dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM):助力分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的高效防污染解決方案在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增和檢測(cè)的工具之一,。然而,PCR產(chǎn)物的殘留污染可能導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果,嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)作為一種高效的防污染試劑,,通過與尿嘧啶DNA糖苷酶(UDG)聯(lián)合使用,能夠有效解決這一問題,。產(chǎn)品特點(diǎn)高純度與穩(wěn)定性dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)采用高純度的dATP,、dCTP、dGTP和dUTP,,純度≥99%,,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。該產(chǎn)品在-20℃下可穩(wěn)定保存24個(gè)月,,使用時(shí)需避免反復(fù)凍融,。防污染機(jī)制該產(chǎn)品通過在PCR反應(yīng)中用dUTP替代dTTP,使擴(kuò)增產(chǎn)物中摻入dU堿基,。隨后,,UDG酶能夠特異性地降解含有dU的DNA產(chǎn)物,從而有效去除殘留的PCR產(chǎn)物污染,。這種防污染系統(tǒng)特別適用于高通量PCR實(shí)驗(yàn)和需要嚴(yán)格控制假陽(yáng)性的應(yīng)用場(chǎng)景。兼容性與適用性dNTP/dUTPMixture適用于多種DNA聚合酶,,如Taq酶和BstDNA聚合酶等,,可用于PCR、real-timePCR,、RT-PCR,、引物延伸反應(yīng)以及cDNA合成等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。然而,,需要注意的是,,某些具有校正活性的酶可能不適用于該混合物,具體需參考酶的產(chǎn)品說明書,。這種染料能夠在PCR過程中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)DNA的擴(kuò)增情況,,通過熒光信號(hào)的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度。Recombinant Mouse IL-21
Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) 是一種來源于嗜冷海洋細(xì)菌的熱敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG),。該酶能夠特異性地催化水解含有尿嘧啶的DNA鏈中的尿嘧啶堿基,,釋放游離尿嘧啶,,并在DNA中產(chǎn)生無(wú)堿基位點(diǎn)(AP位點(diǎn)),從而防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染,。產(chǎn)品特點(diǎn)與傳統(tǒng)UDG酶相比,,熱敏UDG酶在室溫下即可高效發(fā)揮作用,且對(duì)溫度極為敏感,,可在50℃下10分鐘內(nèi)完全失活,。這種特性使其在PCR和RT-PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色,尤其適用于需要快速滅活的場(chǎng)景,。此外,,該酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均具有活性,但對(duì)RNA或不含尿嘧啶的DNA無(wú)作用,。其高純度和低殘留特性使其在高投入量下也不會(huì)對(duì)檢測(cè)體系產(chǎn)生抑制,。應(yīng)用場(chǎng)景去除PCR產(chǎn)物污染:通過降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽(yáng)性,。RT-qPCR防污染:在RT-qPCR反應(yīng)中,,熱敏UDG酶可在逆轉(zhuǎn)錄前去除殘留的PCR產(chǎn)物。單鏈或雙鏈DNA處理:用于去除DNA中的尿嘧啶堿基,。在使用過程中,,建議將酶液存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后立即放回-20℃保存,。此外,,熱敏UDG酶在RT-qPCR反應(yīng)中表現(xiàn)出良好的兼容性,即使在高投入量下也不會(huì)對(duì)反應(yīng)產(chǎn)生抑制,。Recombinant Human FollistatinEndo H 的活性受 pH 值的強(qiáng)烈影響,,通常在酸性條件下表現(xiàn)出好的活性,一般合適 pH 范圍在 5.0-6.0 左右,。
Pfu DNA聚合酶是一種從嗜熱古細(xì)菌 Pyrococcus furiosus 中提取的高保真DNA聚合酶,,因其準(zhǔn)確性和熱穩(wěn)定性而被廣應(yīng)用于分子生物學(xué)研究。Pfu DNA聚合酶具有5'-3' DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性,,這種獨(dú)特的校正功能使其能夠在DNA合成過程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,,從而提高擴(kuò)增的保真性。與Taq DNA聚合酶相比,,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,,其保真性是Taq酶的10倍以上。這種高保真性使其成為需要準(zhǔn)確擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)(如基因克隆,、突變研究和測(cè)序準(zhǔn)備)的理想選擇,。此外,Pfu DNA聚合酶具有出色的熱穩(wěn)定性,,能夠在95°C的高溫下保持活性,,適合PCR反應(yīng)的高溫變性步驟,。其擴(kuò)增產(chǎn)物為平末端,適用于平末端克隆,,但需注意,,Pfu酶擴(kuò)增的DNA片段不適合常規(guī)的T載體克隆。Pfu DNA聚合酶的應(yīng)用領(lǐng)域廣,,包括高保真PCR,、基因克隆、點(diǎn)突變,、全基因合成以及高質(zhì)量測(cè)序樣本的準(zhǔn)備,。它還常與其他酶(如Taq酶)聯(lián)合使用,以結(jié)合高保真性和快速擴(kuò)增的優(yōu)點(diǎn),??傊琍fu DNA聚合酶憑借其高保真性,、熱穩(wěn)定性和廣的應(yīng)用場(chǎng)景,,已成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中不可或缺的工具,為科學(xué)研究提供了強(qiáng)有力的支持,。
