可見光激發(fā)Ca2+熒光探針與紫外光激發(fā)探針相比,，可見光激發(fā)Ca2+探針具有更強(qiáng)的染料吸收性能，對(duì)Ca2+變化水平檢測(cè)敏感度也更高,，能夠降低對(duì)活細(xì)胞的光毒性和樣品自發(fā)熒光以及光散射的干擾，且無光譜偏移,。常使用的可見光激發(fā)Ca2+熒光探針有Fluo-3,，F(xiàn)luo-4，Rhod-2等,，同時(shí)他們也都是非比率型指示劑,。Fluo-3是常用的可見光激發(fā)Ca2+熒光指示劑之一，是典型的的單波長(zhǎng)指示劑,，比較大激發(fā)波長(zhǎng)為506nm,，比較大發(fā)射波長(zhǎng)為526nm。它與Ca2+結(jié)合之前幾乎無熒光,，結(jié)合后熒光會(huì)增加60至100倍,，從而避免了細(xì)胞自身的熒光干擾。實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為488nm左右,，發(fā)射波長(zhǎng)為525～530nm,。Fluo-3可以用在激光共聚焦顯微成像或流式細(xì)胞儀中。它還有一個(gè)升級(jí)版本Fluo-4,，在相同Ca2+濃度下信號(hào)更強(qiáng),。鈣離子是哺乳動(dòng)物神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的重要信使。深圳神經(jīng)細(xì)胞鈣成像nVoke

麻省理工學(xué)院和波士頓大學(xué)的研究人員近研究使用一種熒光探針，能夠在大腦細(xì)胞處于電活動(dòng)狀態(tài)時(shí)點(diǎn)亮,，可以立即對(duì)小鼠大腦中多個(gè)神經(jīng)元的活動(dòng)進(jìn)行成像,。麻省理工學(xué)院的腦科學(xué)和認(rèn)知科學(xué)神經(jīng)技術(shù)教授、兼生物工程學(xué)教授EdwardBoyden表示,，只需要使用簡(jiǎn)單的光學(xué)顯微鏡,，即可實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)技術(shù)。神經(jīng)科學(xué)家可以將大腦內(nèi)電路的活動(dòng)進(jìn)行可視化,，并將其與特定行為聯(lián)系起來,。“如果想研究一種行為或疾病,，就需要對(duì)神經(jīng)元群體的活動(dòng)進(jìn)行成像,，讓這些神經(jīng)元群網(wǎng)絡(luò)中協(xié)同工作?！盉oyden說,。西安熒光鈣成像大概費(fèi)用鈣信號(hào)在神經(jīng)元功能調(diào)控及信息傳遞方面發(fā)揮著重要作用。

大家都知道,，只有游離鈣才具有生物學(xué)活性,，而細(xì)胞質(zhì)內(nèi)鈣離子濃度由鈣離子的內(nèi)外流平衡所決定，同時(shí)也受鈣結(jié)合蛋白的影響,。細(xì)胞外鈣離子內(nèi)流的方式有很多種,，其中包括電壓門控鈣離子通道、離子型谷氨酰胺受體,、煙堿型膽堿能受體（nAChR）和瞬時(shí)受體電位C型通道（TRPC）等,。神經(jīng)元鈣成像的原理就是利用特殊的熒光染料或鈣離子指示劑將神經(jīng)元中鈣離子濃度的變化通過熒光強(qiáng)度表現(xiàn)出來，以反映神經(jīng)元活性,。該方法可以同時(shí)觀察多個(gè)功能或位置相關(guān)的腦細(xì)胞,。

鈣離子成像系統(tǒng)：傳統(tǒng)的寬場(chǎng)熒光顯微鏡由于光散射的影響，只能夠?qū)Υ竽X淺層的神經(jīng)元或在離體組織上進(jìn)行成像,，共聚焦顯微鏡由于光損傷較大,，一般也只用于離體鈣成像。隨著熒光顯微鏡技術(shù)的迅速發(fā)展,，在體鈣成像技術(shù)得到了蓬勃發(fā)展,。雙光子熒光顯微鏡能夠在進(jìn)行成像的時(shí)候?qū)崿F(xiàn)高分辨率和高信噪比。例如,，用雙光子顯微鏡對(duì)海馬樹突棘的鈣離子信號(hào)進(jìn)行成像,，研究神經(jīng)元突觸后長(zhǎng)時(shí)程控制(Wangetal.,2000)；觀察小鼠運(yùn)動(dòng)皮層神經(jīng)元在嗅覺選擇任務(wù)中刺激相關(guān)電位(Komiyamaetal.,2010)等等,。不過,，這些實(shí)驗(yàn)還是需要對(duì)動(dòng)物進(jìn)行麻醉和固定,，而神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域很多研究更希望能夠?qū)ψ杂苫顒?dòng)的動(dòng)物進(jìn)行研究。近年來出現(xiàn)了通過植入性的microscope或microlens進(jìn)行freelymoving動(dòng)物鈣成像的技術(shù),。如圖6中所示的光纖成像法：使用一端帶有GRINlens的光纖連接顯微鏡和動(dòng)物大腦,，從特定腦區(qū)發(fā)出的熒光信號(hào)被光纖收集，然后通過相機(jī)成像,。動(dòng)物頭部只需植入GRINlens,，方便活動(dòng)，而且可以同時(shí)植入多個(gè)lens來觀察不同的腦區(qū)之間的聯(lián)系和相互作用,。不過這種成像方法的視野較小,，分辨率也比較差。有了鈣成像技術(shù),，原本悄無聲息的神經(jīng)活動(dòng)就變成了一幅斑斕閃爍的壯觀影像,。

