由于具有較高輸出功率的光源可以提高成像速度,,在我們的實驗中,時間分辨率主要是受OPO輸出可見光激光功率的限制,。盡管在單點掃描系統(tǒng)中,,v2PE激發(fā)會使得空間分辨率提高,但多聚焦v2PE顯微鏡具有與1PE多聚焦顯微鏡近乎相同的橫向分辨率,,這主要是多聚焦成像和單點掃描技術(shù)之間的差異造成的,。由于v2PE的激發(fā)體積小于1PE,引入圖像掃描技術(shù)可以進(jìn)一步提高空間分辨率,,這種技術(shù)需要通過在陣列前引入額外的微透鏡陣列來實現(xiàn),。除此之外,由于可見光區(qū)域的共振效應(yīng),可能會產(chǎn)生光漂白,,因而為了延長觀察時間,,系統(tǒng)還需要對激發(fā)強(qiáng)度和曝光時間做進(jìn)一步優(yōu)化。用雙光子顯微鏡看看你的皮膚有沒有重?zé)ㄐ律?;進(jìn)口ultimainvestigator雙光子顯微鏡成像視野是多少
臨研所,、病理科和科研處邀請北京大學(xué)王愛民副教授在2020年12月22日做了題目為“新一代微型雙光子顯微成像系統(tǒng)介紹及其在臨床醫(yī)療診斷”的學(xué)術(shù)報告。學(xué)術(shù)報告由臨研所醫(yī)學(xué)實驗研究平臺潘琳老師主持,。王愛民,,北京大學(xué)信息科學(xué)技術(shù)學(xué)院副教授,畢業(yè)于北京大學(xué)物理系,,獲學(xué)士,、碩士學(xué)位,后于英國巴斯大學(xué)物理系獲博士學(xué)位,。該研究組研發(fā)的微型雙光子顯微鏡,,第1次在國際上獲得了小鼠大腦神經(jīng)元和神經(jīng)突觸清晰穩(wěn)定的動態(tài)信號,該成果獲得了2017年度“中國光學(xué)進(jìn)展”和“中國科學(xué)進(jìn)展”,,并被Nature Methods評為2018年度“年度方法--無限制行為動物成像”,。目前,該研究組正在研究新一代雙光子顯微成像技術(shù)在臨床診斷中的應(yīng)用,,為未來即時病理,、離體組織檢測、術(shù)中診斷等提供新的影像手段和分析方法,。熒光激光雙光子顯微鏡代理商如果已經(jīng)有了飛秒光,,就可以幾套雙光子顯微鏡共享一臺,只需分光即可,。
在該自適應(yīng)光學(xué)雙光子熒光顯微鏡中,,她們將空間光位相調(diào)制器光學(xué)共軛到顯微物鏡的后焦平面,通過位相調(diào)制器將入射光分成若干子區(qū)域,,每一塊子區(qū)域的波前都可以被控制,。同時,她們用數(shù)字微陣列光處理器,,以不同的頻率同時調(diào)制其中一半子區(qū)域的入射光強(qiáng)度,,以另一半子區(qū)域作為“參考波前”。來自所有子區(qū)域光束會在焦點處會聚干涉,,通過監(jiān)測焦點激發(fā)的雙光子信號隨時間的變化情況,,并進(jìn)行傅里葉變換分析,可以“分解”得到被調(diào)制的每一塊子區(qū)域的“光線”的貢獻(xiàn)信息,,從而可以實現(xiàn)對一半子區(qū)域波前的并行測量,。對另一半子區(qū)域重復(fù)這一測量過程,,從而獲得整個入射波前的信息并進(jìn)行校正。該方法耗時很短,,通常約1~3分鐘左右即可完成像差的測量和校正,,無需復(fù)雜的計算,適用于任何標(biāo)記密度和標(biāo)記類型的樣品,。更重要的是,,得到的像差校正圖案可以用于提高較大視場范圍內(nèi)的成像質(zhì)量。該方法無疑為在體研究小鼠大腦皮層深層區(qū)域的生物,、醫(yī)學(xué)問題提供了可行性方案,。
