鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果,。方法制作鼠尾膠原，觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,，自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用,。結(jié)果無鼠尾膠原時(shí),，前庭毛細(xì)胞懸浮于外液，不宜封接,；有鼠尾膠原時(shí),，前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁，易于封接和長(zhǎng)時(shí)間（約8h)的觀察和記錄,。鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用,。結(jié)論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,，并且制作簡(jiǎn)便,，成本低廉。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解,。昆明鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)

鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,，其特征在于，包括以下步驟:(1)將無組織纖維,、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,，真空冷凍干燥備用；(2)凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至200?400目,；(3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹，鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL,，期間不斷攪拌,，防止凍結(jié)成塊，得到膠原溶脹液,；(4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中,，鼠尾腱與蛋白酶質(zhì)量比為50:I?100:1,，在4°C，48?74小時(shí)酶解,，期間間歇性攪拌,。貴陽(yáng)鼠尾膠原推薦廠家將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

一種海貍鼠尾膠原手術(shù)縫合線制備方法，其特征在于,，步驟如下：(1)膠原紡絲液的配制：將備用的海貍鼠尾筋切成薄片,，用無花果蛋白酶進(jìn)行酶解處理，再用雙氧水溶液殺酶,；將殺酶后的切片用蒸餾水沖洗,，然后用乙酸溶液溶脹，把溶脹后的切片分散攪拌,，然后用濾網(wǎng)過濾,，除去雜質(zhì)及不溶脹物，然后把該溶液離心脫泡制得膠原紡絲溶液,；(2)手術(shù)縫合線纖維的成形：將膠原紡絲液裝入立式向上濕法紡絲機(jī)的紡絲液貯罐中,，用氮?dú)鈹D壓入含有pH＝8-11、質(zhì)量濃度為50-80％的硫酸鈉溶液的立式凝固浴中凝固成型,，再經(jīng)過質(zhì)量濃度為60-90％的乙醇水溶液的脫水浴脫水,，再經(jīng)過假捻器加捻，合股后再進(jìn)入含有pH＝9-11,、質(zhì)量濃度為0.8-1.2％戊二醛的交聯(lián)浴中交聯(lián),，經(jīng)過水浴水洗，再經(jīng)第二次加捻,，除去水及交聯(lián)劑,，干燥后，在卷繞輥上卷繞即得手術(shù)縫合線,。

酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對(duì)分子質(zhì)量和濃度檢測(cè)鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,，其腱性組織被水解成膠凍狀溶液，從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子,。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,，可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(，其生物力學(xué)強(qiáng)度極差,，一碰即散,。將鼠尾膠原蛋白進(jìn)行SDS-PAGE，結(jié)果顯示：Ⅰ型膠原蛋白原液在相對(duì)分子質(zhì)量130000附近有明顯條帶，另一條帶的相對(duì)分子質(zhì)量大于170000(圖2),。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL,。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中，將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中,。礦化2,、6d后，分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進(jìn)行TEM和電子衍射觀察,。鼠尾膠原蛋白的用途很普遍,，可用于化妝品，工業(yè)和食品生產(chǎn)等領(lǐng)域,。

膠原蛋白的提取方法：酶法提?。好阜ㄌ崛∈抢玫鞍酌甘鼓z原溶解，水解條件溫和,，反應(yīng)速率快,，提取的膠原蛋白仍有完整的三股螺旋結(jié)構(gòu),，蛋白純度高,，理化性質(zhì)穩(wěn)定，且無環(huán)境污染,。酶法提取常用的蛋白酶有：胃蛋白酶,、胰蛋白酶或者復(fù)合酶。工藝可選擇一步法,，即利用酶液直接提?。欢椒?，即先用酸或者堿進(jìn)行初步提取,，然后再用酶提取。Langmaier等[6]用MgO預(yù)處理革屑,，然后用堿性蛋白酶提取膠原的水解產(chǎn)物,。CabezaL.F.T等[7]先用胃蛋白酶，再用堿性蛋白酶提取了2種不同的膠原水解產(chǎn)物,。趙蒼碧等[2]采用胃蛋白酶和無花果蛋白酶消化法從牛腱中提取膠原蛋白,，探討了酶和酶的加入量對(duì)提取結(jié)果的影響，給出了酶對(duì)膠原提取較佳工藝配比,，酶與牛腱的質(zhì)量比為0.1時(shí)效果較佳,，而使用無花果蛋白酶時(shí)，0.01的配比較佳,?？梢栽跓o菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。在接種細(xì)胞前用無菌的水漂洗,。無錫正規(guī)鼠尾膠原廠家供應(yīng)

稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中,。昆明鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)

鼠尾Ⅰ型膠原：組裝液的配置：1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL，用1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2,。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中,，倒入0.5mL自組裝液，室溫放置20min,。予自組裝液自組裝24h,。吸取0.05%戊二醛2mL至小培養(yǎng)皿中，將自組裝24h的膠原浸泡在戊二醛中,。然后將膠原經(jīng)去離子水,、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后進(jìn)行TEM觀察,。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10mmol/L二水氯化鈣+150mmol/L氯化鈉+50mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中,，滴入聚丙烯(PAA)至濃度350μg/mL；滴加1mol/L的氯化氫,，調(diào)節(jié)酸堿度至7.4,，然后緩慢滴入25mL磷液(6mmol/L磷酸氫二鈉)，約16滴/min,。昆明鼠尾膠原進(jìn)貨價(jià)