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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-29

PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來(lái)自我室實(shí)驗(yàn)材料,。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,,其配方:無(wú)水乙醇80mL,,冰醋酸5mL,、甲醛10mL,。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL,,冰醋酸100mL,,95%酒精600mL,。1.2.3過(guò)碘酸溶液0.5g過(guò)碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過(guò)碘酸0.8g,,95%乙醇70mL,,醋酸鈉0.27g,水20mL,。待溶解后置于4℃冰箱避光保存,。1.2.4無(wú)色品紅液(Schiff氏液)在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,,在保持微沸的情況下,,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),,使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色),。冷卻到50℃時(shí),過(guò)濾,,加入1N鹽酸50mL,,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),,然后避光放置或冰箱內(nèi)24h一般厚度不超過(guò)3mm,大小不超過(guò)5×5m㎡,。北京品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家直銷(xiāo)

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糖原染色試劑盒,。含乙二醇基的多糖經(jīng)過(guò)碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,,與雪夫(Schiff)試劑中無(wú)色品紅結(jié)合,,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng),。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,,冷卻60℃時(shí)過(guò)濾,加1mmol/L鹽酸20ml,,再冷卻至25℃左右,,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,,置暗處24h,,無(wú)色即可放冰箱中保存,,呈微紅色,則加活性炭1~2g,,吸附過(guò)濾使成無(wú)色液體,,放冰箱中保存。若溶液變紅,,即不能再用,。(2)10g/L過(guò)碘酸水溶液:過(guò)碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用,,一般可用3個(gè)月,,變黃則失效浙江品質(zhì)好的糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家植物材料在選擇時(shí)須盡可能不損傷植物體或所需要的部分。

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糖原染色(PAS):(1)原理:過(guò)碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,,生成醛基。醛基與雪夫液中的無(wú)色品紅結(jié)合,,形成紫色化合物,,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,,滴加甲醛固定液固定10分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加過(guò)碘酸溶液作用20分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加雪夫液作用60分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,,流水沖洗,晾干鏡檢,。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽(yáng)性程度和陽(yáng)性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷。

糖原D-PAS染色液:使用方法:1,、兩張相同切片,,二甲苯脫蠟,梯度乙醇入水,。2,、一張切片入37℃淀粉酶溶液處理1h。另一張不用淀粉酶溶液處理,,入水中1h作為對(duì)照,。3,、流水沖洗兩張切片各5~10min。4,、入過(guò)碘酸溶液,,室溫放置5~8min,一般不宜超過(guò)10min,。5,、自來(lái)水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次,。6,、入SchiffReagent,置于室溫陰暗處浸染10~20min,。7,、自來(lái)水沖洗10min。8,、入Mayer蘇木素染色液,,染細(xì)胞核1~2min。9,、(可選)酸性乙醇分化液分化2~5s,。10、自來(lái)水沖洗10~15min,,更換蒸餾水清洗使其返藍(lán),。11、二甲苯透明,,中性樹(shù)膠封固,。特殊染色方法及化學(xué)試劑的選擇。

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染色試劑盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),,是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶,。該基因產(chǎn)物為β-葡萄糖苷酸酶,屬水解酶類,,相當(dāng)穩(wěn)定而不易降解,,以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物,其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測(cè)出來(lái),。由于絕大多數(shù)植物沒(méi)有檢測(cè)到葡萄糖苷酸酶的背景活性,,因此這個(gè)基因被普遍應(yīng)用于基因調(diào)控的研究中。根據(jù)GUS基因檢測(cè)所用的底物不同,,可以選擇三種檢測(cè)方法:組織化學(xué)法,、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測(cè)法較高)。其中較為常用的是組織化學(xué)法,。特殊染色是為了顯示與確定組織或細(xì)胞中的正常結(jié)構(gòu)或病理過(guò)程中出現(xiàn)的異常物質(zhì),。湖南口碑好的糖原染色試劑盒銷(xiāo)售廠家

幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細(xì)胞,,腺細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)。北京品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家直銷(xiāo)

糖原染色:方法固定液Carnoy固定液:純酒精60ml冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以選用75%酒精配制1)過(guò)碘酸酒清夜配法:過(guò)碘酸(HIO.2HO)0.4g95%酒精35mlM/5醋酸鈉(2.72g+蒸餾水100ml)5ml蒸餾水10ml保存于冰箱內(nèi),用棕色瓶,可用兩周.2)Schiff氏液:0.5克堿性品紅加入100毫升蒸餾水中,時(shí)時(shí)搖動(dòng)三角瓶5分鐘,使之充分溶解.冷卻至50℃后過(guò)濾加入10毫升1N鹽酸.冷卻至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸鈉,在室溫中至少靜置24小時(shí),然后密封冰箱保存.3)Schiff氏酒**配置Schiff氏液11.5ml1NHCI0.5ml純酒精23ml4)亞硫酸水1%偏重亞硫酸蒸餾水180ml的樹(shù)膠溶解~北京品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家直銷(xiāo)