4000轉(zhuǎn)離心30min后，取上清,；5.分裝上清（鼠尾膠）4度（或-20度）保存,。有時可繼續(xù)向4。中沉淀中加入10－20ml醋酸,，重復(fù)以上步驟,，以制備更多的鼠尾膠。在使用時,，先將冰存的膠原液在室溫下解凍,，再按以下步驟包被培養(yǎng)器皿：1）用吸管吸取膠原液，在無菌的培養(yǎng)器皿的生長面內(nèi)壁上均勻地涂上薄薄的一層膠原溶液,。2）若包被的是培養(yǎng)瓶,，可向培養(yǎng)瓶通入氨氣或用浸有氨水的棉球封口片刻。讓氨氣充入瓶內(nèi)后,，即可旋緊瓶蓋或塞緊瓶塞,。若為培養(yǎng)皿或板的話，可將培養(yǎng)皿或板放在已消毒的飯盒內(nèi),，將浸有氨水的棉球放入飯盒內(nèi),，蓋緊飯盒蓋，四周用封口膠封死,。將黏稠的膠體溶液進行高速冷凍離心處理,。蕪湖正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上，pH左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,，在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和。需要的溶液（均需要無菌,、預(yù)冷）10mg/L酚紅用于pH指示）0.1mol/LNaOH,，0.1mol/L乙酸(一般不用)，雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,，加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）立即混勻,。再加入100ul10PBS10培養(yǎng)液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時需要用pH試紙測試),。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便,，成本低廉,。貴陽鼠尾膠原服務(wù)電話期間不斷攪拌，防止凍結(jié)成塊,，得到膠原溶脹液,。

鼠尾膠原，10mg包裝,，配制方法如下：1.配0.1M的乙酸溶液100ml,。即取575ul冰乙酸加超純水至100ml，容量瓶配制比較準確,。2.用吸管吸取10ml剛配好的0.1M乙酸溶液（不要用*加,，吸十次不如加一次z準確），加入盛膠原的瓶中,，輕輕顛倒,，不要震蕩，蛋白容易起泡,。幾分鐘即可,，蛋白質(zhì)非常好溶解。3.將膠原溶液移入事先壓好的玻璃瓶中,，比青霉素瓶大點的就行,。用*在瓶底加1ml氯仿，打到一檔就行,，避免加入氣泡,。然后4度過夜除菌。4.第二天將上層膠原溶液分裝進EP管中,。用封口膜封口,，4度保存，勿冷凍,。

鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,，它具有促進體外培養(yǎng)細胞（特別是上皮細胞）貼壁的作用，同時它也是一種天然的黏附劑,，當我們需要在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)放置小玻片,，制備細胞爬片時，可在瓶底涂一層膠原,，再放上小玻片,，自然干燥后小玻片就固定于培養(yǎng)瓶之中。通過本實驗可掌握鼠尾膠原的制備方法,，以及如何切割小玻片,，并利用鼠尾膠原將其固定于培養(yǎng)瓶內(nèi),。實驗設(shè)備及材料：大鼠尾巴、剪刀,、鑷子,、止血鉗、彎頭吸管,、平皿,、三角燒瓶、燒杯,、量筒,、天平、生理鹽水,、75%酒精,、0.1%醋酸溶液、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆、鼠尾膠原,。實驗內(nèi)容：1,、制備鼠尾膠原。2,、切割小玻片,。3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi),。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便,，成本低廉,。注意事項：在室溫下pH 中性時可迅速成膠，在操作過程中要 盡量保持低溫,。

鼠尾Ⅰ型膠原：材料與方法：1.主要材料,、試劑和儀器鼠尾、鹽酸,、等滲氯化鈉溶液,、鈣液、磷液均購自上海晶純生化科技股份有限公司,。日立高新TEMHT770(日本日立公司),；多功能粉末X射線衍射儀。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈,，用75%的乙醇浸泡5min,。將尾巴剪開，去掉皮毛,，并剪成小段,，抽出銀色的肌腱。將肌鍵剪斷置于平皿中,，用無菌等滲氯化鈉溶液浸泡,。吸去等滲氯化鈉溶液，將肌鍵置于平皿中剪碎,，按每克肌鍵50mL的比例加入0.1%的醋酸溶液,。搖晃，將肌鍵分散于醋酸溶液中,，4℃放置一周,，然后以2186×g離心20min。在醋酸溶液的酸解下,，肌腱水解成膠凍狀凝膠,，置于冰箱4℃保存。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,，并且制作簡便，成本低廉,。在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,。鄭州正規(guī)鼠尾膠原哪里買

將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中，制備成濃度為0.1%的溶液,。蕪湖正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹

實驗應(yīng)用：探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細胞膜片鉗實驗中的促進毛細胞貼壁效果,。方法制作鼠尾膠原，觀察全細胞膜片鉗實驗中,，自制的鼠尾膠原對前庭毛細胞的貼壁黏附作用,。結(jié)果無鼠尾膠原時，前庭毛細胞懸浮于外液,，不宜封接,；有鼠尾膠原時，前庭毛細胞貼附于培養(yǎng)皿底壁,，易于封接和長時間(約8h)的觀察和記錄,。鼠尾膠原對前庭毛細胞具有良好的貼壁黏附促進作用。結(jié)論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,，并且制作簡便，成本低廉,。蕪湖正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