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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-20

配合了雙光子激發(fā)技術(shù),激光共聚掃描顯微鏡則能更好得發(fā)揮功效,。那么什么是雙光子激發(fā)技術(shù)呢,?在高光子密度的情況下,熒光分子可以同時(shí)吸收2個(gè)長(zhǎng)波長(zhǎng)的光子使電子躍遷到較高能級(jí),,經(jīng)過(guò)一個(gè)很短的時(shí)間后,,電子再躍遷回低能級(jí)同時(shí)放出一個(gè)波長(zhǎng)為長(zhǎng)波長(zhǎng)一半的光子(P=h/λ),。利用這個(gè)原理,便誕生了雙光子激發(fā)技術(shù),。雙光子顯微鏡使用長(zhǎng)波長(zhǎng)脈沖激光,,通過(guò)物鏡匯聚,,由于雙光子激發(fā)需要很高的光子密度,,而物鏡焦點(diǎn)處的光子密度是比較高的,所以只有在焦點(diǎn)處才能發(fā)生雙光子激發(fā),,產(chǎn)生熒光,,該點(diǎn)產(chǎn)生的熒光再穿過(guò)物鏡,被光探頭接收,,從而達(dá)到逐點(diǎn)掃描的效果,。雙光子顯微鏡可以用于局部微蝕鐳射磨皮后的膠原重塑的檢測(cè)。美國(guó)ultima2PPLUS雙光子顯微鏡廠家電話

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使用雙光子顯微鏡可以以亞細(xì)胞分辨率對(duì)鈣離子傳感器和谷氨酸傳感器成像,,從而測(cè)量不透明大腦深處的活動(dòng),;成像膜電壓變化能直接反映神經(jīng)元活動(dòng),但神經(jīng)元活動(dòng)的速度對(duì)于常規(guī)的2PM來(lái)說(shuō)太快,。目前電壓成像主要通過(guò)寬場(chǎng)顯微鏡實(shí)現(xiàn),,但它的空間分辨率較差并且只是于淺層深度。因此要在不透明的大腦中以高空間分辨率對(duì)膜電壓變化進(jìn)行成像,,需要較提高2PM的成像速率,。FACED模塊輸出處的子脈沖序列可以看作從虛擬光源陣列發(fā)出的光,這些子脈沖在中繼到顯微鏡物鏡后形成了一個(gè)空間上分離且時(shí)間延遲的焦點(diǎn)陣列,。然后將該模塊并入具有高速數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)雙光子熒光顯微鏡中,,如圖2所示。光源是具有1MHz重復(fù)頻率的920nm的激光器,,通過(guò)FACED模塊可產(chǎn)生80個(gè)脈沖焦點(diǎn),,其脈沖時(shí)間間隔為2ns。這些焦點(diǎn)是虛擬源的圖像,,虛擬源越遠(yuǎn),,物鏡處的光束尺寸越大,焦點(diǎn)越小,。光束沿y軸比x軸能更好地充滿物鏡,,從而導(dǎo)致x軸的橫向分辨率為0.82μm,y軸的橫向分辨率為0.35μm,。進(jìn)口investigator雙光子顯微鏡成像視野是多少雙光子顯微鏡放大倍數(shù)是多少,?

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臨研所、病理科和科研處邀請(qǐng)北京大學(xué)王愛(ài)民副教授在2020年12月22日做了題目為“新一代微型雙光子顯微成像系統(tǒng)介紹及其在臨床醫(yī)療診斷”的學(xué)術(shù)報(bào)告,。學(xué)術(shù)報(bào)告由臨研所醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究平臺(tái)潘琳老師主持,。王愛(ài)民,,北京大學(xué)信息科學(xué)技術(shù)學(xué)院副教授,畢業(yè)于北京大學(xué)物理系,,獲學(xué)士,、碩士學(xué)位,后于英國(guó)巴斯大學(xué)物理系獲博士學(xué)位,。該研究組研發(fā)的微型雙光子顯微鏡,,第1次在國(guó)際上獲得了小鼠大腦神經(jīng)元和神經(jīng)突觸清晰穩(wěn)定的動(dòng)態(tài)信號(hào),該成果獲得了2017年度“中國(guó)光學(xué)進(jìn)展”和“中國(guó)科學(xué)進(jìn)展”,,并被NatureMethods評(píng)為2018年度“年度方法--無(wú)限制行為動(dòng)物成像”,。目前,該研究組正在研究新一代雙光子顯微成像技術(shù)在臨床診斷中的應(yīng)用,,為未來(lái)即時(shí)病理,、離體組織檢測(cè)、術(shù)中診斷等提供新型的影像手段和分析方法,。

