利用PCR技術擴增得到編碼土豆羧肽酶抑制劑(carboxypeptidaseinhibitorfrompotato,,CPI)活性多肽基因,克隆于表達載體pGEX一4T一1的多克隆位點中,,得到重組質(zhì)粒pGCPI,,測序后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到受體茵EscherichiacoliBL21中。重組茵經(jīng)IPTG誘導表達,,超聲波破茵后,,通過谷胱甘肽sepheroseFF親和層析柱一步純化得到融合蛋白,純度大于97%,。融合蛋白經(jīng)凝血酶切割并分離除去谷胱甘肽一S一轉(zhuǎn)移酶后得到純度大于98%的重組CPI,,ELISA鑒定產(chǎn)物具有免疫原性,體外檢測表明其促進纖溶的生物功能與天然CPI無明顯差異,。泛素蛋白(Ubiquitin,,簡稱Ub)是一種在真核細胞中普遍存在的小分子蛋白,具有高度保守性,。Recombinant Human MDC/CCL22
Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大腸桿菌表達重組腸激酶(不帶標簽)注意事項1.本產(chǎn)品所講述的緩沖體系需要自行配置。2.不建議37℃條件下酶切,,可能會有非特異性酶切出現(xiàn),。3.在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,,或>5%甘油,,酶切會受到影響。如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種,,為獲得理想的酶切結(jié)果,,請先將樣品透析到25mMTris-HCl8.0緩沖液中,,然后再進行酶切實驗;若不方便透析,,可將樣品稀釋到咪唑含量在100mM以下,,NaCl濃度在50mM以下,甘油濃度小于5%以下進行酶切,,酶的用量與蛋白比例不變,;若干擾因素很多,且不便去除,,需要適當增加酶量或延長酶切時間,,有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸鹽對Enterokinase有很強的抑制作用,,痕量的磷酸鹽都會嚴重影響Enterokinase的活性,,因此在酶切體系內(nèi)不能存在磷酸鹽。5.本品是具有高酶活力重組腸激酶,,切割蛋白使用量少,,可不考慮除去。后續(xù)如需去除重組腸激酶,,可用陰離子交換樹脂(如DEAE-FF)對其進行洗脫,。推薦洗脫條件如下:平衡緩沖液:25mMTris-HClpH8.0洗脫緩沖液:25mMTris-HClpH8.0,含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好,,可適當增加酶量,,或適當延長酶切時間。Recombinant Mouse GP1BB Protein,hFc Tag透明質(zhì)酸以其獨特的分子結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)在機體內(nèi)發(fā)揮多種重要的生理功能,,如潤滑關節(jié),、調(diào)節(jié)血管壁的通透性。
Coronavirusesarecommonlycomprisedoffourstructuralproteins:Spikeprotein(S),Envelopeprotein(E),Membraneprotein(M)andNucleocapsidprotein(N).TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheSproteinishomotrimeric,witheach~180-kDamonomerconsistingoftwosubunits,S1andS2.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).產(chǎn)品性質(zhì)別名SproteinRBD;SglycoproteinRBD;SpikeproteinRBDAccessionQHD43416.1表達區(qū)間及表達系統(tǒng)RecombinantSARS-CoV-2SpikeRBD(OmicronBA.4/BA.5/BA.5.1.3/BA.5.2)ProteinisexpressedfromExpi293withHistagattheC-terminal.ItcontainsArg319-Phe541(G339D,S371F,S373P,S375F,T376A,D405N,R408S,K417N,N440K,L452R,S477N,T478K,E484A,F486V,Q498R,N501Y,Y505H).
透明質(zhì)酸酶活力單位(Unitdefinition)基于USP透明質(zhì)酸酶參照標準,,即每分鐘在37℃,,pH5.7的2mL反應液中引起OD6000.330個變化定義為一個活力單位。抑制劑(Inhibitor)Fe2+,,F(xiàn)e3+,,Zn2+,Cu2+,,肝素,,金精三羧酸,硫酸,,硝酸,,乙酰化透明質(zhì)酸,硫酸纖維素酯,,膽汁等結(jié)構(gòu)式(Structure)運輸和保存方法冰袋運輸,。-20℃保存,兩年有效,。溶液配制溶于0.02MPBS(pH7.0),,含77mMNaCl和0.01%BSA,濃度為1mg/mL?,F(xiàn)配現(xiàn)用,。該產(chǎn)品儲存液不穩(wěn)定,使用時建議現(xiàn)配現(xiàn)用,。為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作。在蛋白質(zhì)工程領域,,泛素蛋白可以作為一種標簽或融合蛋白,,用于提高目標蛋白的可溶性、穩(wěn)定性或功能性,。
Endo H糖苷內(nèi)切酶H:結(jié)構(gòu),、功能及其在糖生物學中的應用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H(Endo H)是一種專門作用于糖鏈的內(nèi)切酶,對研究蛋白質(zhì)糖基化修飾具有重要意義,。本文將探討Endo H的結(jié)構(gòu)特性,、催化機制以及在糖生物學研究中的應用。引言蛋白質(zhì)糖基化是一種普遍存在的翻譯后修飾,,對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),、穩(wěn)定性和功能發(fā)揮著關鍵作用。Endo H是一種能夠特異性識別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈的內(nèi)切酶,,廣泛應用于蛋白質(zhì)糖基化分析,。Endo H的結(jié)構(gòu)特性Endo H由菌Helix pomatia分泌,其分子量約為130 kDa,。該酶具有一個催化中心,,能夠識別并切割特定的糖苷鍵。Endo H的三維結(jié)構(gòu)尚未完全解析,,但其氨基酸序列和某些關鍵催化殘基已被確定,。催化機制Endo H通過水解N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)與N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)之間的β-1,4糖苷鍵,從而釋放高甘露糖型N-連接糖鏈,。該過程不涉及輔因子,,表明Endo H催化機制可能依賴于其活性位點的氨基酸殘基。人α-凝血酶,,一種絲氨酸蛋白酶,是凝血級聯(lián)反應中的中心酶,對止血和其他多種生理過程至關重要,。Recombinant Human Transferrin R/CD71 Protein,His-Avi Tag
分子膠降解劑通過誘導不同的Ub連接酶與目標蛋白之間的相互作用來促進目標蛋白的降解,。Recombinant Human MDC/CCL22
基因工程與抗體技術通過基因工程方法,可以構(gòu)建重組3C蛋白酶,,并利用其切割特異性進行活性驗證,。此外,通過動物實驗獲得3C蛋白酶抗體,,可以探索利用抗體技術抑制3C蛋白酶活性,,進而達到抑制病毒復制的目的4。研究進展與挑戰(zhàn)3C蛋白酶及其抑制劑的研究進展迅速,,但仍面臨挑戰(zhàn),。例如,需要深入了解不同耐藥突變對3CLpro自身活性的影響,,以及不同抑制劑之間的交叉耐藥風險,。這些研究對于開發(fā)新的廣譜抗病毒藥物具有重要意義38。結(jié)論3C蛋白酶是一類在RNA病毒復制中發(fā)揮關鍵作用的酶,,是抗病毒藥物開發(fā)的重要靶點,。深入研究3C蛋白酶的結(jié)構(gòu)、功能以及耐藥機制,,對于開發(fā)有效的抗病毒藥物和方法具有重要意義,。隨著科學技術的不斷進步,3C蛋白酶的研究將為人類戰(zhàn)勝病毒性疾病提供更多的科學依據(jù)策略,。Recombinant Human MDC/CCL22