重組型TEV蛋白酶(rTEV)是經(jīng)過基因工程改造和純化后的重組蛋白酶,,不僅保持天然TEV酶的功能活性,,且在廣譜的溫度范圍內(nèi)表現(xiàn)出更強(qiáng)的穩(wěn)定性和特異性,。rTEV是一種用來切除融合蛋白上親和標(biāo)簽的常用工具酶,,具有很強(qiáng)的位點(diǎn)特異性,,嚴(yán)格識(shí)別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),,切割位點(diǎn)在谷氨酰胺和甘氨酸/絲氨酸之間。普遍應(yīng)用的七氨基酸序列為:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly,。rTEV在pH7.0,,30℃時(shí)可達(dá)活性,但在pH6.0-8.5和溫度4-30℃范圍內(nèi)皆有活性(見表1),使得反應(yīng)條件的選擇可根據(jù)目的蛋白的情況而靈活變動(dòng),。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His標(biāo)簽,,通過Ni-NTA樹脂去除,以達(dá)到純化目的蛋白的目的,。產(chǎn)品性質(zhì)來源(Source)大腸桿菌外觀(Appearance)無色透明液體比活力(SpecificActivity)5U/μL活性定義(UnitDefinition)在1×rTEVBuffer(50mMTris,,pH8.0,0.1mMEDTA,,1mMDTT)中,,30℃反應(yīng)1h,剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位,。純化(Purification)Ni柱親和純化純度(Purity)≥95%(bySDS-PAGE)產(chǎn)品組分運(yùn)輸與保存方法冰袋運(yùn)輸,。重組型TEV蛋白酶(rTEV)是經(jīng)過基因工程改造和純化后的重組蛋白酶,保持天然TEV酶的功能活性,。Recombinant Cynomolgus CEACAM-5/CD66e Protein,His Tag
SARS-CoV-2,whichcausestheglobalpandemiccoronavirusdisease2019(Covid-19),belongstoafamilyofvirusesknownascoronaviruses.TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).SeveralemergingSARS-CoV-2genomeshavebeenidentifiedincludingtheOmicron,orB.1.1.529,variant.FirstidentifiedinNovember2021inSouthAfrica,theOmicronvariantquicklybecamethepredominantSARS-CoV-2variantandisconsideredavariantofconcern(VOC).TheOmicronvariantcontains15mutationsinRBDdomainthatpotentiallyaffectviralfitnessandtransmissibility.ThemajorityofthemutationsareinvolvedinACE-2bindingandOmicronbindsACE-2withgreateraffinity,potentiallyexplainingitsincreasedtransmissibility.Severalofthesemutationsarealsoidentifiedinfacilitatingimmuneescapeandreducingneutralizationactivitytoseveralmonoclonalantibodies.Recombinant Human IL-27 Protein,His Tag內(nèi)分泌腺衍生的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF),,也稱為(PK1),是分泌蛋白的原蛋白蛋白家族的成員,。
α-凝血酶(α-Thrombin)產(chǎn)品性質(zhì)中文別名(Chinesesynonym)α-凝血酶,;IIa因子;英文別名(Englishsynonym)α-Thrombin,;FactorIIaCAS號(hào)(CASNO.)9002-04-4分子量(Molecularweight)37000daltons活力(Activity)≥3091.00NIHU/mg緩沖液組分(Buffer)50mMSodiumCitrate/0.2MNaCl/0.1%PEG-8000/pH6.5含量(Totalprotein)0.324mg運(yùn)輸和保存方法粉末冰袋運(yùn)輸,,2-8℃保存;配好的液體,,請(qǐng)于≤-60℃保存,。使用方法(酶切體系)產(chǎn)品溶于水,配成的1000U/ml儲(chǔ)存液,,根據(jù)使用量分配于不同的離心管中,,凍存于?20℃保存,凝血酶對(duì)不同的融合蛋白切割效率是不一樣的,,首先要進(jìn)行小量切割試驗(yàn),。比如固定融合蛋白10ug,加不同量的凝血酶(如0.1U,0.2U,0.5U,1U等),在不同的溫度(如4度,16度,室溫或37度等)下進(jìn)行試驗(yàn),。
