全細(xì)胞膜片鉗記錄（whole-cellpatch-clamprecording）是應(yīng)用*早，也是*廣的鉗位技術(shù)，它相當(dāng)于連續(xù)的單電極電壓鉗位記錄,，也就是說全細(xì)胞記錄類似于傳統(tǒng)的細(xì)胞內(nèi)記錄,，但它具有更大的優(yōu)越性，如高分辨率,、低噪聲,、極好的穩(wěn)定性以及能控制細(xì)胞內(nèi)的成分等。全細(xì)胞記錄技采測(cè)定的是一個(gè)細(xì)胞內(nèi)全部**通道的電流,，記錄過程中電極的溶液取代了原細(xì)胞質(zhì)的成分,。雖然膜片鉗記錄技術(shù)與*初的單電極電壓鉗位相比進(jìn)步了很多，尤其在單離子通道鉗位記錄方面,，細(xì)胞或腦片的組織選擇及實(shí)驗(yàn)溶液的制備仍然是很重要的步驟,。滔博生物TOP-Bright專注基于多種離子通道靶點(diǎn)的化合物體外篩選,服務(wù)于全球藥企的膜片鉗公司,快速獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果,專業(yè)團(tuán)隊(duì),7*45小時(shí)隨時(shí)人工在線咨詢.膜片鉗技術(shù)的建立，對(duì)生物學(xué)科學(xué)特別是神經(jīng)科學(xué)是一資有重大意義的變革,。日本腦片膜片鉗研究

在心血管藥理研究中的應(yīng)用,，隨著膜片鉗技術(shù)在心血管方面的廣泛應(yīng)用，對(duì)血管疾病和藥物作用的認(rèn)識(shí)不僅得到了不斷更新,，而且在其病因?qū)W與藥理學(xué)方面還形成了許多新的觀點(diǎn),。正如諾貝爾基金會(huì)在頒獎(jiǎng)時(shí)所說：“Neher和Sadmann的貢獻(xiàn)有利于了解不同疾病機(jī)理，為研制新的更為的藥物開辟了道路”,。目前在離子通道高通量篩選中主要是進(jìn)行樣品量大,、篩選速度占優(yōu)勢(shì)、信息量要求不太高的初級(jí)篩選,。近幾年,，分別形成了以膜片鉗和熒光探針為基礎(chǔ)的兩大主流技術(shù)市場(chǎng)。將電生理研究信息量大,、靈敏度高等特點(diǎn)與自動(dòng)化,、微量化技術(shù)相結(jié)合，產(chǎn)生了自動(dòng)化膜片鉗等一些新技術(shù),。美國(guó)全細(xì)胞膜片鉗哪家好以膜片鉗為鑰匙,，打開細(xì)胞離子通道研究的大門！

膜片鉗在通道研究中的重要作用用膜片鉗技術(shù)可以直接觀察和分辨單離子通道電流及其開閉時(shí)程,、區(qū)分離子通道的離子選擇性,、同時(shí)可發(fā)現(xiàn)新的離子通道及亞型,，并能在記錄單細(xì)胞電流和全細(xì)胞電流的基礎(chǔ)上進(jìn)一步計(jì)算出細(xì)胞膜上的通道數(shù)和開放概率，還可以用以研究某些胞內(nèi)或胞外物質(zhì)對(duì)離子通道開閉及通道電流的影響等,。同時(shí)用于研究細(xì)胞信號(hào)的跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞分泌機(jī)制,。結(jié)合分子克隆和定點(diǎn)突變技術(shù)，膜片鉗技術(shù)可用于離子通道分子結(jié)構(gòu)與生物學(xué)功能關(guān)系的研究,。利用膜片鉗技術(shù)還可以用于藥物在其靶受體上作用位點(diǎn)的分析,。如神經(jīng)元煙堿受體為配體門控性離子通道，膜片鉗全細(xì)胞記錄技術(shù)通過記錄煙堿誘發(fā)電流,，可直觀地反映出神經(jīng)元煙堿受體活動(dòng)的全過程,，包括受體與其激動(dòng)劑和拮抗劑的親和力，離子通道開放,、關(guān)閉的動(dòng)力學(xué)特征及受體的失敏等活動(dòng),。使用膜片鉗全細(xì)胞記錄技術(shù)觀察拮抗劑對(duì)煙堿受體激動(dòng)劑量效曲線的影響，來確定其作用的動(dòng)力學(xué)特征,。然后根據(jù)分析拮抗劑對(duì)受體失敏的影響,，拮抗劑的作用是否有電壓依賴性、使用依賴性等特點(diǎn),，可從功能上區(qū)分拮抗劑在煙堿受體上的不同作用位點(diǎn),，即判斷拮抗劑是作用在受體的激動(dòng)劑識(shí)別位點(diǎn)，離子通道抑或是其它的變構(gòu)位點(diǎn)上,。

