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美國全自動多光子顯微鏡三維分辨率

來源: 發(fā)布時間:2023-04-22

現代分子生物學技術的迅速發(fā)展和科技的進步,,特別是隨著后基因組時代的到來,人們已經能夠根據需要建立各種細胞模型,,為在體研究基因表達規(guī)律,、分子間的相互作用、細胞的增殖,、細胞信號轉導,、誘導分化、細胞凋亡以及新的血管生成等提供了良好的生物學條件,。然而,,盡管人們利用現有的分子生物學方法,已經對基因表達和蛋白質之間的相互作用進行了深入,、細致的研究,,但仍然不能實現對蛋白質和基因活動的實時、動態(tài)監(jiān)測,。在細胞的生理過程中,,基因、尤其是蛋白質的表達,、修飾和相萬作用往往發(fā)生可逆的,、動態(tài)的變化。目前的分子生物學方法還不能捕獲到蛋白質和基因的這些變化,,但獲取這些信息對與研究基因的表達和蛋白質之間的相互作用又至關重要,。因此,發(fā)展能用于,、動態(tài),、實時、連續(xù)監(jiān)測蛋白質和基因活動的方法是非常必要的,。顯微鏡產品正拉動市場需求,,多光子顯微鏡市場發(fā)展?jié)摿薮?。美國全自動多光子顯微鏡三維分辨率

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根據阿貝成像原理,許多光學成像系統(tǒng)是一個低通濾波器,,物平面包含從低頻到高頻的信息,,透鏡口徑會限制高頻信息通過,只允許一定的低頻通過,,因此丟失了高頻信息會使成像所得圖像的細節(jié)變模糊,,降低分辨率。對于三維成像來說,,寬場照明時得到的信息不僅包含物鏡焦平面上樣品的部分信息,,同時還包含焦平面外的樣品信息。由于受到焦平面外的信息干擾,,常規(guī)熒光顯微鏡無法獲得層析圖像,。三維結構光照明顯微鏡能夠提高分辨率、獲得層析圖像,,是因為利用特定結構的照明光能引入樣品的高頻信息,,當結構光的空間頻率足夠高時,只有靠近焦面的部分才能被結構光調制,,超出這一區(qū)域,,逐漸轉變?yōu)榫鶆蛘彰鳎簿褪侵挥薪姑娓浇挠邢迏^(qū)域具有相對完整的頻譜信息,,離焦后,,高頻信息迅速衰減,所以使用高頻結構光照明可以區(qū)分焦面和離焦區(qū)域來獲得層析圖像,。然后再通過軸向掃描可以獲取樣品不同深度的焦面圖像,,重建樣品的三維結構。美國多光子顯微鏡峰值功率密度多光子顯微鏡的發(fā)展現狀及未來發(fā)展趨勢,。

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多光子顯微鏡對成像深度的改善利用紅光或紅外光激發(fā),,光散射小(小粒子的散射與波長的四次方的成反比),。不需要***,,能更多收集來自成像截面的散射光子。***不能區(qū)分由離焦區(qū)域或焦點區(qū)發(fā)射出的散射光子,,多光子在深層成像信噪比好,。單光子激發(fā)所用的紫外或可見光在光束到達焦平面之前易被樣品吸收而衰減,不易對深層激發(fā),。多光子熒光成像的特點,。深度成像∶與共聚焦相比能更好地對厚散射物質成像。信噪比∶多光子吸收采用的波長是單光子吸收的2倍以上,所以顯微試樣中的瑞利散射更小,,熒光測定的信噪比更高,。觀察活細胞∶離子測量(i.e.Ca2+),GFP,,發(fā)育生物學等—減少了光毒性和光漂白,,能對細胞長時間觀察。

    Ca2+是重要的第二信使,,對于調節(jié)細胞的生理反應具有重要的作用,,開發(fā)和利用雙光子熒光顯微成像技術對Ca2+熒光信號進行觀測,可以從某些方面對有機體或細胞的變化機制進行分析,,具有重要的意義,。利用雙光子熒光顯微成像技術可以觀察細胞內用熒光探針標記的Ca2*的時間和空間的熒光圖像的變化,還可以觀察細胞某一層面或局部的(Ca2+)熒光圖像和變化,。通過對單細胞的研究發(fā)現,,Ca2+不僅在細胞局部區(qū)域間的分布是不均勻的,而且細胞內各局部區(qū)域的不同深度或層次間也存在不同程度的Ca2+梯差即所謂的空間Ca2梯差,。中國市場多光子顯微鏡進出口貿易趨勢。

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2020年,,TonmoyChakraborty等人提出了加速2PM軸向掃描速度的方法[2],。在光學顯微鏡中,物鏡或樣品緩慢的軸向掃描速度限制了體成像的速度,。近年來,,通過使用遠程聚焦技術或電調諧透鏡(ETL)已經實現了快速軸向掃描。但遠程對焦時對反射鏡的機械驅動會限制軸向掃描速度,,ETL會引入球差和高階像差,,無法進行高分辨率成像。為了克服這些限制,,該小組引入了一種新的光學設計,,可以將橫向掃描轉換為無球面像差的軸向掃描,以實現高分辨率成像,。有兩種方法可以實現這種設計,。***個可以執(zhí)行離散的軸向掃描,另一個可以執(zhí)行連續(xù)的軸向掃描,。如圖3a所示,,特定裝置由兩個垂直臂組成,每個臂具有4F望遠鏡和物鏡,。遠程聚焦臂由振鏡掃描鏡(GSM)和空氣物鏡(OBJ1)組成,,另一個臂(稱為照明臂)由浸沒物鏡(OBJ2)組成。兩個臂對齊,使得GSM與兩個物鏡的后焦平面共軛,。準直后的激光束經偏振分束器反射進入遠程聚焦臂,,由GSM進行掃描,使OBJ1產生的激光焦點可以進行水平掃描,。多光子顯微鏡是衡量一個國家制造業(yè)和高科技發(fā)展水平的重要標準之一,。離體多光子顯微鏡代理商

生產和消費的角度分析多光子顯微鏡的主要生產地區(qū)、主要消費地區(qū)以及主要的生產商,。美國全自動多光子顯微鏡三維分辨率

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