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河北等滲條件中鹽核酸酶70950-160

來源: 發(fā)布時間:2024-03-07

文章作者對酶法去除dsDNA進行了優(yōu)化研究,兩種酶濃度梯度為25U/ml,、50U/ml及100U/ml,,Mg2+濃度為5mM,通過PicoGreen檢測dsDNA含量,。結(jié)果發(fā)現(xiàn),,25U/ml的M-SAN HQ中鹽核酸酶對dsDNA去除效果明顯優(yōu)于100U/ml的Benzonase。此外,,在酶切反應(yīng)速度方面,,M-SAN HQ有更明顯的優(yōu)勢,——在低濃度底物dsDNA(如20ng/ml)條件下,,50U/ml的M-SAN HQ在5分鐘內(nèi)將dsDNA降解到2ng/ml左右,;而50U/ml的Benzonase在30分鐘孵育消化后,dsDNA濃度依然是12ng/ml左右,。一般來說,,生理鹽條件相當(dāng)于150mM NaCl溶液,而這正是中鹽核酸酶較為適合的條件,。河北等滲條件中鹽核酸酶70950-160

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倫敦大學(xué)學(xué)院(UCL)的工藝開發(fā)團隊,,在細(xì)胞藥物Car-T涉及的慢病毒(Lentivirus,LV)生產(chǎn)過程中,,比較了Benzonase和M-SAN HQ中鹽核酸酶在酶活,、酶切時間、各階段LV的穩(wěn)定性等方面的表現(xiàn),,發(fā)現(xiàn)在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶酶活更高,、酶切時間更短,同時用納米顆粒分析(NTA)技術(shù)確認(rèn)M-SAN HQ組得到的LV病毒顆粒聚集更少,、穩(wěn)定性更高,。他們會繼續(xù)探究HCD是否影響LV的穩(wěn)定性,,及對LV侵染效率和生命周期是否有影響,。通過更多研究,,我們探究M-SAN HQ中鹽核酸酶助力LV生產(chǎn)的關(guān)鍵機制。浙江生理鹽條件中鹽核酸酶70950-160M-SAN HQ ELISA kit檢測產(chǎn)品能定量檢測該核酸酶,,與中鹽核酸酶搭配用在medicine生產(chǎn),。

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宿主細(xì)胞DNA(HCD)殘留以染色質(zhì)形式存在,其中有帶負(fù)電荷的DNA,、帶正電荷及疏水區(qū)段的組蛋白,,就像膠帶一樣能夠吸附很多物質(zhì),包括各種雜蛋白,、色譜填料,、目的病毒顆粒。非特異吸附雜蛋白,,會影響蛋白雜質(zhì)(如HCP)等的去除,;吸附到色譜填料上,會降低色譜分離純化效率,;吸附到目的病毒顆粒時,,會影響目的產(chǎn)物的穩(wěn)定性,從而降低目的產(chǎn)物的得率,。因此,,從生產(chǎn)工藝層面來講,一定要去除HCD,,從而能夠簡化工藝,、提高目的產(chǎn)物的產(chǎn)量。

M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下的優(yōu)勢,,讓其成為生物生產(chǎn)工藝中去除核酸污染的更好選擇,。經(jīng)過多年的市場宣傳,M-SAN HQ中鹽核酸酶品質(zhì)已得到多個全球TOP CDMOs認(rèn)可,,納入其工藝開發(fā)篩選平臺,。此外,目前全球有10+臨床項目涉及的病毒載體生產(chǎn)用到M-SAN HQ中鹽核酸酶,。對于同一個項目,,用M-SAN HQ替代Benzonase全能核酸酶,酶量減少,、HCD去除效果更優(yōu),、病毒載體產(chǎn)量也有一定程度的提高,酶相關(guān)成本降為原有的1/5以內(nèi),,極大降低了病毒載體生產(chǎn)成本,。致力于從深海microbe中識別新的冷適應(yīng)酶,,用于分子研究、IVD和biopharma領(lǐng)域,。

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ArcticZymes Technologies提供獨特特性的鹽活性核酸酶(Salt Active Nucleases,,SANs)系列產(chǎn)品,主要包含SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,。這兩款酶都是非特異核酸內(nèi)切酶,,跟Benzonase一樣能高效降解任何形式(雙鏈、單鏈,、線狀,、環(huán)狀)的DNA和RNA;都來自于深海microbes,,通過Pichia pastoris發(fā)酵生產(chǎn)得到,。這兩款酶的區(qū)別在于發(fā)揮酶活的適宜鹽濃度不同,——M-SAN HQ中鹽核酸酶的適宜鹽濃度在175mM-250mM,,而SAN HQ高鹽核酸酶的適宜鹽濃度在400mM-600mM,。在biopharma生產(chǎn),如細(xì)胞基因medicine及vaccine生產(chǎn)中,,宿主細(xì)胞DNA殘留是關(guān)鍵質(zhì)量參數(shù)之一,。天津等滲條件中鹽核酸酶70950-202

M-SAN HQ中鹽核酸酶在細(xì)胞培養(yǎng)條件或生理鹽濃度下具有較高活性。河北等滲條件中鹽核酸酶70950-160

ArcticZymes Technologies致力于提供高質(zhì)量產(chǎn)品,,具有良好的批間一致性,、穩(wěn)定可靠的質(zhì)量、及時的文件及技術(shù)支持,。ArcticZymes所有產(chǎn)品的開發(fā),、生產(chǎn)及銷售等都符合ISO13485:2016質(zhì)量管理體系標(biāo)準(zhǔn);鑒于生物制品更嚴(yán)格的質(zhì)控要求,,廠家對鹽活性核酸酶系列產(chǎn)品(Salt Active Nucleases,,SANs)的生產(chǎn)及質(zhì)控,在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上,,增加了cGMP相應(yīng)要求,,如生產(chǎn)用原輔料是Non-animal和Non-plant來源的,終產(chǎn)品經(jīng)過0.22μm過濾sterilization,,放行檢測包括microbes,、fungus及內(nèi)毒檢測等,所有標(biāo)準(zhǔn)符合USP-EP要求,。河北等滲條件中鹽核酸酶70950-160