染料預混合的PCRMasterMix是一種特殊的PCR反應液,,它在配方中已經(jīng)預先加入了適合電泳分析的染料,。這種設計使得PCR擴增后的產(chǎn)物可以直接用于凝膠電泳,無需額外添加上樣緩沖液,,從而簡化了操作流程并減少了實驗時間,。以下是一些關于染料預混合PCRMasterMix的特點:1.**方便性**:由于省去了擴增后添加上樣緩沖液的步驟,使得PCR到電泳的過渡更為簡便快捷,。2.**一致性**:預混合的染料確保了每次PCR實驗中使用的染料濃度一致,,有助于提高實驗結果的可重復性。3.**可視化**:一些染料預混合PCRMasterMix使用的染料在紫外光下具有明顯的熒光或顏色變化,,有助于在電泳過程中實時監(jiān)控DNA條帶的形成,。4.**兼容性**:預混合的染料通常與各種類型的PCR儀器和電泳設備兼容。5.**穩(wěn)定性**:預混合的染料在MasterMix中保持穩(wěn)定,,直到使用時才與DNA樣本接觸,,減少了染料降解或失效的風險。6.**靈敏度**:某些染料具有較高的靈敏度,,可以檢測到極少量的DNA,,有助于提高PCR檢測的靈敏度。7.**安全性**:預混合的染料減少了操作過程中的接觸次數(shù),,降低了樣品交叉污染的風險,。
BloodDirectPCRMasterMix(2×)適合血液樣本的PCR擴增主要通過以下幾個方面:1.**抗血液抑制劑能力**:該預混合溶液含有的DNA聚合酶和其他成分能夠抵抗血液樣本中的PCR抑制劑,,如膽酸鹽,、血紅素、蛋白質(zhì)等,。2.**優(yōu)化的緩沖體系**:預混合溶液中的緩沖體系經(jīng)過特別優(yōu)化,,以適應血液樣本中的特定條件,包括pH,、離子強度和Mg2+濃度,,從而提高PCR擴增的效率和特異性。3.**高保真DNA聚合酶**:包含的DNA聚合酶具有高保真度,,能夠在復制DNA時減少錯誤,,保證擴增結果的準確性。4.**快速擴增速度**:一些BloodDirectPCRMasterMix產(chǎn)品具有快速擴增的特點,可以縮短PCR實驗的時間,。5.**寬泛的GC含量適應性**:該產(chǎn)品可以用于擴增不同GC含量的基因,,包括高GC和低GC區(qū)域,,提高了PCR的適用性,。6.**直接使用血液樣本**:無需對血液樣本進行DNA提取或純化,可以直接將抗凝血樣品或干血斑樣品加入PCR反應中,。7.**兼容性**:兼容多種抗凝劑,,如EDTA、肝素或檸檬酸鈉,,適用于不同來源的血液樣本,。8.**簡化的操作流程**:由于省去了DNA提取的步驟,BloodDirectPCRMasterMix簡化了實驗操作流程,,減少了實驗時間和潛在的污染風險。Recombinant Biotinylated Human CTGF/CCN2 Protein,His-Avi TagFnCas12a特異性識別并剪切帶PAM序列的雙鏈DNA(dsDNA)靶標,,其PAM序列為5'-TTN-3',,與Cas9的PAM序列不同。
pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是一種經(jīng)過改造的高活性Tn5轉(zhuǎn)座酶,,與ProteinA融合,,形成一種新型融合酶,應用于CUT&Tag技術中,,用于研究蛋白質(zhì)與基因組DNA的相互作用,。這種融合酶具備以下特點:1.**高活性**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶是超高活性的突變形式,體外轉(zhuǎn)座效率比野生型高1000倍,。2.**ProteinA融合**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的N端結構域為ProteinA的一部分,,可以與免疫球蛋白的Fc區(qū)相互作用,特別是與大多數(shù)哺乳動物的IgG結合,。3.**Tn5轉(zhuǎn)座酶活性**:C端結構域為Tn5轉(zhuǎn)座酶,能夠特異性識別轉(zhuǎn)座子兩端反向重復的ME序列(MosaicEnd),,并在形成轉(zhuǎn)座復合體后隨機插入靶DNA中,。4.**應用廣**:適用于CUT&Tag技術,、高通量測序建庫,、ATAC-seq等,特別適用于早期胚胎發(fā)育,、干細胞,、以及表觀遺傳學等研究領域。5.**操作簡便**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用簡化了實驗步驟,可以在一步反應中實現(xiàn)DNA片段化和接頭連接,,從細胞到二代測序文庫的轉(zhuǎn)化過程需9小時。6.**低細胞投入量**:CUT&Tag技術允許從低至60個細胞的樣本中獲得結果,,甚至可以應用于單細胞水平的研究。7.**高質(zhì)量結果**:pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶的使用可以保證DNA片段化,,同時獲得的蛋白純度高,、核酸殘留低,。
