Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE):DNA電泳的高效選擇在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,,瓊脂糖凝膠電泳是分析DNA片段大小和純度的常用技術(shù),而Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE)作為經(jīng)典的緩沖液之一,,因其高效,、穩(wěn)定和經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn),,成為實(shí)驗(yàn)室中不可或缺的工具,。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE)的主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷),、硼酸和EDTA(乙二胺四乙酸),。這種配方能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,,確保DNA片段的清晰分離,。高效分離:TBE緩沖液具有較高的離子強(qiáng)度,適合分離小分子量的DNA片段,。它能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的電流,,確保DNA條帶清晰、分辨率高,。兼容性強(qiáng):TBE緩沖液適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),滿足不同實(shí)驗(yàn)需求,。經(jīng)濟(jì)實(shí)用:5×的高濃度設(shè)計(jì)使得該緩沖液在使用時(shí)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活稀釋,,減少浪費(fèi),降低實(shí)驗(yàn)成本,。穩(wěn)定性高:液體形式的TBE緩沖液在保存和使用過程中更加穩(wěn)定,,只需按照說明稀釋即可使用,無需額外配制,。使用方法使用Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE)時(shí),,需按照以下步驟操作:稀釋緩沖液:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,,取適量的5×TBE緩沖液,加入去離子水稀釋至1×工作液,。它不僅適用于常規(guī)的瓊脂糖凝膠電泳,,還可用于基因克隆、PCR產(chǎn)物分析和質(zhì)粒提取等實(shí)驗(yàn),。河北人膠原蛋白技術(shù)服務(wù)
GTBE電泳緩沖液(10×):高效,、便捷的DNA電泳緩沖液在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,電泳是分析DNA片段大小和純度的常用技術(shù),,而緩沖液的選擇對電泳效果至關(guān)重要,。GTBE電泳緩沖液(10×)作為一種高效、便捷的濃縮型緩沖液,,為DNA電泳提供了理想的條件,,尤其適用于分離小片段DNA。GTBE電泳緩沖液(10×)的主要成分包括甘氨酸,、Tris,、硼酸和EDTA。這種配方能夠提供穩(wěn)定的pH環(huán)境和良好的導(dǎo)電性,,確保DNA在電泳過程中均勻遷移。與傳統(tǒng)的TAE或TBE緩沖液相比,,GTBE緩沖液在分離小片段DNA(小于2000 bp)時(shí)表現(xiàn)出更高的分辨率和清晰度,。優(yōu)勢與特點(diǎn)高效分離:GTBE緩沖液特別適合分離小片段DNA,能夠提供更清晰的電泳條帶,,尤其在高分辨率電泳中表現(xiàn)出色,。濃縮設(shè)計(jì):10×的高濃度設(shè)計(jì)使得GTBE緩沖液在使用時(shí)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活稀釋,減少浪費(fèi),,降低實(shí)驗(yàn)成本,。兼容性強(qiáng):GTBE緩沖液適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),,滿足不同實(shí)驗(yàn)需求,。穩(wěn)定性高:該緩沖液在室溫下保存,有效期可達(dá)12個(gè)月,,使用方便,,無需特殊保存條件。使用方法使用GTBE電泳緩沖液(10×)時(shí),,需按照以下步驟操作:稀釋緩沖液:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,,將10×GTBE緩沖液稀釋至1×工作液。
DNA Marker III:高效,、精細(xì)的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)DNA Marker III 是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),,廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于快速估算DNA片段的大小,。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,,能夠?yàn)镈NA分析提供清晰、準(zhǔn)確的分子量參考,。產(chǎn)品特點(diǎn)組成:DNA Marker III 通常包含7-9條不同長度的DNA片段,,覆蓋從100 bp到10,000 bp的范圍。具體片段長度可能因品牌而異,,但常見的片段包括100 bp,、200 bp、500 bp,、1,000 bp,、2,000 bp、5,000 bp和10,000 bp,。即用型設(shè)計(jì):預(yù)混了1×Loading Buffer,,無需額外添加,直接上樣,,節(jié)省時(shí)間和操作步驟,。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,,條帶亮度均勻,,便于在紫外燈下觀察。穩(wěn)定性高:在室溫下可穩(wěn)定保存6個(gè)月,,長期保存建議置于-20℃,,避免反復(fù)凍融。使用方法樣量:建議每次取5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中,。如果加樣孔較寬,,可適當(dāng)增加樣量。電泳條件:推薦使用1.0%-2.0%的瓊脂糖凝膠,,1×TAE或0.5×TBE緩沖液,,電壓5-10 V/cm。染色與觀察:電泳結(jié)束后,,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,,在紫外燈下觀察。注意事項(xiàng)保存條件:建議低溫保存,,避免反復(fù)凍融,,以防止核酸酶污染導(dǎo)致條帶降解。瓊脂糖質(zhì)量:電泳時(shí)應(yīng)盡量選用高質(zhì)量的瓊脂糖,,獲得比較好分離效果,。