雙光子顯微鏡(2PM)可以對(duì)鈣離子傳感器和谷氨酸傳感器進(jìn)行亞細(xì)胞分辨率的成像,,從而測(cè)量不透明腦深部的活動(dòng)。成像膜的電壓變化可以直接反映神經(jīng)元的活動(dòng),,但神經(jīng)元活動(dòng)的速度對(duì)于常規(guī)的2PM來(lái)說(shuō)太快了,。目前,電壓成像主要由寬視場(chǎng)顯微鏡實(shí)現(xiàn),,但其空間分辨率較差,,且只能在淺深度成像。因此,,為了以高空間分辨率成像不透明腦中膜電壓的變化,,需要將成像速率提高2PM。面向模塊輸出端的子脈沖序列可視為從虛擬光源陣列發(fā)出的光,,這些子脈沖在中繼到顯微鏡物鏡后形成空間分離和時(shí)間延遲的聚焦陣列,。然后,該模塊被集成到一個(gè)帶有高速數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)雙光子熒光顯微鏡中,,如圖2所示,。光源是重復(fù)頻率為1MHz的920nm激光器。FACED模塊可以產(chǎn)生80個(gè)脈沖焦點(diǎn),,脈沖時(shí)間間隔為2ns,。這些焦點(diǎn)是虛擬源的圖像。虛光源越遠(yuǎn),,物鏡處的光束尺寸越大,,焦點(diǎn)越小。光束可以沿Y軸比沿X軸更好地填充物鏡,從而在X軸上產(chǎn)生0.82m和0.35m的橫向分辨率,。在深度組織中以較長(zhǎng)時(shí)間對(duì)細(xì)胞成像,,雙光子顯微鏡是當(dāng)前之選。

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2020年,,臨研所,、病理科和科研處邀請(qǐng)北京大學(xué)王愛(ài)民副教授做了題目為“新一代微型雙光子顯微成像系統(tǒng)介紹及其在臨床醫(yī)療診斷”的學(xué)術(shù)報(bào)告。學(xué)術(shù)報(bào)告由臨研所醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究平臺(tái)潘琳老師主持,。王愛(ài)民,,北京大學(xué)信息科學(xué)技術(shù)學(xué)院副教授,畢業(yè)于北京大學(xué)物理系,,獲學(xué)士,、碩士學(xué)位,,后于英國(guó)巴斯大學(xué)物理系獲博士學(xué)位,。該研究組研發(fā)的微型雙光子顯微鏡,第1次在國(guó)際上獲得了小鼠大腦神經(jīng)元和神經(jīng)突觸清晰穩(wěn)定的動(dòng)態(tài)信號(hào),,該成果獲得了2017年度“中國(guó)光學(xué)進(jìn)展”和“中國(guó)科學(xué)進(jìn)展”,,并被NatureMethods評(píng)為2018年度“年度方法--無(wú)限制行為動(dòng)物成像”。目前,,該研究組正在研究新一代雙光子顯微成像技術(shù)在臨床診斷中的應(yīng)用,,為未來(lái)即時(shí)病理、離體組織檢測(cè),、術(shù)中診斷等提供新的影像手段和分析方法,。雙光子顯微鏡結(jié)合了雙光子激發(fā)技術(shù)和激光掃描共聚顯微鏡。ultima2PPLUS雙光子顯微鏡掃描深度

雙光子顯微鏡工作原理是利用兩個(gè)光子的能量相加達(dá)到熒光激發(fā)能量閾值,,來(lái)激發(fā)樣品中熒光分子發(fā)出熒光信號(hào),。美國(guó)ultima2PPLUS雙光子顯微鏡廠家電話

雙光子技術(shù)在醫(yī)學(xué)診斷方面有著巨大的應(yīng)用潛力。這方面沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)和體系,,需要系統(tǒng)的醫(yī)學(xué)研究和龐大的醫(yī)學(xué)數(shù)據(jù)支撐,。通過(guò)基于多光子成像技術(shù)研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)、生化成分,、微環(huán)境,、組織形態(tài)、代謝功能的影響信息,,可以發(fā)現(xiàn)與細(xì)胞學(xué),、分子生物學(xué)、組織病理學(xué),、疾病的診斷和特征的關(guān)系,。共同探索生理病理基礎(chǔ)和分子細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制,篩選皮膚病、自身免疫性疾病等疑難疾病的識(shí)別,、診斷和鑒別診斷依據(jù),,建立全新完整的多光子細(xì)胞診斷數(shù)據(jù)庫(kù),明確不同疾病的多光子臨床檢測(cè)設(shè)備產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn),。在討論環(huán)節(jié),,來(lái)自病理科、呼吸中心,、心內(nèi)科,、神經(jīng)內(nèi)科、皮膚科,、研究所的多位醫(yī)生和科研人員結(jié)合各自的工作領(lǐng)域,,與王愛(ài)民副教授進(jìn)行了熱烈的討論。其中,,毛發(fā)中心楊頂權(quán)主任擬再次邀請(qǐng)王愛(ài)民副教授進(jìn)行學(xué)術(shù)交流,。通過(guò)此次學(xué)術(shù)交流,病理學(xué)系和研究所分別與王愛(ài)民副教授課題組達(dá)成了初步合作意向,。美國(guó)ultima2PPLUS雙光子顯微鏡廠家電話