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Recombinant Mouse Hyaluronidase 2/HYAL2 Protein

來源: 發(fā)布時間:2024-07-19

pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種經(jīng)過改造的高活性Tn5轉(zhuǎn)座酶,與ProteinA融合,,形成一種新型融合酶,,應用于CUT&Tag技術中,用于研究蛋白質(zhì)與基因組DNA的相互作用,。這種融合酶具備以下特點:1.**高活性**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是超高活性的突變形式,,體外轉(zhuǎn)座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的N端結(jié)構(gòu)域為ProteinA的一部分,,可以與免疫球蛋白的Fc區(qū)相互作用,,特別是與大多數(shù)哺乳動物的IgG結(jié)合。3.**Tn5轉(zhuǎn)座酶活性**:C端結(jié)構(gòu)域為Tn5轉(zhuǎn)座酶,,能夠特異性識別轉(zhuǎn)座子兩端反向重復的ME序列(MosaicEnd),,并在形成轉(zhuǎn)座復合體后隨機插入靶DNA中,。4.**應用廣**:適用于CUT&Tag技術、高通量測序建庫,、ATAC-seq等,,特別適用于早期胚胎發(fā)育、干細胞,、以及表觀遺傳學等研究領域,。5.**操作簡便**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用簡化了實驗步驟,可以在一步反應中實現(xiàn)DNA片段化和接頭連接,,從細胞到二代測序文庫的轉(zhuǎn)化過程需9小時,。6.**低細胞投入量**:CUT&Tag技術允許從低至60個細胞的樣本中獲得結(jié)果,甚至可以應用于單細胞水平的研究,。7.**高質(zhì)量結(jié)果**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用可以保證DNA片段化,,同時獲得的蛋白純度高、核酸殘留低,。2aR蛋白在細胞內(nèi)發(fā)揮著不同的作用,,例如在信號傳遞、物質(zhì)轉(zhuǎn)運和細胞通訊等方面,。Recombinant Mouse Hyaluronidase 2/HYAL2 Protein,His Tag

Recombinant Mouse Hyaluronidase 2/HYAL2 Protein,His Tag,標準物質(zhì)

    Lambda核酸外切酶(LambdaExonuclease)高度特異性地作用于5'端磷酸化的雙鏈DNA主要通過以下幾個方面實現(xiàn):1.**結(jié)構(gòu)特異性識別**:Lambda核酸外切酶具有識別特定DNA結(jié)構(gòu)的能力,,特別是5'端磷酸化的雙鏈DNA。這種識別能力通常由酶的活性位點結(jié)構(gòu)決定,,能夠與5'-磷酸基團形成特定的相互作用,。2.**酶活性位點**:酶的活性位點含有氨基酸殘基,這些殘基能夠與5'-磷酸基團形成氫鍵或其他非共價相互作用,,從而穩(wěn)定酶與DNA的結(jié)合,。3.**切割機制**:Lambda核酸外切酶通過水解5'-磷酸二酯鍵來降解DNA鏈。它從5'端開始,,逐個移除核苷酸,,直到遇到非5'-磷酸化的末端或遇到結(jié)構(gòu)上的障礙。4.**低活性對非特異性底物**:對于5'-羥基(OH)末端的DNA或單鏈DNA,,Lambda核酸外切酶的活性降低,,因為這些底物缺乏與酶活性位點結(jié)合所需的特異性相互作用。5.**酶動力學**:Lambda核酸外切酶對5'-磷酸化雙鏈DNA的酶動力學參數(shù)(如Km和Vmax)與對非特異性底物的參數(shù)有差異,,這反映了其對特異性底物的高親和力和高催化效率,。6.**過程性(Processivity)**:一旦Lambda核酸外切酶結(jié)合到特異性底物上,,它可以連續(xù)移除多個核苷酸,,而不需要頻繁地與底物解離和重新結(jié)合,這增加了酶的效率,。Recombinant Mouse CD40 Ligand/TNFSF5 Protein,His Tag全長跨膜蛋白CB1,,即受體1(Cannabinoid Receptor 1),,是一種G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)。

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磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒是一種利用磁性納米分離技術和細菌細胞的SDS堿裂解法從菌體中提取高質(zhì)量質(zhì)粒DNA的實驗工具,。以下是一些關于磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒的關鍵信息:1.**操作簡便性**:-操作快速簡單,,可以在60分鐘內(nèi)完成96個不同樣品的提取,實現(xiàn)質(zhì)粒提取的高通量化和自動化,。2.**高純度和高產(chǎn)量**:-抽提得到的質(zhì)粒純度高,,OD260/OD280比值一般為1.8~1.9之間,OD260/OD230比值大于2.0,,可以直接用于轉(zhuǎn)化,、DNA測序、PCR和酶切等后續(xù)實驗,。3.**試劑盒組件**:-包含BufferMP1,、BufferMP2、BufferMP3,、PureMagBeads,、BufferMPB、TEBuffer(pH8.0),、RNaseA等組分,。4.**應用范圍**:-適用于從大腸桿菌中抽提小量質(zhì)粒,所得質(zhì)??芍苯佑糜诩毎D(zhuǎn)染,、DNA測序、PCR等實驗,。5.**效率和純度**:-與同類產(chǎn)品相比,,提取效率更高,獲得質(zhì)粒的純度更高,;與柱式法相比,,可減少離心次數(shù),獲得完整性更好的質(zhì)粒,。6.**注意事項**:-例如,,SgMagBeads需要充分洗滌和干燥,以保證無乙醇殘留,,并且在吸取上清時避免吸入SgMagBeads,。7.**保存條件**:-室溫保存,有效期一年,。磁珠長期不使用時,,可以4℃保存以延長保存時間。