從雙光子到三光子:科學(xué)家正在從雙光子轉(zhuǎn)向三光子顯微鏡。1996年,,ChrisXu在康奈爾大學(xué)(Denk同導(dǎo)師實驗室)讀博期間發(fā)明了三光子顯微鏡,,如果雙光子吸收可行,那么三光子看起來也是自然的發(fā)展方向,。三光子成像使用更長的波長,,大約在1.3和1.7微米,其成像深度也比雙光子更深,,目前記錄約為2.2毫米,,人類大腦皮層厚約4毫米。相比雙光子顯微鏡,,三光子還要求以較低重頻使用更強(qiáng)和更短的激光脈沖,,而傳統(tǒng)的鈦寶石激光器難以達(dá)到這些要求,,但是對于摻鐿光纖飛秒光參量放大器則非常容易,,比如我們的Y-Fi光參量放大器(OPA)。雙光子顯微鏡的基本原理是:在高光子密度的情況下,,熒光分子可以同時吸收 2 個長波長的光子,。
TOPTICAFemtoFiberultra920超快光纖激光器是一種易于操作且無需維護(hù)的激光系統(tǒng)。其輸出波長為920nm,,非常適合常規(guī)熒光基團(tuán)(如GFP,,eGFP,Eosin,,GCaMP,,CFP,Calcein或者Venus)的雙光子激發(fā),。能給熒光基團(tuán)提供比較高的峰值功率,,常用于神經(jīng)科學(xué)和其他與激光有關(guān)的生物光子學(xué)學(xué)科。而且其獨特設(shè)計(制造簡單且經(jīng)濟(jì)高效的光源)對雙光子熒光顯微鏡發(fā)展的革新具有潛在的可能,。在雙光子顯微鏡中,,峰值功率就是亮度!如果您希望獲得比較好的圖像亮度,那么你就需要短脈沖,,高功率,,較重要的是需要干凈的時間脈沖形狀。FemtoFiberultra920具有足夠高的輸出功率,,較短的脈沖和獨特的Clean-Pulse技術(shù),,以及具有相對比較高的峰值功率,使得其在雙光子顯微鏡中可以實現(xiàn)****的亮度,,而不會對樣品造成不必要的加熱,。FemtoFiberultra920交鑰匙,完全集成的色散補(bǔ)償(可確保樣品處的脈沖較短),,內(nèi)置的功率控制,,操作直觀以及其堅固而緊湊的設(shè)計,使該系統(tǒng)具有極為友好的用戶體驗,,是非線性顯微鏡應(yīng)用的較好解決方案,。例如熒光蛋白的雙光子激發(fā)和基于SHG的對比機(jī)制。雙光子顯微鏡的原理是什么,?熒光激光雙光子顯微鏡代理商
雙光子顯微鏡型號有哪些,?進(jìn)口ultimainvestigator雙光子顯微鏡成像視野是多少
共聚焦顯微可以呈現(xiàn)這么漂亮的圖像,是不是什么樣品都可以用共聚焦顯微鏡拍拍拍.....得到各種各樣清晰漂亮的圖像呢,?答案是否定的,,任何事物都有優(yōu)缺點,何況一臺儀器呢,,共聚焦顯微鏡也是有自己的局限,共聚焦有哪些局限呢:1.共聚焦顯微鏡只能拍攝約200um以內(nèi)的的樣品,,對于厚的或者樣品不能進(jìn)拍攝;2. 共聚焦顯微鏡由于是逐點進(jìn)行掃描,,對樣品的光毒性還是比較大的,,特別是拍攝活細(xì)胞樣品時就更容易對樣品進(jìn)行淬滅;3. 由于光照射的區(qū)域幾乎能通過這個Z軸的層面,,所以對于空間定點光刺激的實驗定點位置就不是特別精確,;并且激光共聚焦顯微鏡沒有純紫外進(jìn)行激發(fā),對于一些特殊激發(fā)波長的實驗,,效率非常低,。進(jìn)口ultimainvestigator雙光子顯微鏡成像視野是多少
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