磁珠法DNA凝膠回收試劑盒是一種用于從DNA瓊脂糖凝膠中快速、高效地回收DNA片段的實驗工具。它通常包含特異性吸附核酸分子的納米磁珠和相應的緩沖液系統(tǒng),,能夠去除雜質,,得到高質量的DNA回收產(chǎn)物,。這種試劑盒適用于從TAE和TBE瓊脂糖凝膠中回收大小在100bp到30kb之間的DNA片段,回收效率通常可達70%左右。使用磁珠法DNA凝膠回收試劑盒的主要優(yōu)勢包括:1.操作簡便快速,,整個回收過程大約只需30分鐘。2.無需離心,,方便實現(xiàn)高通量和自動化的DNA回收,。3.與柱式法相比,磁珠法對于長片段DNA的回收效率更高,,可高出約20%,。4.純化得到的DNA可以直接用于酶切、連接,、測序等后續(xù)分子生物學實驗。磁珠法的操作過程通常包括以下步驟:1.將瓊脂糖凝膠在融膠液中迅速融解,,使DNA充分釋放,。2.DNA與磁珠特異性結合,通過磁分離快速高效地分離磁珠與溶液,。3.經(jīng)過洗滌去除雜質,。4.使用洗脫液將DNA從磁珠上洗脫,獲得高純度的DNA樣品,。此外,,一些試劑盒的說明書還會提供具體的操作步驟和所需材料的清單,包括磁珠,、融膠液,、洗滌液、洗脫液等組分,,以及可能需要自備的無水乙醇和磁分離裝置,。在使用過程中,需要注意產(chǎn)品的保存條件和有效期,,以及操作時的個人安全防護措施,。將含有重組質粒的表達載體轉化到宿主細胞中,通常是大腸桿菌或其他合適的細胞系,。Recombinant Human CCL20/MIP-3 alpha Protein
5'DNA腺苷?;噭┖械膯尾椒磻且环N高效的酶促反應,用于在DNA分子的5'端添加一個腺苷酸(AMP)基團。這個過程通常涉及以下步驟:1.**準備反應混合物**:-根據(jù)試劑盒說明書,,將所需的5'磷酸化的單鏈DNA(ssDNA或pDNA),、MthRNA連接酶(或其他腺苷酰化酶),、ATP和相應的緩沖液按比例混合,。2.**孵育反應**:-將混合好的反應體系在指定的溫度(通常是65℃)下孵育一定的時間,以允許酶將ATP中的AMP部分轉移到DNA的5'端,。3.**酶失活**:-反應完成后,,通常在85℃孵育5分鐘以失活腺苷酰化酶,,這一步是為了防止后續(xù)的去腺苷?;F(xiàn)象,確保反應的穩(wěn)定性,。4.**產(chǎn)物收集**:-由于轉化效率高,,通常不需要進行凝膠純化步驟??梢酝ㄟ^乙醇沉淀等方法收集腺苷?;蟮腄NA產(chǎn)物。5.**產(chǎn)物應用**:-收集的腺苷?;疍NA可以直接用于后續(xù)的克隆,、測序、連接或其他分子生物學實驗,。6.**注意事項**:-確保所有操作在無RNA酶和無DNA酶的環(huán)境中進行,,以避免污染。-使用時需注意反應體系的準確性,,確保底物,、酶和ATP的比例適當。單步反應的優(yōu)勢在于簡化了操作流程,,減少了樣品處理的復雜性,,并且由于高轉化效率,避免了耗時的純化步驟,,從而節(jié)省了時間和成本,。Recombinant Human VLDLR Protein,His TagPfu DNA Polymerase的熱穩(wěn)定性和保真性使其在優(yōu)化PCR條件時更為靈活,比如在GC含量較高的模板中,。
Benzonase核酸酶是一種來自粘質沙雷氏菌(Serratiamarcescens)的非特異性核酸內(nèi)切酶,,它能夠高效降解所有形式的DNA和RNA,包括單鏈,、雙鏈,、線性和環(huán)狀核酸,,將其消化成2至5個堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸。這種酶在生物技術領域有著廣泛的應用,,包括:1.**降低粘度**:在蛋白樣品制備過程中,,Benzonase核酸酶可以降低由于核酸引起的高粘度,從而便于樣品處理和提高蛋白產(chǎn)量,。2.**去除核酸污染**:在蛋白提取,、疫苗生產(chǎn)、生物制藥等領域,,Benzonase核酸酶用于去除樣品中的核酸污染,,確保產(chǎn)品質量。3.**提高蛋白質分離效果**:在雙向SDS-PAGE蛋白樣品制備中,,Benzonase核酸酶可以去除帶負電荷的核酸,,改善蛋白質的分離效果,增強2-DE分辨率,。4.**促進蛋白質復性**:在高質量包涵體制備中,,Benzonase核酸酶有助于降解核酸,從而促進不可溶性蛋白的復性,。5.**穩(wěn)定性和兼容性**:Benzonase核酸酶在多種條件下穩(wěn)定,,包括高濃度的尿素,且與蛋白酶抑制劑兼容,,但需注意EDTA對其活性的抑制作用,。此外,Benzonase核酸酶的活性單位定義為在30分鐘內(nèi)使△A260值降低1.0的酶量,,相當于完全消化37μgDNA。