5'DNA腺苷?;噭┖型ㄟ^酶學方法高效地將單鏈DNA(ssDNA)5'端腺苷?;?,通常轉(zhuǎn)化效率可達95%以上。以下是實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)化的關鍵步驟和特點:1.**單步反應**:與傳統(tǒng)化學方法相比,,該試劑盒可以在一個簡單的步驟中完成5'端磷酸化修飾的單鏈DNA或RNA的腺苷?;揎棧瑹o需多步驟操作或純化,。2.**高效率**:試劑盒通常能將95%以上的5'端磷酸化的DNA(pDNA)轉(zhuǎn)化成腺苷?;疍NA(AppDNA),從而提高產(chǎn)量并避免膠回收提純步驟,。3.**高溫孵育**:在65℃的高溫下進行反應,,有助于避免DNA或RNA的二級結(jié)構(gòu)對腺苷酰化反應的干擾,。4.**酶的來源**:試劑盒中的腺苷?;?Adenylase)通常來源于嗜熱古細菌,在大腸桿菌中表達獲得,,保證反應的高效性,。5.**操作簡便**:使用MthRNA連接酶、ATP和5'-磷酸化的單鏈DNA進行反應,,操作簡單,,且腺苷化產(chǎn)物通常不需要進行電泳切膠回收,可以直接通過乙醇沉淀進行進一步濃縮后用于后續(xù)的連接反應,。6.**失活酶**:反應完成后推薦在85℃孵育5分鐘以失活Adenylase,,防止去腺苷酰化現(xiàn)象,,確保腺苷?;嚷什幌陆怠?

Cas9 NLS可用于體外實驗中篩選能夠高效引導Cas9蛋白進行DNA剪切的gRNA序列 ,。

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dGTPSolution(脫氧鳥苷三磷酸溶液)在分子克隆中扮演著重要角色,,主要應用包括但不限于以下幾個方面:1.**DNA合成**:dGTP作為DNA聚合酶的底物之一,在分子克隆中用于合成新的DNA鏈,,特別是在PCR擴增和cDNA合成中,。2.**PCR擴增**:在常規(guī)PCR和高保真PCR中,dGTP提供必要的核苷酸,,以確保目標DNA片段的準確復制,。3.**cDNA合成**:在從mRNA模板合成cDNA的過程中,dGTP是合成互補DNA鏈的關鍵成分,。4.**DNA測序**:dGTP也用于Sanger測序等DNA測序技術中,,幫助合成測序反應中的DNA鏈。5.**質(zhì)粒構(gòu)建**:在質(zhì)?;蚱渌d體的構(gòu)建過程中,,dGTP可能用于填補缺口或連接DNA片段。6.**引物延伸**:在引物延伸反應中,,dGTP用于延伸引物,,以合成完整的DNA鏈。7.**DNA標記**:dGTP可以用于DNA片段的標記,,便于后續(xù)的克隆和檢測,。dGTPSolution通常以100mM的濃度提供,以便于在實驗中根據(jù)需要進行稀釋,。在使用時,,應確保產(chǎn)品具有高純度、無DNase和RNase污染,,以保證實驗的準確性和重復性,。此外,dGTPSolution應儲存在-20°C的條件下,,避免反復凍融,,以保持其穩(wěn)定性。在蛋白質(zhì)的晶體學研究中,,去除糖鏈可以幫助獲得去糖基化的蛋白質(zhì),,這有助于更清晰地解析蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)。Poly(U)聚合酶

在蛋白質(zhì)工程中,,PNGase F可以用于改變蛋白質(zhì)的糖基化模式,,以研究糖基化對蛋白質(zhì)功能的影響。Recombinant Mouse Hyaluronidase 2/HYAL2 Protein,His Tag

Lambda核酸外切酶的生產(chǎn)和應用涉及到多種生物技術和分子生物學技術,,主要包括:1.**基因克?。℅eneCloning)**:首先將Lambda核酸外切酶的基因從噬菌體λ的基因組中克隆出來,并插入到質(zhì)?;蚱渌d體中,。2.**轉(zhuǎn)化(Transformation)**:將含有Lambda核酸外切酶基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到宿主細胞,通常是大腸桿菌(E.coli),,以便于在這些細胞中表達Lambda核酸外切酶,。3.**表達系統(tǒng)(ExpressionSystems)**:利用原核或真核表達系統(tǒng)在宿主細胞中表達Lambda核酸外切酶的蛋白。4.**蛋白質(zhì)純化(ProteinPurification)**:使用各種色譜技術,,如親和層析,、離子交換層析、凝膠過濾層析等,,從宿主細胞的裂解物中分離和純化Lambda核酸外切酶,。5.**PerfectProtein?技術平臺**:這是一種專有技術,用于生產(chǎn)高質(zhì)量的重組蛋白,,包括Lambda核酸外切酶,。6.**熱失活(HeatInactivation)**:在某些應用中,,可能需要通過熱處理來失活Lambda核酸外切酶,以終止其催化活性,。7.**熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FluorescenceResonanceEnergyTransfer,FRET)**:這是一種用于實時監(jiān)測酶活性和動力學的技術,,可用于研究Lambda核酸外切酶降解核酸的機制。

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