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Recombinant Human LRIG1 Protein

來源: 發(fā)布時間:2024-08-09

5'DNA腺苷?;噭┖械膯尾椒磻且环N高效的酶促反應,用于在DNA分子的5'端添加一個腺苷酸(AMP)基團,。這個過程通常涉及以下步驟:1.**準備反應混合物**:-根據試劑盒說明書,,將所需的5'磷酸化的單鏈DNA(ssDNA或pDNA)、MthRNA連接酶(或其他腺苷酰化酶),、ATP和相應的緩沖液按比例混合,。2.**孵育反應**:-將混合好的反應體系在指定的溫度(通常是65℃)下孵育一定的時間,以允許酶將ATP中的AMP部分轉移到DNA的5'端,。3.**酶失活**:-反應完成后,,通常在85℃孵育5分鐘以失活腺苷酰化酶,,這一步是為了防止后續(xù)的去腺苷酰化現(xiàn)象,,確保反應的穩(wěn)定性,。4.**產物收集**:-由于轉化效率高,通常不需要進行凝膠純化步驟,??梢酝ㄟ^乙醇沉淀等方法收集腺苷酰化后的DNA產物,。5.**產物應用**:-收集的腺苷?;疍NA可以直接用于后續(xù)的克隆、測序,、連接或其他分子生物學實驗,。6.**注意事項**:-確保所有操作在無RNA酶和無DNA酶的環(huán)境中進行,以避免污染,。-使用時需注意反應體系的準確性,,確保底物、酶和ATP的比例適當,。單步反應的優(yōu)勢在于簡化了操作流程,,減少了樣品處理的復雜性,并且由于高轉化效率,,避免了耗時的純化步驟,,從而節(jié)省了時間和成本。利用His標簽通過親和層析從細胞裂解物中純化目標蛋白,,然后可能通過離子交換層析,、等方法進一步提純。Recombinant Human LRIG1 Protein,His Tag

Recombinant Human LRIG1 Protein,His Tag,標準物質

DNA瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的分子生物學技術,,用于分離,、鑒定和定量DNA片段。以下是關于DNA瓊脂糖凝膠電泳的一些關鍵點:1.**原理**:-利用瓊脂糖凝膠作為介質,,DNA片段在電場作用下根據其大小和電荷差異進行分離,。較小的DNA片段遷移速度快,而較大的片段遷移速度慢。2.**瓊脂糖**:-一種由瓊脂糖粉末和緩沖液(如TAE或TBE)混合制成的凝膠,。瓊脂糖濃度通常在0.7%到2%之間,,濃度越高,分辨率越高,,但凝膠孔隙越小,,遷移速度越慢。3.**樣品準備**:-DNA樣品通常需要在加載前進行適當的處理,,如純化,、稀釋,有時還需添加樣品緩沖液以保證樣品在電泳過程中的穩(wěn)定性,。4.**加載樣品**:-使用微量移液管將樣品和加載緩沖液(通常含有追蹤染料,,如溴酚藍)混合后,小心地加載到凝膠孔中,。5.**電泳**:-將凝膠置于電泳槽中,,連接電源,施加恒定電壓進行電泳,。電壓和時間根據凝膠濃度和所需分辨率進行調整,。6.**染色**:-電泳完成后,為了可視化DNA條帶,,通常使用熒光染料如EB(溴化乙錠)或SYBRGreen進行染色,。染色后的凝膠在紫外光下觀察,DNA條帶會發(fā)出熒光,。7.**分析**:-通過比較DNA條帶的位置和已知大小的DNA標準品(DNAladder),,可以估計DNA片段的大小。

RNA/DNA/蛋白抽提試劑盒牛痘DNA拓撲異構酶I的反應溫度為37°C,。在這個溫度下,,酶的活性高,能夠有效地進行DNA的切割和連接,。

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pA-Tn5轉座酶是一種經過特殊改造的融合蛋白,,由ProteinA和高活性的Tn5轉座酶組成,具有以下主要應用:1.**高通量測序建庫**:pA-Tn5轉座酶可以用于快速構建用于高通量測序的DNA文庫,,通過其轉座酶活性實現(xiàn)DNA片段化,,同時加上測序接頭,簡化了傳統(tǒng)DNA測序建庫的多步過程,。2.**CUT&Tag技術**:這是一種新興的蛋白質與DNA相互作用研究方法,,pA-Tn5轉座酶利用ProteinA與特定抗體結合,將轉座酶帶到目標蛋白附近進行DNA切割和標簽添加,,實現(xiàn)對蛋白質結合位點的高通量測序分析,。CUT&Tag技術具有高特異性,、低背景噪音、高靈敏度,、良好重復性等優(yōu)點,,適用于表觀遺傳學、干細胞等領域的研究,。3.**ATAC-seq**:pA-Tn5轉座酶也可用于ATAC-seq實驗,,這是一種研究染色質可及性的方法,通過轉座酶在沒有核酸酶消化的情況下切割染色質DNA,,然后在切割位點加上測序接頭,,進行后續(xù)的測序分析。4.**轉錄組測序快速建庫**:有研究開發(fā)了基于Tn5轉座酶的轉錄組測序快速建庫方法,,例如SHERRY方法,,它利用Tn5轉座酶直接作用于RNA/DNA雜交鏈,簡化了建庫過程,,適用于單細胞轉錄組測序,提高了樣本的利用率和測序速度,。