ERBB3,又稱HH3(人表皮生長(zhǎng)因子受體3),是一種I型膜糖蛋白,是酪氨酸激酶受體ERBC家族的成員,。ERBP家族成員作為表皮生長(zhǎng)因子(LU)家族的生長(zhǎng)因子的受體。在ERBP家庭成員中,因?yàn)樗幸粋€(gè)缺陷的激酶域,。ERBB3在角化細(xì)胞,、黑色素細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞,、成肌細(xì)胞和雪旺細(xì)胞中都有表達(dá),。單體ERbb3是一種低親和性的受體。ERBB3與ERBB2的異聚反應(yīng)形成高親和性受體復(fù)合物,。與此相反,ERBB3同向聚合或異向聚合形成了一個(gè)低親和性的結(jié)合物,。因?yàn)镋RBB3含有一個(gè)有缺陷的激酶域,ERBB2的激酶域負(fù)責(zé)通過異二重瓣受體啟動(dòng)酪氨酸磷酸化信號(hào)。研究發(fā)現(xiàn),ERBB3細(xì)胞質(zhì)區(qū)內(nèi)的三個(gè)離散氨基酸信號(hào)對(duì)ERBB2的轉(zhuǎn)導(dǎo)至關(guān)重要,。ERBB3的細(xì)胞質(zhì)域也包含6個(gè)一致的結(jié)合主題,用于調(diào)節(jié)P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2領(lǐng)域,以及一個(gè)豐富的一致的結(jié)合主題,。ERBB3的細(xì)胞質(zhì)域也包含6個(gè)一致的結(jié)合主題,用于調(diào)節(jié)P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2領(lǐng)域,以及一個(gè)豐富的一致的結(jié)合主題。ERBB3的細(xì)胞質(zhì)域也包含6個(gè)一致的結(jié)合主題,用于調(diào)節(jié)P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2領(lǐng)域,以及一個(gè)豐富的一致的結(jié)合主題,。表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)重組的人HR3/ERBB3蛋白表達(dá)自于C-端的HK293細(xì)胞和AVI標(biāo)記,。里面有血清20-Thr643。分子量大約71.6eotaxin-2在空腸和脾臟中組成型表達(dá),, 它也可以通過過敏原挑戰(zhàn)和IL-4在肺中誘導(dǎo),。
3C樣蛋白酶(3CLpro)或主要蛋白酶(Mpro),正式名稱為C30內(nèi)肽酶或3-胰凝乳蛋白酶樣蛋白酶,,[2]是在冠狀病毒中發(fā)現(xiàn)的主要蛋白酶,。它在11個(gè)保守位點(diǎn)切割冠狀病毒多蛋白。它是一種半胱氨酸蛋白酶,,是蛋白酶PA家族的成員,。它在其活性位點(diǎn)具有半胱氨酸-組氨酸催化二聯(lián)體并裂解Gln–(Ser/Ala/Gly)肽鍵。酶委員會(huì)將這個(gè)家族稱為SARS冠狀病毒主要蛋白酶(Mpro;EC3.4.22.69),。3CL蛋白酶對(duì)應(yīng)于冠狀病毒非結(jié)構(gòu)蛋白5(nsp5),。通用名中的“3C”指的是3C蛋白酶(3Cpro),是一種在小核糖核酸病毒中發(fā)現(xiàn)的同源蛋白酶,。3C樣蛋白酶能夠催化裂解P1位谷氨酰胺和P1'位小氨基酸(絲氨酸,、丙氨酸或甘氨酸)之間的肽鍵。例如,,SARS冠狀病毒3CLpro可以自我切割以下肽:[3][4][5]TSAVLQ-SGFRK-NH2和SGVTFQ-GKFKK是對(duì)應(yīng)于SARS3C樣蛋白酶的兩個(gè)自切割位點(diǎn)的兩個(gè)肽該蛋白酶在冠狀病毒復(fù)制酶多蛋白(P0C6U8)的加工過程中很重要,。它是冠狀病毒中的主要蛋白酶,對(duì)應(yīng)于非結(jié)構(gòu)蛋白5(nsp5),。[6]它在11個(gè)保守位點(diǎn)切割冠狀病毒多蛋白,。3CL蛋白酶在其活性位點(diǎn)具有半胱氨酸-組氨酸催化二元組。[4]半胱氨酸的硫作為親核試劑,,組氨酸的咪唑環(huán)作為一般堿基,。人α-凝血酶,一種絲氨酸蛋白酶,,是凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)中的中心酶,,對(duì)止血和其他多種生理過程至關(guān)重要。Recombinant Mouse TFPI-2 Protein,hFc Tag
α-凝血酶(α-Thrombin)可以啟動(dòng)XIII因子和血小板,,或者用作血管收縮劑,。Recombinant Cynomolgus CEACAM-5/CD66e Protein,His Tag
Endo H糖苷內(nèi)切酶H:結(jié)構(gòu),、功能及其在糖生物學(xué)中的應(yīng)用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H(Endo H)是一種專門切割N-連接糖鏈的內(nèi)切酶,用于糖生物學(xué)和蛋白質(zhì)工程領(lǐng)域,。本文將探討Endo H的結(jié)構(gòu)特性,、催化機(jī)制、以及其在研究和臨床應(yīng)用中的潛力,。引言N-連接糖基化是一種在真核細(xì)胞中普遍存在的蛋白質(zhì)修飾方式,,涉及將糖鏈添加到蛋白質(zhì)的天冬酰胺殘基上。Endo H作為一種內(nèi)切酶,,能夠特異性地識(shí)別并切割N-連接糖鏈中的β-N-乙酰葡糖胺苷鍵,,從而在蛋白質(zhì)工程和生物制藥中發(fā)揮重要作用。Endo H的結(jié)構(gòu)特性Endo H通常來源于流感嗜血桿菌(Hemophilus influenzae),,其分子質(zhì)量約為50 kDa,。該酶由兩個(gè)結(jié)構(gòu)域組成:一個(gè)負(fù)責(zé)識(shí)別糖鏈的催化結(jié)構(gòu)域和一個(gè)有助于酶穩(wěn)定性的非催化結(jié)構(gòu)域。催化機(jī)制Endo H的催化機(jī)制涉及對(duì)N-連接糖鏈的特異性識(shí)別和切割,。酶的活性位點(diǎn)含有多個(gè)氨基酸殘基,,這些殘基與糖鏈的特定結(jié)構(gòu)相互作用,導(dǎo)致酶對(duì)底物的高特異性,。Endo H催化的糖苷鍵斷裂是一水解反應(yīng),,需要水分子的參與。Recombinant Cynomolgus CEACAM-5/CD66e Protein,His Tag