T4UvsX重組酶的保存和純化是實驗室工作流程中的重要環(huán)節(jié)，確保了酶的穩(wěn)定性和活性。以下是根據(jù)搜索結(jié)果提供的信息：保存條件：-T4UvsX重組酶通常在-20°C的條件下保存,，可以保持3年的有效期。-某些產(chǎn)品說明中提到,，該制品不含甘油，可用于建立凍干體系,，這可能對長期保存和運輸有額外的好處,。-建議避免反復(fù)凍融，因為這可能會影響酶的活性,。純化過程：-T4UvsX重組酶是由大腸桿菌表達和純化的,。這意味著科學(xué)家首先將T4噬菌體的uvsX基因克隆到適合在大腸桿菌中表達的質(zhì)粒載體中。-然后將這個質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌宿主細胞中,，使其表達T4UvsX蛋白。-接下來,，通過一系列生化步驟從大腸桿菌細胞中提取和純化T4UvsX蛋白,，這些步驟可能包括細胞裂解、離心,、層析等技術(shù),。注意事項：-T4UvsX重組酶的保存液中甘油含量為20%，建議單獨分裝保存，以避免反復(fù)凍融,。-該酶無核酸酶活性,，這表明它在催化反應(yīng)時不會切割DNA鏈，而是促進DNA鏈的重組,。-本產(chǎn)品用于科研用途,，不應(yīng)用于臨床診斷。應(yīng)用：-T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術(shù),，如重組酶聚合酶擴增（RPA）,，這是一種快速、靈敏的核酸檢測技術(shù),。通過遵循這些保存和純化指南,，研究人員可以確保T4UvsX重組酶在實驗中的有效性和可靠性。FnCas12a特異性識別并剪切帶PAM序列的雙鏈DNA（dsDNA）靶標(biāo),，其PAM序列為5'-TTN-3',，與Cas9的PAM序列不同。Recombinant Human CD24 Protein,His-Avi Tag

pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種經(jīng)過改造的高活性Tn5轉(zhuǎn)座酶,，與ProteinA融合,，形成一種新型融合酶，應(yīng)用于CUT&Tag技術(shù)中,，用于研究蛋白質(zhì)與基因組DNA的相互作用,。這種融合酶具備以下特點：1.**高活性**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是超高活性的突變形式，體外轉(zhuǎn)座效率比野生型高1000倍,。2.**ProteinA融合**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的N端結(jié)構(gòu)域為ProteinA的一部分,，可以與免疫球蛋白的Fc區(qū)相互作用，特別是與大多數(shù)哺乳動物的IgG結(jié)合,。3.**Tn5轉(zhuǎn)座酶活性**：C端結(jié)構(gòu)域為Tn5轉(zhuǎn)座酶,，能夠特異性識別轉(zhuǎn)座子兩端反向重復(fù)的ME序列(MosaicEnd)，并在形成轉(zhuǎn)座復(fù)合體后隨機插入靶DNA中,。4.**應(yīng)用廣**：適用于CUT&Tag技術(shù),、高通量測序建庫、ATAC-seq等,，特別適用于早期胚胎發(fā)育,、干細胞、以及表觀遺傳學(xué)等研究領(lǐng)域,。5.**操作簡便**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用簡化了實驗步驟,，可以在一步反應(yīng)中實現(xiàn)DNA片段化和接頭連接，從細胞到二代測序文庫的轉(zhuǎn)化過程需9小時,。6.**低細胞投入量**：CUT&Tag技術(shù)允許從低至60個細胞的樣本中獲得結(jié)果,，甚至可以應(yīng)用于單細胞水平的研究,。7.**高質(zhì)量結(jié)果**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用可以保證DNA片段化，同時獲得的蛋白純度高,、核酸殘留低,。Recombinant Mouse ALK Protein,hFc Tag與其他Cas12蛋白相比，F(xiàn)nCas12a蛋白的分子量較小,，大約在400-700個氨基酸之間,。

1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)主要用于從RNA模板合成鏈cDNA，而不是直接用于線性RNA的放大,。然而,，合成的cDNA可以作為模板用于后續(xù)的線性RNA放大過程，這通常涉及以下幾個步驟：1.**cDNA合成**：使用1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)按照試劑盒的說明進行操作,，從線性RNA模板合成鏈cDNA,。2.**第二鏈cDNA合成**：在某些情況下，可能需要合成雙鏈cDNA,。這可以通過使用DNA聚合酶和第二鏈合成試劑來完成,，從而獲得完整的雙鏈cDNA。3.**線性RNA放大**：一旦獲得了cDNA,，可以使用體外轉(zhuǎn)錄(IVT,InVitroTranscription)技術(shù)來放大RNA,。這通常涉及以下步驟：-使用含有RNA聚合酶啟動子序列的特定引物對cDNA進行PCR擴增。-使用含有RNA聚合酶識別位點的引物進行體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng),，以合成大量RNA拷貝,。4.**RNA純化**：體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA需要通過適當(dāng)?shù)姆椒ǎㄈ缰鶎游龌虺恋恚┻M行純化，以去除DNA模板,、未反應(yīng)的核苷酸和其他雜質(zhì),。5.**RNA質(zhì)量檢測**：使用凝膠電泳或生物分析儀檢測RNA的質(zhì)量和大小，確保RNA的完整性和純度,。

磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒中的磁珠分離通常涉及以下步驟：1.**裂解細胞**：-首先,，使用裂解液（含有SDS等成分）裂解細菌細胞，釋放出質(zhì)粒DNA,。2.**結(jié)合磁珠**：-將磁珠加入到裂解后的混合物中,，磁珠表面通常修飾有能夠特異性結(jié)合核酸的配體，使得質(zhì)粒DNA吸附于磁珠表面,。3.**磁分離**：-將含有磁珠和質(zhì)粒DNA的混合物置于磁分離架上,。磁分離架產(chǎn)生磁場，使得磁珠迅速聚集在管壁或管底,。4.**未結(jié)合物質(zhì)**：-在磁珠固定后,，小心移除上清液，避免擾動磁珠,。上清液中含有未吸附的蛋白質(zhì)、RNA和其他細胞碎片。5.**洗滌磁珠**：-向磁珠中加入洗滌液,，輕輕混勻以去除殘留的雜質(zhì),，然后再次使用磁分離架分離磁珠和洗滌液。6.**重復(fù)洗滌**：-根據(jù)試劑盒的說明,，可能需要進行多次洗滌以確保高度純化,。每次洗滌后都需洗滌液。7.**干燥磁珠**（如果需要）：-在某些情況下,，可能需要去除洗滌后的殘留液體,，讓磁珠在磁場作用下干燥，但要注意不要使磁珠完全干燥,，以免影響DNA的洗脫,。8.**洗脫質(zhì)粒DNA**：-使用洗脫液（通常是低鹽或高pH的緩沖液）將質(zhì)粒DNA從磁珠上洗脫。洗脫液可以破壞磁珠與DNA之間的結(jié)合力,，釋放DNA,。。

轉(zhuǎn)座酶是一類能夠催化轉(zhuǎn)座子（一種可移動的DNA序列）在基因組中從一個位置移動到另一個位置的酶,。轉(zhuǎn)座子可以在DNA分子上“跳躍”,，在新的位置上插入自己的拷貝，而原始位置的轉(zhuǎn)座子則可能被切除或保留,。轉(zhuǎn)座酶的作用是轉(zhuǎn)座過程中的關(guān)鍵因素,，它們可以被分為兩類：1.**復(fù)制型轉(zhuǎn)座酶**：在復(fù)制型轉(zhuǎn)座過程中，轉(zhuǎn)座子首先被復(fù)制,，然后復(fù)制的拷貝到新的基因組位置,，原始的轉(zhuǎn)座子留在原位。這種機制通常涉及到“復(fù)制-粘貼”的過程,。2.**剪切型轉(zhuǎn)座酶**：在剪切型轉(zhuǎn)座過程中,，轉(zhuǎn)座子從原始位置被切除，然后到新的基因組位置,。這涉及到“剪切-粘貼”的過程,。轉(zhuǎn)座酶的活性和轉(zhuǎn)座子的移動可以對基因組的結(jié)構(gòu)和功能產(chǎn)生重要影響，包括：-**基因突變**：轉(zhuǎn)座子的插入可能破壞基因的正常功能,，導(dǎo)致突變,。-**基因組多樣性**：轉(zhuǎn)座活動增加了基因組的多樣性，有助于物種適應(yīng)環(huán)境變化,。-**基因調(diào)控**：轉(zhuǎn)座子的插入可能激起或抑制某些基因的表達,。-**新基因產(chǎn)生**：在某些情況下,，轉(zhuǎn)座子的移動可以導(dǎo)致新基因的產(chǎn)生。

跨膜蛋白的表達與制備需要采用合適的表達載體,、宿主細胞,、培養(yǎng)條件和純化工藝等方法，優(yōu)化表達和純化過程,。Recombinant Human CD24 Protein,His-Avi Tag

pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種經(jīng)過特殊改造的融合蛋白,，由ProteinA和高活性的Tn5轉(zhuǎn)座酶組成，具有以下主要應(yīng)用：1.**高通量測序建庫**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶可以用于快速構(gòu)建用于高通量測序的DNA文庫,，通過其轉(zhuǎn)座酶活性實現(xiàn)DNA片段化,，同時加上測序接頭，簡化了傳統(tǒng)DNA測序建庫的多步過程,。2.**CUT&Tag技術(shù)**：這是一種新興的蛋白質(zhì)與DNA相互作用研究方法,，pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶利用ProteinA與特定抗體結(jié)合，將轉(zhuǎn)座酶帶到目標(biāo)蛋白附近進行DNA切割和標(biāo)簽添加,，實現(xiàn)對蛋白質(zhì)結(jié)合位點的高通量測序分析,。CUT&Tag技術(shù)具有高特異性、低背景噪音,、高靈敏度,、良好重復(fù)性等優(yōu)點，適用于表觀遺傳學(xué),、干細胞等領(lǐng)域的研究,。3.**ATAC-seq**：pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶也可用于ATAC-seq實驗，這是一種研究染色質(zhì)可及性的方法,，通過轉(zhuǎn)座酶在沒有核酸酶消化的情況下切割染色質(zhì)DNA,，然后在切割位點加上測序接頭，進行后續(xù)的測序分析,。4.**轉(zhuǎn)錄組測序快速建庫**：有研究開發(fā)了基于Tn5轉(zhuǎn)座酶的轉(zhuǎn)錄組測序快速建庫方法,，例如SHERRY方法，它利用Tn5轉(zhuǎn)座酶直接作用于RNA/DNA雜交鏈,，簡化了建庫過程,，適用于單細胞轉(zhuǎn)錄組測序，提高了樣本的利用率和測序速度,。