雙光子顯微鏡是一種先進的成像技術,,可以在保持細胞活性的情況下,,對深層組織進行高分辨率成像,。它主要用于生物學,、醫(yī)學和材料科學等領域的研究,。雙光子顯微鏡的重心技術是基于雙光子激發(fā)的熒光成像,。當激光通過樣品時,,它會吸收特定波長的光子,,然后發(fā)出熒光,。雙光子顯微鏡使用兩個連續(xù)的光子同時激發(fā)樣品,這樣可以在保持樣品完整性的同時,,獲得高質量的圖像,。雙光子顯微鏡具有以下優(yōu)點:1.高分辨率:由于雙光子激發(fā)的特性,它可以獲得比傳統(tǒng)顯微鏡更高的分辨率,。2.深層成像:由于激光的穿透深度限制,,傳統(tǒng)的光學顯微鏡無法對深層組織進行成像。而雙光子顯微鏡可以解決這個問題,,因為它可以激發(fā)樣品的深層熒光,。3.活細胞成像:雙光子顯微鏡可以在保持細胞活性的情況下進行成像,這對于研究細胞生理學和生物化學過程非常有用,。4.多模式成像:雙光子顯微鏡可以結合多種技術,,如光譜成像、鈣離子成像和神經(jīng)活動成像等,,以提供更豐富的生物樣品信息,。總之,,雙光子顯微鏡是一種強大的研究工具,,可以對深層組織和活細胞進行無損成像。這使得它在生物學,、醫(yī)學和材料科學等領域的研究中具有廣泛的應用,。微型雙光子顯微鏡的優(yōu)勢是。進口investigator雙光子顯微鏡聯(lián)系方式
隨著技術的發(fā)展,,雙光子顯微鏡的性能得到不斷地優(yōu)化,,結合它的特點,,大致可以分成深和活兩個方面的提升,。要想讓激發(fā)激光進入更深的層面,,大致可從兩個方面入手,裝置優(yōu)化與標本改造,。關于裝置優(yōu)化,,我們可以把激光束變得更細,使能量更加集中,,就能讓激光穿透更深,。關于標本,其中影響光傳播的主要是物質吸收和散射,,解決這個問題,,我們需要對樣本進行透明化處理。一種方法是運用某種物質將標本浸泡,,使其中的物質(主要是脂質)被破壞或溶解,。另一種方法是運用電泳將脂質電解,讓標本的“透明度”提高,。美國布魯克雙光子顯微鏡光刺激雙光子顯微鏡供應商找因斯蔻浦(上海)生物科技有限公司,。
2020年,臨研所,、病理科和科研處邀請北京大學王愛民副教授做了題目為“新一代微型雙光子顯微成像系統(tǒng)介紹及其在臨床醫(yī)療診斷”的學術報告,。學術報告由臨研所醫(yī)學實驗研究平臺潘琳老師主持。王愛民,,北京大學信息科學技術學院副教授,,畢業(yè)于北京大學物理系,獲學士,、碩士學位,,后于英國巴斯大學物理系獲博士學位。該研究組研發(fā)的微型雙光子顯微鏡,,第1次在國際上獲得了小鼠大腦神經(jīng)元和神經(jīng)突觸清晰穩(wěn)定的動態(tài)信號,,該成果獲得了2017年度“中國光學進展”和“中國科學進展”,并被NatureMethods評為2018年度“年度方法--無限制行為動物成像”,。目前,,該研究組正在研究新一代雙光子顯微成像技術在臨床診斷中的應用,為未來即時病理,、離體組織檢測,、術中診斷等提供新的影像手段和分析方法。
配合了雙光子激發(fā)技術,,激光共聚掃描顯微鏡則能更好得發(fā)揮功效,。那么什么是雙光子激發(fā)技術呢,?在高光子密度的情況下,熒光分子可以同時吸收2個長波長的光子使電子躍遷到較高能級,,經(jīng)過一個很短的時間后,,電子再躍遷回低能級同時放出一個波長為長波長一半的光子(P=h/λ)。利用這個原理,,便誕生了雙光子激發(fā)技術,。雙光子顯微鏡使用長波長脈沖激光,通過物鏡匯聚,,由于雙光子激發(fā)需要很高的光子密度,,而物鏡焦點處的光子密度是比較高的,所以只有在焦點處才能發(fā)生雙光子激發(fā),,產(chǎn)生熒光,,該點產(chǎn)生的熒光再穿過物鏡,被光探頭接收,,從而達到逐點掃描的效果,。雙光子顯微鏡是結合了雙光子技術和掃描共聚顯微鏡的一種新型熒光顯微鏡。
從雙光子的原理和特點我們就可以明顯的得出雙光子的優(yōu)點:☆光損傷?。河捎陔p光子顯微鏡使用的是可見光或近紅外光作為激發(fā)光源,,這一波段的光對***細胞和組織的光損傷小,適用于長時間的研究,;☆穿透能力強:相對于紫外光,,可見光和近紅外光都具有更強的穿透能力,因而受生物組織散射的影響更小,,解決對生物組織中深層物質的層析成像研究問題,;☆高分辨率:由于雙光子吸收截面很小,只有在焦平面很小的區(qū)域內可以激發(fā)出熒光,,雙光子吸收只局限于焦點處的體積約為波長3次方的范圍內,;☆漂白區(qū)域小:由于激發(fā)只存在于交點處,,所以焦點以外的區(qū)域都不會發(fā)生光漂白現(xiàn)象,;☆熒光收集率高:與共聚焦成像相比,雙光子成像不需要光學濾波器(共焦***),,這樣就提高了對熒光的收集率,,而收集率的提高直接導致圖像對比度的提高;☆圖像對比度高:由于熒光波長小于入射波長,,因而瑞利散射產(chǎn)生的背景噪聲只有單光子激發(fā)時的1/16,,較大降低了散射的干擾;☆光子躍遷具有很強的選擇激發(fā)性,所以可以對生物組織中一些特殊物質進行成像研究,;雙光子顯微鏡有哪些應用呢,?進口激光雙光子顯微鏡授權供應商
雙光子顯微鏡有這么多優(yōu)點,那么雙光子顯微鏡有哪些應用呢,?進口investigator雙光子顯微鏡聯(lián)系方式
美國霍華德·休斯醫(yī)學研究所在JaneliaFarmResearchCampus的吉娜博士小組與來自中科院上海光機所強場激光物理國家重點實驗室的王琛博士較近成功將一種新的自適應光學的方法和雙光子顯微鏡結合,,研制出一種新的自適應光學雙光子熒光顯微鏡。通過校正小鼠大腦的像差,,在視覺皮層的不同深度處均獲得了提高數(shù)倍的成像分辨率和信號強度,,明顯改進了成像質量,使得原來在鼠腦中不可見或者模糊的細節(jié)變得清晰可見,,她們成功將該方法應用于老鼠視覺皮層第五層(約500μm)的形貌結構成像和鈣離子功能成像。這一新的自適應光學方法,,使得在小鼠深層區(qū)域成像中獲得近衍射極限的成像分辨率成為現(xiàn)實,。這一成果發(fā)表在較新一期的《NatureMethods》。進口investigator雙光子顯微鏡聯(lián)系方式