想要對(duì)鈣離子的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行有效的檢測(cè)，鈣離子指示劑的選擇顯得尤為重要,。鈣離子熒光指示劑在未結(jié)合鈣離子前幾乎無熒光,，與鈣離子結(jié)合后，熒光強(qiáng)度xianzhu增強(qiáng),。利用這一原理,，可以通過指示劑的信號(hào)強(qiáng)弱來觀察細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度水平的變化。根據(jù)激發(fā)光波長(zhǎng)范圍,，鈣離子指示劑可以分為可見光激發(fā)和紫外光激發(fā),，而根據(jù)其工作原理又可以分為比率和非比率型。常見的鈣離子指示劑有以下幾種：紫外光激發(fā)Ca2+熒光探針,、可見光激發(fā)Ca2+熒光探針,、轉(zhuǎn)基因Ca2+指示劑?？梢詫?duì)深部腦區(qū)、皮層區(qū)域等大部分腦區(qū)進(jìn)行鈣成像使用鈣離子指示蛋白,。上海inscopix鈣成像價(jià)格多少

鈣離子成像可以用于感知覺,，學(xué)習(xí)記憶，社會(huì)性行為等各種各樣的研究中,。深圳神經(jīng)細(xì)胞鈣成像nVoke

nVista神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)是可以在自由活動(dòng)的動(dòng)物上進(jìn)行大范圍的動(dòng)態(tài)熒光成像的設(shè)備,。通過nVist，您可以視覺化細(xì)胞活動(dòng),，同步行為學(xué),，以及長(zhǎng)期追蹤神經(jīng)環(huán)路的活動(dòng)。nVista被應(yīng)用于全球的研究機(jī)構(gòu)中,，產(chǎn)生了影響力的大數(shù)據(jù)庫,。主要特征：利用GCamp鈣離子探針進(jìn)行成像功能完整的數(shù)據(jù)采集軟件,，實(shí)現(xiàn)對(duì)焦，調(diào)焦,，行為同步化單細(xì)胞分辨率下,，可同時(shí)捕獲成百上千神經(jīng)元活動(dòng)長(zhǎng)時(shí)間追蹤細(xì)胞，追蹤時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)數(shù)月電子對(duì)焦,，保證視野范圍的恒定自由動(dòng)物行為學(xué)：可運(yùn)用標(biāo)準(zhǔn)行為學(xué)測(cè)量方法,，行為操作箱，迷宮,，曠場(chǎng)等可進(jìn)行皮層,，深部核團(tuán)，以及腦干,，中腦等區(qū)域的成像記錄動(dòng)物無需進(jìn)行適應(yīng)性訓(xùn)練鈣離子成像+自由活動(dòng)行為學(xué)1.錨定特殊細(xì)胞類型,，例如特定的receptor/promotor/geneticmarker2.單細(xì)胞的空間分辨率，可以分析細(xì)胞在空間內(nèi)的mapping和編碼信息3.動(dòng)物可在大范圍的曠場(chǎng)內(nèi)自由活動(dòng)4.長(zhǎng)時(shí)程追蹤同一細(xì)胞的放電規(guī)律變化：用于學(xué)習(xí),，記憶,，藥物成癮等研究。5.可對(duì)腦內(nèi)的深部核團(tuán)進(jìn)行記錄nVista神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)成像效果好,。神經(jīng)元超微鈣成像系統(tǒng)技術(shù)參數(shù)專業(yè)的數(shù)據(jù)采集軟件Inscopix數(shù)據(jù)采集軟件可記錄成百上千個(gè)神經(jīng)元細(xì)胞,。電子調(diào)焦功能，可通過軟件實(shí)現(xiàn)物理調(diào)焦,。深圳神經(jīng)細(xì)胞鈣成像nVoke