SgMagBeads是一種磁性納米粒子,,通常用于生物樣品的提取和純化過程,包括核酸(DNA或RNA)的提取,。在磁珠法質粒小量抽提試劑盒中,,SgMagBeads或類似的磁珠產品作為組分之一,發(fā)揮著至關重要的作用,。以下是SgMagBeads與磁珠法質粒小量抽提試劑盒之間的聯(lián)系:1.**純化介質**:-SgMagBeads作為磁珠法質粒抽提試劑盒中的一個關鍵組分,,充當核酸純化介質的角色。2.**特異性吸附**:-在質粒DNA的提取過程中,,SgMagBeads能夠特異性地吸附裂解后的質粒DNA,,而其他雜質如蛋白質、RNA等則不被吸附,。3.**快速分離**:-利用外部磁場,,SgMagBeads可以迅速與溶液分離,從而實現(xiàn)快速的樣品純化,。4.**洗滌和去除雜質**:-在吸附了質粒DNA后,,SgMagBeads可以通過洗滌步驟去除吸附在其表面的雜質,提高DNA的純度,。5.**洗脫**:-在洗滌去除雜質后,,SgMagBeads上的質粒DNA可以通過適當的洗脫液洗脫下來,得到高純度的質粒DNA樣品,。6.**操作簡便性**:-SgMagBeads的使用簡化了質粒DNA的提取過程,,減少了傳統(tǒng)方法中需要的離心步驟,使得操作更加簡便快捷。

SpCas9-NLS的應用范圍廣泛,,可用于細胞內的CRISPR/Cas9系統(tǒng)介導的基因編輯,。

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dATPSolution(脫氧腺苷三磷酸溶液)是一種常用的分子生物學試劑,通常以100mM的濃度提供,。這種溶液主要用于支持DNA的合成過程,,如聚合酶鏈反應(PCR)、DNA測序,、填入反應,、切口平移、cDNA合成和TdT加尾反應等,。dATP的化學結構是2'-脫氧腺苷-5'-三磷酸,,它是DNA聚合酶在DNA復制過程中用來合成DNA鏈的原料之一。在Sanger測序中,,dATP與ddATP(雙脫氧腺苷三磷酸)一起使用,,后者是dATP的一種衍生物,缺少3'-OH基團,,用于鏈終止反應,。dATP溶液應儲存在-20°C的條件下以保持其穩(wěn)定性和活性,有效期通常為兩年,。在生產過程中,,dATP通常按照ISO9001標準進行,并在D級清潔室中進行以確保高質量和純度,。HPLC確認的純度通常大于99%,。dATP溶液不含qPCR、PCR,、逆轉錄抑制劑,,也不含DNase、RNase以及人類和大腸桿菌DNA,,以避免實驗過程中的污染,。FnCas12a特異性識別并剪切帶PAM序列的雙鏈DNA(dsDNA)靶標,其PAM序列為5'-TTN-3',,與Cas9的PAM序列不同,。Kemptide (Phospho-Ser5)

與其他Cas12蛋白相比,F(xiàn)nCas12a蛋白的分子量較小,,大約在400-700個氨基酸之間,。Recombinant Human LRIG1 Protein,His Tag

T4UvsX重組酶的保存和純化是實驗室工作流程中的重要環(huán)節(jié),確保了酶的穩(wěn)定性和活性,。以下是根據搜索結果提供的信息:保存條件:-T4UvsX重組酶通常在-20°C的條件下保存,,可以保持3年的有效期,。-某些產品說明中提到,該制品不含甘油,,可用于建立凍干體系,,這可能對長期保存和運輸有額外的好處。-建議避免反復凍融,,因為這可能會影響酶的活性,。純化過程:-T4UvsX重組酶是由大腸桿菌表達和純化的。這意味著科學家首先將T4噬菌體的uvsX基因克隆到適合在大腸桿菌中表達的質粒載體中,。-然后將這個質粒轉化到大腸桿菌宿主細胞中,,使其表達T4UvsX蛋白。-接下來,,通過一系列生化步驟從大腸桿菌細胞中提取和純化T4UvsX蛋白,,這些步驟可能包括細胞裂解、離心,、層析等技術,。注意事項:-T4UvsX重組酶的保存液中甘油含量為20%,建議單獨分裝保存,,以避免反復凍融,。-該酶無核酸酶活性,這表明它在催化反應時不會切割DNA鏈,,而是促進DNA鏈的重組。-本產品用于科研用途,,不應用于臨床診斷,。應用:-T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術,如重組酶聚合酶擴增(RPA),,這是一種快速,、靈敏的核酸檢測技術。通過遵循這些保存和純化指南,,研究人員可以確保T4UvsX重組酶在實驗中的有效性和可靠性,。Recombinant Human LRIG1 Protein,His Tag