0×TAE粉劑是一種高濃度的緩沖液原料,,主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、醋酸鈉和EDTA(乙二胺四乙酸),。它是一種廣用于瓊脂糖凝膠電泳的緩沖液,,能夠?yàn)镈NA片段的分離和分析提供穩(wěn)定的環(huán)境。50×TAE粉劑的優(yōu)勢高效分離:TAE緩沖液在低濃度下具有較低的離子強(qiáng)度,,特別適合分離大分子量的DNA片段,。它能夠提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保DNA在電泳過程中保持完整結(jié)構(gòu),。經(jīng)濟(jì)實(shí)用:50×TAE粉劑以高濃度形式提供,,用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求自行配制不同體積的工作液,降低了成本,,同時(shí)也減少了儲存空間,。穩(wěn)定性高:粉劑形式的TAE在保存和運(yùn)輸過程中更加穩(wěn)定,不易受環(huán)境因素影響,。使用時(shí)只需按照說明溶解于去離子水中,,即可得到所需的緩沖液。使用方法使用50×TAE粉劑時(shí),,需按照以下步驟配制緩沖液:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,,稱取適量的50×TAE粉劑。將粉劑溶解于適量的去離子水中,,攪拌至完全溶解,。定容至所需體積,得到50×TAE濃縮液,。使用時(shí),,將50×TAE濃縮液按1:49的比例稀釋至1×TAE工作液,,即可用于瓊脂糖凝膠電泳,。保存與注意事項(xiàng)50×TAE粉劑應(yīng)保存在干燥、陰涼處,,避免受潮和污染,。配制好的緩沖液可在室溫或4℃條件下保存,但需注意定期檢查其pH值和透明度,,確保緩沖液的穩(wěn)定性,。它已經(jīng)預(yù)先混合了上樣緩沖液,用戶只需取適量(通常為5-10 μL)直接加入凝膠孔中即可進(jìn)行電泳,。
在當(dāng)今生物科技領(lǐng)域,,大腸桿菌表達(dá)病毒樣顆粒技術(shù)服務(wù)正以其獨(dú)特的優(yōu)勢和廣泛的應(yīng)用前景,成為科研和產(chǎn)業(yè)界的關(guān)注焦點(diǎn),。病毒樣顆粒(VLPs)是一種由病毒蛋白自行組裝而成的納米級結(jié)構(gòu),,其形態(tài)和大小與天然病毒相似,,但不含有病毒的遺傳物質(zhì),因此不具備性,。大腸桿菌作為一種常用的原核表達(dá)系統(tǒng),,在VLPs的生產(chǎn)中具有諸多優(yōu)勢。首先,,大腸桿菌生長迅速,、培養(yǎng)成本低廉,能夠在短時(shí)間內(nèi)大量繁殖,,為VLPs的高效表達(dá)提供了基礎(chǔ),。其次,其遺傳背景清晰,,基因操作技術(shù)成熟,,便于進(jìn)行基因工程改造,使我們能夠精確地控制VLPs的組裝和表達(dá),。與傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因動物模型相比,,Cre/LoxP系統(tǒng)結(jié)合病毒載體(如AAV)進(jìn)行基因編輯可以縮短實(shí)驗(yàn)周期。上海漢遜酵母表達(dá)人膠原蛋白技術(shù)服務(wù)開發(fā)
Blood Direct PCR Master Mix 2×的優(yōu)勢在于其能夠直接作用于血液樣本,,無需進(jìn)行繁瑣的DNA提取和純化步驟,。河北人膠原蛋白技術(shù)服務(wù)
除了CRISPR-Cas9技術(shù),還有其他幾種基因編輯技術(shù)可以用于金黃色葡萄球菌的研究:1.單堿基編輯技術(shù):這是一種新型的基因編輯技術(shù),,可以在不切割DNA雙鏈的情況下實(shí)現(xiàn)基因的定點(diǎn)突變,。季泉江教授課題組與中國科學(xué)院北京基因組所韓大力研究員課題組合作,在金黃色葡萄球菌中建立了單堿基編輯技術(shù),,通過融合失活的Cas9蛋白(Cas9D10A)和胞嘧啶脫氨酶(APOBEC1),,實(shí)現(xiàn)了高效單堿基編輯,有助于研究耐藥機(jī)制和開發(fā)新型手段,。2.同源重組(HR)修復(fù)技術(shù):在某些細(xì)菌中,,可以通過同源重組機(jī)制對CRISPR-Cas9系統(tǒng)產(chǎn)生的雙鏈DNA斷裂進(jìn)行修復(fù),實(shí)現(xiàn)基因的精確編輯,。例如,,在谷氨酸棒桿菌中,利用CRISPR/Cas9技術(shù)結(jié)合同源重組修復(fù)模板,,實(shí)現(xiàn)了高效的基因缺失和點(diǎn)突變,。3.非同源末端連接(NHEJ)相關(guān)蛋白共表達(dá):通過共表達(dá)Cas9蛋白和NHEJ相關(guān)蛋白,如連接酶LigD,,可以在鏈霉菌中實(shí)現(xiàn)有效的基因組編輯,,這種方法不依賴于同源重組,可以應(yīng)用于那些同源重組效率較低的細(xì)菌。4.CRISPR干擾技術(shù)(CRISPRi):利用失活的Cas9蛋白(dCas9)阻斷基因的轉(zhuǎn)錄,,從而抑制特定基因的表達(dá),。這種技術(shù)可以用于研究基因功能和調(diào)控基因表達(dá),已經(jīng)在多種細(xì)菌中得到應(yīng)用,。河北人膠原蛋白技術(shù)服務(wù)