T4UvsX重組酶是一種來源于T4噬菌體的酶,,屬于RecA/Rad51家族的同源體。這種重組酶在雙鏈DNA斷裂的修復以及復制叉重新啟動的過程中扮演著重要角色,。T4UvsX重組酶能夠與其他DNA結合蛋白或輔助因子協(xié)同作用,與單鏈DNA形成核酸蛋白復合物,。該復合物通過尋找與目標DNA互補的區(qū)域進行雜交,,以完成鏈置換反應,且此酶本身不具有核酸酶活性,。產(chǎn)品應用方面,,T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術,如重組酶聚合酶擴增(RPA)技術,。它在實驗中與T4UvsY重組酶,、BsuDNA聚合酶(大片段)、T4基因32蛋白(gp32)等組分一同使用,,以優(yōu)化RPA擴增反應,。T4UvsX重組酶的保存條件為-20℃,可保存3年,,或者-20℃儲存有效期為2年,,避免反復凍融。其儲存液通常包含Tris-HCl,、KCl,、DTT、EDTA和甘油等成分,,以保持酶的穩(wěn)定性和活性,。熱失活處理為60℃孵育10分鐘。在使用T4UvsX重組酶時,,需要注意其保存液中甘油含量較高,,建議單獨分裝保存,,并且在操作時穿著實驗服并佩戴一次性手套,以確保安全,。此外,該產(chǎn)品供科研使用,,不應用于臨床診斷,。在50 μL的反應體系中,建議使用1.5 μL的5× PCR Enhancer(如果需要)和0.5 μL的Phusion DNA Polymerase,。
Lambda核酸外切酶的生產(chǎn)和應用涉及到多種生物技術和分子生物學技術,,主要包括:1.**基因克隆(GeneCloning)**:首先將Lambda核酸外切酶的基因從噬菌體λ的基因組中克隆出來,,并插入到質(zhì)?;蚱渌d體中。2.**轉(zhuǎn)化(Transformation)**:將含有Lambda核酸外切酶基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到宿主細胞,,通常是大腸桿菌(E.coli),,以便于在這些細胞中表達Lambda核酸外切酶。3.**表達系統(tǒng)(ExpressionSystems)**:利用原核或真核表達系統(tǒng)在宿主細胞中表達Lambda核酸外切酶的蛋白,。4.**蛋白質(zhì)純化(ProteinPurification)**:使用各種色譜技術,,如親和層析、離子交換層析,、凝膠過濾層析等,從宿主細胞的裂解物中分離和純化Lambda核酸外切酶,。5.**PerfectProtein?技術平臺**:這是一種專有技術,,用于生產(chǎn)高質(zhì)量的重組蛋白,包括Lambda核酸外切酶,。6.**熱失活(HeatInactivation)**:在某些應用中,,可能需要通過熱處理來失活Lambda核酸外切酶,以終止其催化活性,。7.**熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FluorescenceResonanceEnergyTransfer,FRET)**:這是一種用于實時監(jiān)測酶活性和動力學的技術,,可用于研究Lambda核酸外切酶降解核酸的機制。
由于其高活性,,pA-Tn5轉(zhuǎn)座酶允許從極少量的細胞中進行實驗,,如單細胞水平的研究。Recombinant Mouse SG3/Secretogranin 3 Protein,His Tag
dITP(脫氧肌苷三磷酸)在PCR(聚合酶鏈反應)擴增中的應用是特定和有限的,。以下是dITP在PCR擴增中的一些關鍵點:1.**PCR擴增中的使用**:dITP可以在某些類型的PCR中替代部分dGTP,,特別是在使用某些特殊的DNA聚合酶時,,例如那些不具有校正(proofreading)功能的酶。2.**替代比例**:在PCR中,,dITP通常不能完全替代dGTP,,因為這樣做可能會抑制PCR擴增反應。通常推薦在PCR反應中使用10%的dITP來代替dGTP,。3.**特殊DNA聚合酶**:某些高保真DNA聚合酶,,如碧云天生產(chǎn)的Q6U?高保真DNA聚合酶,可以與dITP一起使用,,以提高PCR擴增的特異性和效率,。4.**dNTP/dITP混合物**:在一些PCR應用中,會使用dNTP/dITP混合物,,其中包含2.5mM每種dNTP加上0.25mM的dITP,,以優(yōu)化擴增條件。5.**PCR反應條件**:dITP的使用可能需要優(yōu)化PCR反應條件,,包括退火溫度,、Mg2+濃度和循環(huán)次數(shù)。6.**穩(wěn)定性和儲存**:dITP溶液應儲存在-20°C或更低的溫度下,,以保持其穩(wěn)定性,。使用時應避免多次凍融,以防止降解,。7.**安全性和專業(yè)性**:dITP和其他PCR組分應由專業(yè)人員用于科研目的,,不應在臨床診斷中使用。Recombinant Mouse SG3/Secretogranin 3 Protein,His Tag