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇,。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,,還通過添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀的監(jiān)測(cè)手段,。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs,、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的熒光染料,。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性,。與普通Taq酶相比,,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,,使其成為基因克隆、突變分析和測(cè)序準(zhǔn)備等高精度實(shí)驗(yàn)的優(yōu)先工具,。熒光染料的加入是該預(yù)混液的一大亮點(diǎn),。這種染料能夠在PCR過程中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)DNA的擴(kuò)增情況,通過熒光信號(hào)的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度,。實(shí)驗(yàn)人員無(wú)需額外添加染料或進(jìn)行復(fù)雜的后處理,,即可直接在PCR儀上觀察擴(kuò)增曲線,,從而實(shí)現(xiàn)快速、準(zhǔn)確的定量分析,。這種設(shè)計(jì)不僅節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,,還減少了人為操作帶來的誤差。此外,,Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作,。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行反應(yīng),,減少了手動(dòng)配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差,。
6× DNA Loading Buffer:凝膠電泳中的關(guān)鍵試劑6× DNA Loading Buffer 是一種用于凝膠電泳的即用型試劑,,廣泛應(yīng)用于DNA片段的分離和分析。它通過添加特定的染料和甘油(或蔗糖),,使DNA樣品在電泳過程中更容易被觀察和操作,。產(chǎn)品特點(diǎn)高密度與染料標(biāo)記:6× DNA Loading Buffer 含有高濃度的甘油或蔗糖,使DNA樣品在電泳時(shí)能夠沉降在凝膠孔底部,,避免漂浮,。同時(shí),其中的染料(如溴酚藍(lán)和二甲苯藍(lán))可以指示DNA遷移的位置,,便于實(shí)時(shí)觀察電泳進(jìn)程,。即用型設(shè)計(jì):無(wú)需額外配制,直接與DNA樣品混合即可使用,,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作,。兼容性強(qiáng):適用于多種類型的DNA樣品,包括PCR產(chǎn)物,、質(zhì)粒DNA,、限制性酶切片段等,也兼容瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠電泳,。穩(wěn)定保存:常溫保存,,穩(wěn)定性高,無(wú)需特殊處理,。應(yīng)用場(chǎng)景DNA片段分離:在瓊脂糖凝膠電泳中,,用于分離和分析PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒DNA,、基因組DNA片段等,。電泳指示:染料的遷移速率可以作為DNA片段大小的參考,幫助判斷目標(biāo)片段的位置。DNA回收:在DNA回收實(shí)驗(yàn)中,,幫助定位目標(biāo)條帶,,便于后續(xù)的切膠回收操作。6× DNA Loading Buffer 是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中不可或缺的試劑,,它通過提高樣品密度和染料標(biāo)記,,使DNA樣品在凝膠電泳中更容易操作和觀察。
盡管Ultra-Long Master Mix設(shè)計(jì)用于長(zhǎng)片段擴(kuò)增,,但在某些情況下,,可能出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增,需要通過優(yōu)化引物,。Recombinant Mouse IL-21
One Step RT-qPCR SYBR Green Kit:有效,、便捷的RNA定量檢測(cè)解決方案One Step RT-qPCR SYBR Green Kit 是一種基于SYBR Green I染料的一步法實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,為RNA模板的定量檢測(cè)而設(shè)計(jì),。該試劑盒將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應(yīng)集成在同一反應(yīng)管中,,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作,降低了污染風(fēng)險(xiǎn),,同時(shí)提高了檢測(cè)效率,。產(chǎn)品特點(diǎn)操作簡(jiǎn)便:RT和qPCR反應(yīng)在同一管中完成,無(wú)需反復(fù)開蓋或移液,,減少了操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn),。高靈敏度與特異性:采用優(yōu)化的反應(yīng)體系和熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,確保高效的逆轉(zhuǎn)錄和特異的qPCR擴(kuò)增,。防污染設(shè)計(jì):部分產(chǎn)品包含dUTP/UDG防污染系統(tǒng),,可有效消除PCR產(chǎn)物污染。適用范圍廣:適用于多種RNA模板,,包括總RNA,、mRNA和RNA病毒等,尤其適合微量目標(biāo)基因的檢測(cè),。兼容性強(qiáng):適用于多種qPCR儀器,,如ABI、Bio-Rad,、Agilent等,。應(yīng)用場(chǎng)景基因表達(dá)分析:快速定量檢測(cè)特定基因的表達(dá)水平。病毒檢測(cè):適用于RNA病毒的定量檢測(cè),,如流感病毒,、病毒等。高通量樣本分析:適合多樣本的單基因檢測(cè),,尤其在臨床檢測(cè)和大規(guī)模樣本分析中表現(xiàn)出色,。Recombinant Mouse IL-21