對(duì)電極持續(xù)施加一個(gè)1mV,、10～50ms的階躍脈沖刺激，電極入水后電阻約4～6MΩ,，此時(shí)在計(jì)算機(jī)屏幕顯示框中可看到測(cè)試脈沖產(chǎn)生的電流波形,。開始時(shí)增益不宜設(shè)得太高，一般可在1～5mV/pA,，以免放大器飽和,。由于細(xì)胞外液與電極內(nèi)液之間離子成分的差異造成了液結(jié)電位，故一般電極剛?cè)胨畷r(shí)測(cè)試波形基線并不在零線上,，須首先將保持電壓設(shè)置為0mV,，并調(diào)節(jié)“電極失調(diào)控制“使電極直流電流接近于零。用微操縱器使電極靠近細(xì)胞,，當(dāng)電極前列與細(xì)胞膜接觸時(shí)封接電阻指示Rm會(huì)有所上升,，將電極稍向下壓，Rm指示會(huì)進(jìn)一步上升,。通過細(xì)塑料管向電極內(nèi)稍加負(fù)壓,，細(xì)胞膜特性良好時(shí)，Rm一般會(huì)在1min內(nèi)快速上升，直至形成GΩ級(jí)的高阻抗封接,。一般當(dāng)Rm達(dá)到100MΩ左右時(shí),，電極前列施加輕微負(fù)電壓(-30～-10mV)有助于GΩ封接的形成。此時(shí)的現(xiàn)象是電流波形再次變得平坦,，使電極超極化由-40到-90mV,，有助于加速形成封接。為證實(shí)GΩ封接的形成,，可以增加放大器的增益,，從而可以觀察到除脈沖電壓的首尾兩端出現(xiàn)電容性脈沖前列電流之外，電流波形仍呈平坦?fàn)?。滔博生物TOP-Bright專注基于多種離子通道靶點(diǎn)的化合物體外篩選,服務(wù)于全球藥企的膜片鉗公司,快速獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果,專業(yè)團(tuán)隊(duì),7*55小時(shí)隨時(shí)人工在線咨詢.膜片鉗放大器系統(tǒng)包括三個(gè)成分：膜片鉗放大器,、數(shù)模模數(shù)轉(zhuǎn)換器、采集分析軟件,，我們俗稱三件套。

膜片鉗技術(shù)是神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域非常重要的一項(xiàng)技術(shù),，1976年由國(guó)馬普生物物理研究所Neher和Sakmann發(fā)明,，從而在活細(xì)胞上記錄到單個(gè)離子通道的電流。近半個(gè)世紀(jì)來,，膜片鉗技術(shù)已經(jīng)成為神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域較常用也是較實(shí)用的技術(shù)之一,，具有極大的精確性和靈活性，能夠揭示離子通道,，單細(xì)胞突觸反應(yīng),，及神經(jīng)環(huán)路連接等多層次的電生理特性。做過膜片鉗的人都知道,，膜片鉗的信號(hào)采集設(shè)備一般由前置放大器,，放大器，模數(shù)/數(shù)模轉(zhuǎn)換器等構(gòu)成,，神經(jīng)元電信號(hào)先通過前置放大器（headstage）初步放大,，后傳輸入放大器進(jìn)一步放大，再傳入模數(shù)轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)化為數(shù)字信號(hào),，后被計(jì)算機(jī)采集,。下圖顯示的是我們較常使用的AXON和HEKA膜片鉗的一個(gè)信號(hào)傳輸路徑。由于膜片鉗檢測(cè)的是PA級(jí)的微電流信號(hào),，因此需要特殊的放大器及模數(shù)轉(zhuǎn)換器,。進(jìn)口腦片膜片鉗離子電流

膜電導(dǎo)測(cè)定的依據(jù)是電學(xué)中的歐姆定律。日本腦片膜片鉗研究

膜片鉗技術(shù)與其它技術(shù)相結(jié)合Neher等**將膜片鉗技術(shù)與Fura2熒光測(cè)鈣技術(shù)結(jié)合,，同時(shí)進(jìn)行如細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度,、細(xì)胞膜離子通道電流及細(xì)胞膜電容等多指標(biāo)變化的快速交替測(cè)定，這樣便可得出同一事件過程中，多種因素各自的變化情況,，進(jìn)而可分析這些變化間的相互關(guān)系,。Neher將可光解出鈣離子的鈣螯合物引入膜片鉗技術(shù)，進(jìn)而可以定量研究鈣離子濃度與分泌率的關(guān)系及比較大分泌率等指標(biāo),。他又創(chuàng)膜片鉗的膜電容檢測(cè)與碳纖電極電化學(xué)檢測(cè)聯(lián)合運(yùn)用的技術(shù),。之后又將光電聯(lián)合檢測(cè)技術(shù)與碳纖電極電化學(xué)檢測(cè)技術(shù)首先結(jié)合起來。這種結(jié)合既能研究分泌機(jī)制,，又能鑒別分泌物質(zhì),，還能互相彌補(bǔ)各單種方法的不足。Eberwine等于1991年首先將膜片鉗技術(shù)與RT-PCR技術(shù)結(jié)合起來運(yùn)用,，可對(duì)形態(tài)相似而電活動(dòng)不同的結(jié)果作出分子水平的解釋,，從此開始了膜片鉗與分子生物學(xué)技術(shù)相結(jié)合的時(shí)代∶基因重組技術(shù)，膜通道蛋白重建技術(shù),。日本腦片膜片鉗研究