酵母重組表達的N-糖苷酶F(PNGaseF)是一種酰胺水解酶,,具有以下特點:1.**高效性**:PNGaseF是去除幾乎所有N-連接寡糖從糖蛋白中有效的酶法方法,。它能夠在幾分鐘內快速且無偏倚地釋放所有的N-糖鏈,適合后續(xù)的色譜或質譜分析,。2.**重組酶**:該酶是重組的酰胺酶,,能夠從高甘露糖,、雜合和復雜寡糖中切割內GlcNAc和天冬氨酸殘基之間的連接。3.**純度**:純度達到95%以上,,通過SDS-PAGE和完整ESI-MS進行確定,。4.**儲存穩(wěn)定性**:在含有50%甘油的儲存緩沖液中,好的活性和穩(wěn)定性可維持長達24個月,。5.**使用條件**:可以在原生或變性條件下使用,,對于變性條件下的去糖基化,建議添加NP-40以解除SDS的抑制作用,。6.**比活性**:具有高達100000U/mL的比活性,。7.**His標簽**:產品帶有His標簽,常用于抗體及其相關蛋白的完全去糖基化,。8.儲存條件:-25~-15℃保存,,有效期1年。9.**無甘油版本**:還提供了無甘油版本的PNGaseF,,這有助于在HPLC和質譜分析中獲得結果,。10.**酶活定義**:1個酶活力單位指在10μL的反應體系中,37℃條件下1小時從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。這些特點使得酵母重組表達的PNGaseF成為研究和分析糖蛋白糖鏈結構的重要工具,。Cas12a還可以高效地在一些重要的工業(yè)鏈霉菌菌株中產生編輯,,這些菌株由于毒性而不能使用SpCas9進行編輯。Recombinant Mouse LIGHT/TNFSF14
NLS-Cas9Nuclease是一種重組的化膿性鏈球菌Cas9蛋白,,它在N端和C端都添加了核定位信號(NLS),,這使得它能夠更有效地進入細胞核并進行基因組編輯。這種蛋白與CRISPR/Cas9系統(tǒng)的引導RNA(gRNA)形成穩(wěn)定的核糖核的蛋白(RNP)復合物,,可以在進入細胞后立即定位到細胞核,,從而誘導特定的DNA雙鏈斷裂,實現(xiàn)基因編輯,。與傳統(tǒng)的mRNA或質粒系統(tǒng)相比,,使用NLS-Cas9Nuclease不需要轉錄和翻譯過程,因此可以避免將外源DNA插入基因組的風險,,這對于基因編輯尤其有用,。NLS-Cas9Nuclease的特點包括:1.無DNA:系統(tǒng)不添加外部DNA,降低了插入外源DNA的風險,。2.高切割效率:雙NLS確保Cas9蛋白高效進入細胞核,。3.低脫靶效應:Cas9核酸酶的瞬時表達提高了切割的特異性。4.節(jié)省時間:無需轉錄和翻譯過程,。這種核酸酶可以用于體外DNA切割篩選高效和特異性靶向gRNA,,以及通過電穿孔或注射與特定gRNA結合時的體內基因編輯。產品的保存條件通常是在-25~-15℃,,有效期為一年,。使用時,可以根據(jù)推薦的反應體系進行體外DNA裂解實驗,,并通過瓊脂糖凝膠電泳檢測消化效率,。具體產品的詳細信息和應用指南,可以參考金斯瑞生物科技有限公司,、NEB,、金斯瑞、YEASEN和Novoprotein等公司提供的資料,。Recombinant Cynomolgus TPSAB1 protein,His TagFnCas12a系統(tǒng)的脫靶效應較低,,這對于減少非目標效應和提高物質的安全性至關重要。
確保重組EGFP(增強型綠色熒光蛋白)在實驗中的穩(wěn)定性和活性,,可以采取以下措施:1.**適當?shù)膬Υ鏃l件**:重組EGFP通常以凍干粉形式提供,,應在-20°C至-80°C的低溫條件下儲存,以保持其穩(wěn)定性,。避免反復凍融,,因為這可能導致蛋白質結構的破壞和活性的喪失,。2.**正確的復溶方法**:在無菌條件下,使用推薦的溶劑(通常是無菌去離子水或適當?shù)木彌_液)復溶EGFP,,并避免使用含有蛋白酶或氧化劑的溶液,。3.**避免光照**:EGFP對光照敏感,尤其是在紫外和藍光下,。在處理和儲存時應避光,,使用遮光容器或在低光照條件下操作。4.**使用保護劑**:在某些情況下,,添加蛋白穩(wěn)定劑(如甘油,、蔗糖或BSA)可以提高EGFP的穩(wěn)定性。5.**避免極端pH**:EGFP的活性和穩(wěn)定性可能受到pH值的影響,。在實驗中使用接近其等電點pH值的緩沖系統(tǒng),,通常是中性或略偏堿性的條件。6.**控制溫度**:避免將EGFP暴露在極端溫度下,,尤其是在高溫條件下,因為這可能導致蛋白質變性,。7.**避免物理剪切力**:在操作過程中,,避免劇烈攪拌或超聲處理,因為這些可能會導致蛋白質結構的破壞,。