T4UvsX重組酶是一種來源于T4噬菌體的酶,,屬于RecA/Rad51家族的同源體,。這種重組酶在雙鏈DNA斷裂的修復以及復制叉重新啟動的過程中扮演著重要角色。T4UvsX重組酶能夠與其他DNA結合蛋白或輔助因子協(xié)同作用,,與單鏈DNA形成核酸蛋白復合物,。該復合物通過尋找與目標DNA互補的區(qū)域進行雜交,以完成鏈置換反應,,且此酶本身不具有核酸酶活性,。產(chǎn)品應用方面,T4UvsX重組酶主要用于等溫擴增技術,,如重組酶聚合酶擴增(RPA)技術,。它在實驗中與T4UvsY重組酶、BsuDNA聚合酶(大片段),、T4基因32蛋白(gp32)等組分一同使用,,以優(yōu)化RPA擴增反應,。T4UvsX重組酶的保存條件為-20℃,可保存3年,,或者-20℃儲存有效期為2年,,避免反復凍融。其儲存液通常包含Tris-HCl,、KCl,、DTT、EDTA和甘油等成分,,以保持酶的穩(wěn)定性和活性,。熱失活處理為60℃孵育10分鐘。在使用T4UvsX重組酶時,,需要注意其保存液中甘油含量較高,,建議單獨分裝保存,并且在操作時穿著實驗服并佩戴一次性手套,,以確保安全,。此外,該產(chǎn)品供科研使用,,不應用于臨床診斷,。在MAGE-A3基因序列的C末端添加His標簽和Avi標簽序列。His標簽有助于通過金屬螯合親和層析進行蛋白純化,。
pA-Tn5轉座酶的產(chǎn)品組分通常包括以下幾個部分:1.**pA-Tn5轉座酶蛋白**:一種高活性的Tn5轉座酶突變體與ProteinA的融合蛋白,,它是產(chǎn)品的主要組分,用于實現(xiàn)DNA片段化和接頭連接的功能,。2.**儲存溶液**:碧云天的BeyoNGS?pA-Tn5轉座酶產(chǎn)品含有特定的儲存溶液,,其組成為50mMHEPES(pH7.2),100mMNaCl,0.1mMEDTA,1mMDTT,0.1%TritonX-100,50%(v/v)Glycerol,這種溶液有助于保持酶的穩(wěn)定性和活性,。3.**測序接頭(Adapters)**:用于與pA-Tn5轉座酶組裝形成pA-Tn5轉座體(pA-Tn5Transposome),,這是進行CUT&Tag實驗的必需組分。4.**反應緩沖液**:部分產(chǎn)品包含用于轉座酶反應的緩沖液,,例如5×TagmentBuffer,,這種緩沖液含有Mg2+,對轉座酶的活性至關重要,。5.**附件**:某些產(chǎn)品可能還包括附件,,如說明書,提供產(chǎn)品使用和保存的詳細信息,。6.**其他組分**:根據(jù)產(chǎn)品的不同,,可能還包括CouplingBuffer、AnnealingBuffer等其他輔助組分,,這些組分有助于轉座酶與DNA的結合和反應的進行,。7.**包裝規(guī)格**:pA-Tn5轉座酶的包裝規(guī)格可能有所不同,,例如碧云天提供的BeyoNGS?pA-Tn5轉座酶有800pmol和4000pmol兩種包裝規(guī)格。牛痘DNA拓撲異構酶I具有解超螺旋的活性,,可以解開雙鏈閉合環(huán)狀DNA的超螺旋結構,,便于后續(xù)的酶切反應。SP6高產(chǎn)量RNA轉錄試劑盒
由于Cas9 NLS系統(tǒng)不涉及DNA的整合,,因此降低了外源DNA整合至細胞基因組的風險 ,。Recombinant Human CCL20/MIP-3 alpha Protein
5'DNA腺苷酰化試劑盒通過酶學方法高效地將單鏈DNA(ssDNA)5'端腺苷?;?,通常轉化效率可達95%以上。以下是實現(xiàn)高效轉化的關鍵步驟和特點:1.**單步反應**:與傳統(tǒng)化學方法相比,,該試劑盒可以在一個簡單的步驟中完成5'端磷酸化修飾的單鏈DNA或RNA的腺苷?;揎棧瑹o需多步驟操作或純化,。2.**高效率**:試劑盒通常能將95%以上的5'端磷酸化的DNA(pDNA)轉化成腺苷?;疍NA(AppDNA),從而提高產(chǎn)量并避免膠回收提純步驟,。3.**高溫孵育**:在65℃的高溫下進行反應,,有助于避免DNA或RNA的二級結構對腺苷酰化反應的干擾,。4.**酶的來源**:試劑盒中的腺苷?;?Adenylase)通常來源于嗜熱古細菌,在大腸桿菌中表達獲得,,保證反應的高效性,。5.**操作簡便**:使用MthRNA連接酶、ATP和5'-磷酸化的單鏈DNA進行反應,,操作簡單,,且腺苷化產(chǎn)物通常不需要進行電泳切膠回收,可以直接通過乙醇沉淀進行進一步濃縮后用于后續(xù)的連接反應,。6.**失活酶**:反應完成后推薦在85℃孵育5分鐘以失活Adenylase,防止去腺苷?;F(xiàn)象,,確保腺苷酰化比率不下降,。