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糖類染色:糖類從組織化學(xué)技術(shù)角度來分,,可分為多糖、中性粘液物質(zhì),、酸性粘液物質(zhì),、粘蛋白及粘脂質(zhì)。多糖主要指糖原,,它是一種膠樣液態(tài)存在于肝細(xì)胞,、骨骼肌,、心肌等處。因糖原在肝臟及心肌疾患及某些的病變中分布和量都有一定改變,,故糖原的染色在臨床病理診斷上具有重要意義,。(1)肝及心肌糖原沉著癥的診斷:糖原染色顯示在肝或心肌細(xì)胞內(nèi)有大量糖原存在即可確診。(2)糖尿病性腎小球硬化癥或血管病的診斷,。(3)高雪氏病與尼曼——匹克氏病的鑒別:前者為陽性,、后者為陰性,做此染色較易鑒別,。(4)骨內(nèi)骨外尤文氏肉瘤的診斷:此瘤80%細(xì)胞內(nèi)有較多糖原,,糖原染色為陽性,所以糖原染色為陽性(大多數(shù)細(xì)胞)可以協(xié)助診斷,。(5)腺泡狀軟組織肉瘤與化感瘤:前者棒狀小體糖原染色為陽性,。切取材料時刀要銳利,避免因擠壓細(xì)胞使其受到損傷,。山東糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家
染色試劑盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),,是從大腸桿菌K-12菌株分離出的一種酸性水解酶。該基因產(chǎn)物為β-葡萄糖苷酸酶,,屬水解酶類,,相當(dāng)穩(wěn)定而不易降解,以β-葡萄糖苷酸酯類物質(zhì)為底物,,其反應(yīng)產(chǎn)物可用多種方法檢測出來,。由于絕大多數(shù)植物沒有檢測到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此這個基因被普遍應(yīng)用于基因調(diào)控的研究中,。根據(jù)GUS基因檢測所用的底物不同,,可以選擇三種檢測方法:組織化學(xué)法、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測法較高),。其中較為常用的是組織化學(xué)法,。江蘇咨詢糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞。
糖原染色――檢查項(xiàng)目的注意細(xì)節(jié):其判斷標(biāo)準(zhǔn)隨細(xì)胞不同而異,,一般分為5級,,即0~4級。糖原染色――檢查項(xiàng)目的一般步驟:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,,蒸餾水沖洗數(shù)次,,待干。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,,蒸餾水沖洗數(shù)次,,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,,用自來水沖洗約5min,,再用蒸餾水沖洗,,然后用20g/L甲基綠復(fù)染20min,水洗,,晾干,。糖原染色――檢查項(xiàng)目結(jié)果解讀:(1)新鮮干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,,待干,。(2)浸入10g/L過碘酸水溶液中10min,蒸餾水沖洗數(shù)次,,待完全干燥,。(3)放入雪夫液30min,用自來水沖洗約5min,,再用蒸餾水沖洗,,然后用20g/L甲基綠復(fù)染20min,水洗,,晾干,。
糖原染色:方法固定液Carnoy固定液:純酒精60ml冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以選用75%酒精配制1)過碘酸酒清夜配法:過碘酸(HIO.2HO)0.4g95%酒精35mlM/5醋酸鈉(2.72g+蒸餾水100ml)5ml蒸餾水10ml保存于冰箱內(nèi),用棕色瓶,可用兩周.2)Schiff氏液:0.5克堿性品紅加入100毫升蒸餾水中,時時搖動三角瓶5分鐘,使之充分溶解.冷卻至50℃后過濾加入10毫升1N鹽酸.冷卻至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸鈉,在室溫中至少靜置24小時,然后密封冰箱保存.3)Schiff氏酒配置Schiff氏液11.5ml1NHCI0.5ml純酒精23ml4)亞硫酸水1%偏重亞硫酸蒸餾水180ml的樹膠溶解在肝糖原染色中用10%甲醛液固定肝組織。
糖原D-PAS染色液注意事項(xiàng):1,、切片脫蠟應(yīng)盡量干冷,,否則影響染色效果。需使用一張陽性對照片驗(yàn)證酶的活性,。2,、過碘酸氧化時間不宜過久,氧化時溫度以18~22℃較佳,。3,、試劑(A)、試劑(B),、試劑(C),、應(yīng)置于4℃密閉保存,使用時避免接觸過多的陽光和空氣,,使用前較好提前取出恢復(fù)到在室溫后,,避光暗處使用。4,、酸性乙醇分化液應(yīng)經(jīng)常更換新液,,其分化時間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和酸性乙醇分化液的新舊而定,,另外分化后自來水沖洗時間應(yīng)該足夠。5,、在過碘酸溶液和SchiffReagent中作用時間非常重要,,該依據(jù)切片厚薄,、組織類別等決定。6,、況冶切片染色時間盡量要短,。如PAS染色可顯示糖原、黏液等,。江蘇咨詢糖原染色試劑盒廠家直銷
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糖原染色臨床意義:1,、急性淋巴細(xì)胞白血病,、淋巴組織惡性增生性疾病、紅白血病,、戈謝病的原始細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng)或陽性反應(yīng),;缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙,、骨髓增生異常綜合征亦可呈陽性反應(yīng),;急性粒細(xì)胞白血病、急性單核細(xì)胞白血病,、良性淋巴細(xì)胞增多癥,、尼曼-皮克細(xì)胞呈陰性反應(yīng)或弱陽性反應(yīng)。巨幼細(xì)胞性貧血,、溶血性貧血,、再生障礙性貧血等,幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng),。偶有個別幼紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng),。2、幫助鑒別不典型巨核細(xì)胞和霍奇金細(xì)胞,,巨核細(xì)胞呈強(qiáng)陽性反應(yīng),;霍奇金細(xì)胞呈弱陽性或陰性反應(yīng)。3,、幫助鑒別白血病細(xì)胞和腺骨髓轉(zhuǎn)移的腺細(xì)胞,,腺細(xì)胞呈陽性反應(yīng)。山東糖原染色試劑盒生產(chǎn)廠家