確保N末端His標簽的泛素蛋白在實驗中的活性和穩(wěn)定性,,需要考慮以下幾個關鍵因素:1.**儲存條件**:按照生產商的建議,將重組泛素蛋白凍干粉儲存在-25~-15℃的條件下,,以保持其穩(wěn)定性和活性,。2.**避免反復凍融**:多次凍融會降低蛋白質的穩(wěn)定性和活性。建議在使用后將剩余的蛋白質分裝并儲存在推薦的條件下,。3.**復溶條件**:按照產品說明,,使用無菌蒸餾水或推薦的緩沖液將蛋白質復溶至適當?shù)臐舛取Mǔ=ㄗh添加0.1%BSA以增加蛋白質的溶解度和穩(wěn)定性,。4.**使用前離心**:在使用前,,將蛋白質溶液短暫離心,以確保所有組分都沉積在底部,,避免取樣時的不均勻性,。5.**工作濃度和體積**:根據(jù)實驗設計,將蛋白質稀釋至工作濃度,,并盡量使用小體積以減少蛋白質的降解,。6.**避免蛋白降解**:在實驗過程中,使用蛋白酶抑制劑以防止蛋白降解酶對重組泛素蛋白的降解,。7.**避免氧化**:在蛋白質的儲存和使用過程中,,避免氧化,可以通過添加抗氧化劑如DTT或TCEP。8.**避免污染**:使用無菌技術操作,,確保實驗器材和環(huán)境的清潔,,避免微生物污染。9.**操作環(huán)境**:在4℃或冰上進行操作,,以減少蛋白質降解和非特異性相互作用,。UBE2L3作為泛素化途徑中的關鍵酶,其在蛋白質降解,、信號傳導,、細胞周期控制等重要內容有著作用。
重組人血清白蛋白(rHSA),,特別是通過植物表達系統(tǒng)生產的細胞培養(yǎng)級產品,,以其高純度和質量一致性而受到科研和工業(yè)界的重視。以下是高純度rHSA的一些關鍵特點和意義:1.**純度標準**:高純度的rHSA通常意味著蛋白質含量達到99%以上,,這通常通過高效液相色譜(HPLC),、SDS-PAGE電泳等方法進行驗證。2.**內素水平**:內素水平是衡量蛋白質純度的一個重要指標,。高純度rHSA的內素水平通常非常低(例如,,≤0.5EU/ml),這有助于減少細胞培養(yǎng)中潛在的內素污染,。3.**宿主細胞蛋白(HCP)殘留**:高純度rHSA的宿主細胞蛋白殘留量非常低,,這有助于減少細胞培養(yǎng)中外來蛋白的干擾。4.**無動物源成分**:由于rHSA是通過植物表達系統(tǒng)生產的,,因此不含有動物源性成分,,這降低了動物源性疾病傳播的風險。5.**批次一致性**:高純度rHSA的生產過程通常在嚴格控制的條件下進行,,確保不同批次之間的質量一致性,,這對于科學研究和商業(yè)生產至關重要。6.**應用廣**:高純度rHSA在細胞培養(yǎng),、生物制藥,、藥物載體、疫苗開發(fā)等領域有著廣的應用,。7.**安全性**:高純度rHSA的生產過程不涉及動物源材料,,因此可以降低血源性疾病的風險,提高產品的安全性,。Multiplex Probe qPCR Mix 是一種濃縮預混液,,含有抗體技術修飾的熱啟動酶Hotstart Taq DNA聚合酶。Recombinant Cynomolgus IL-33 Protein,His Tag
盡管Ultra-Long Master Mix設計用于長片段擴增,,但在某些情況下,,可能出現(xiàn)非特異性擴增,,需要通過優(yōu)化引物。Recombinant Mouse LIGHT/TNFSF14
重組Exendin-4在科研方面的作用主要體現(xiàn)在以下幾個方面:1.**糖尿病研究**:重組Exendin-4作為一種GLP-1受體激動劑,,其在2型糖尿?。═2DM)方面具有的療效,能夠模擬GLP-1的作用,,增加胰島素的分泌,,抑制胰高的血糖素的分泌,從而降低糖水平,。2.**藥物開發(fā)**:Exendin-4的結構和功能特性使其成為開發(fā)新型糖尿病藥物的重要候選物質,。科研人員通過基因工程方法構建長效融合蛋白,,以延長Exendin-4的半衰期,,提高其效果和降低生產成本。3.**分子機制研究**:科研中對Exendin-4的作用機制進行了深入研究,,包括其對胰島β細胞的作用,、對神經系統(tǒng)的保護作用,以及其在胰島移植受者中增加胰島素分泌量的效果,。4.**生物合成研究**:通過生物工程技術,,如基因序列優(yōu)化和密碼子改造,提高Exendin-4在宿主細胞中的表達效率,,以及通過純化工藝提高其純度,為臨床應用提供基礎,。5.**藥理作用及機制研究**:Exendin-4的藥理作用及其機制是科研關注的重點,,包括其對胰島素分泌的影響、對胰島β細胞增殖和凋亡的調控,,以及其在減緩胃排空和抑制食欲方面的作用,。Recombinant Mouse LIGHT/TNFSF14