鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：膠原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實(shí)驗(yàn)組)和普通培養(yǎng)皿(對(duì)照組)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2誘導(dǎo),。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞存活率,TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測(cè)丙二醛水平,Western-Blot檢測(cè)凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達(dá),。結(jié)果與結(jié)論:兩組培養(yǎng)皿中,隨著過(guò)氧化氫濃度的增高,均可見(jiàn)細(xì)胞凋亡狀態(tài)明顯加重,細(xì)胞存活率及細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化氫活力明顯下降,細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞內(nèi)丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,呈劑量依賴性,。鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿,。北京正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：膠原蛋白具有抗氧化作用,，但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建，對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究,。目的：探討鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,。方法：將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿（實(shí)驗(yàn)組）和普通培養(yǎng)皿（對(duì)照組）中，并且均用0,，10,，100μmol/LH2O2誘導(dǎo)。24h后,，以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),，應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞存活率，TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),，流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率,，黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶活力，硫代巴比妥比色法檢測(cè)丙二醛水平,，Western-Blot檢測(cè)凋亡蛋白Bax,、Bcl-2的表達(dá)。上海正規(guī)鼠尾膠原價(jià)格生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,，采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,，保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境。

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項(xiàng)：通過(guò)醋酸抽提,、氯化鈉沉淀,、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的,。鼠尾膠原蛋白可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿,，培養(yǎng)一些在普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細(xì)胞,。也可用于制備三維膠，模擬真實(shí)的生長(zhǎng)環(huán)境,，使細(xì)胞在三維環(huán)境中生長(zhǎng),。1，在使用鼠膠原蛋白型包被的細(xì)胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細(xì)胞的貼壁和生長(zhǎng),。1mg/ml濃度以上,，pH左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度的三維膠，檢查到NIH-3T3細(xì)胞在三維膠內(nèi)正常生長(zhǎng),、PC-12細(xì)胞在三維膠表面正常生長(zhǎng),。使用方法：1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度：1-5ug/cm0.012mg/ml,。按以下表格體積加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中,。

膠原蛋白的提取方法：1.堿法提取：堿法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰,、氫氧化鈉,、碳酸鈉等。如Holzer等[5]采用1%～1.5%石灰水浸泡的方法提取膠原蛋白,。由于它容易造成肽鍵水解,，因此得到的水解產(chǎn)物分子量比較低。所以,，若想保留膠原的三股螺旋結(jié)構(gòu),，此法不可取。2.鹽法提?。蝴}法提取膠原蛋白所用的中性鹽有鹽酸-三羥甲基胺基甲烷(Tris-HCl),、氯化鈉、檸檬酸鹽等,。在中性條件下,，當(dāng)鹽的濃度達(dá)到一定量時(shí)，膠原溶解,。并且可采用不同濃度的氯化鈉對(duì)提取的膠原蛋白進(jìn)行鹽析處理,，可以沉淀出不同類型的膠原蛋白。制備鼠尾膠原：重復(fù)步驟2,、3,，直至尾腱量夠用。

鼠尾Ⅰ型膠原：組裝液的配置：1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL,，用1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2,。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中,，倒入0.5mL自組裝液，室溫放置20min,。予自組裝液自組裝24h,。吸取0.05%戊二醛2mL至小培養(yǎng)皿中，將自組裝24h的膠原浸泡在戊二醛中,。然后將膠原經(jīng)去離子水,、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后進(jìn)行TEM觀察,。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10mmol/L二水氯化鈣+150mmol/L氯化鈉+50mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中,，滴入聚丙烯(PAA)至濃度350μg/mL；滴加1mol/L的氯化氫,，調(diào)節(jié)酸堿度至7.4,，然后緩慢滴入25mL磷液(6mmol/L磷酸氫二鈉)，約16滴/min,。鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠,。貴陽(yáng)鼠尾膠原廠家供應(yīng)

鼠尾膠原醋酸溶解：制備成濃度為0.1%的溶液。北京正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨

膠原蛋白的適用征狀：1,、由于工作勞累,，睡眠不足形成的皮膚晦暗無(wú)光、發(fā)黃,、皮膚彈性差等皮膚衰老的不良癥狀,。2、由于年齡,、太陽(yáng)輻射因素引起的皮膚松弛,、下垂、皺紋,、干燥等皮膚衰老現(xiàn)象,。3、由于體內(nèi)異常黑色素分泌旺盛,，大量沉積皮膚表面,，肌膚不能及時(shí)代謝出異常黑色素，形成各種色斑,。4,、由于長(zhǎng)期戶外活動(dòng)及皮膚保養(yǎng)不當(dāng)使膚質(zhì)受到損傷，過(guò)早出現(xiàn)細(xì)紋,皮膚干燥,、脫皮,、、毛孔粗大等不良癥狀,。5,、由于內(nèi)分泌功能紊亂,，皮膚膚質(zhì)差、皮膚發(fā)油,、發(fā)暗,，易長(zhǎng)青春痘留下的色印、色素沉著等,。6,、由于生活無(wú)規(guī)律,吸煙等因素,造成的黑眼圈,眼袋等問(wèn)題,。7.長(zhǎng)期電腦旁工作,，電腦輻射造成脫發(fā)，內(nèi)分泌紊亂問(wèn)題,。北京正規(guī)鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