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江蘇500mM鹽濃度條件高鹽核酸酶70921-202

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-03-07

Mayer等(2023)以measles virus(麻疹病毒,,MV)為例,,評(píng)估了四種不同核酸酶(BenzonaseTM,、DeneraseTM,、M-SAN HQ中鹽核酸酶及SAN HQ高鹽核酸酶)對(duì)于染色質(zhì)DNA去除的效果,。Vero細(xì)胞通過微載體貼壁培養(yǎng)來生產(chǎn)麻疹病毒MV,72hr后收獲上清液,,使用3μm cellulose filter(Sartorius)過濾后分裝多份,,置于-80℃保存便于后續(xù)使用。在解凍后的上清中調(diào)節(jié)對(duì)應(yīng)鹽濃度,并加入50 U/ml核酸酶,,37℃孵育2hr進(jìn)行消化,,消化后留樣;將消化后上清液過Capto Core 700 (Cytiva)柱子,,收集流穿液,,之后洗雜、洗脫,,并分別留樣,。通過SDS-PAGE分析發(fā)現(xiàn),相比Benzonase等傳統(tǒng)核酸酶,,在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶更高效將染色質(zhì)DNA剪切成更小片段,,甚至將核小體DNA剪切更徹底。SAN HQ高鹽核酸酶在鹽濃度400-650mM條件下活性達(dá)到峰值,。江蘇500mM鹽濃度條件高鹽核酸酶70921-202

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跟其他類型的核酸酶一樣,,SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶的滅活方法有很多,分為可逆滅活及不可逆滅活,。金屬離子螯合劑如EDTA會(huì)可逆抑制兩者的活性,,加入的EDTA濃度一般是溶液中Mg2+濃度的2倍左右即可完全抑制活性;后續(xù)補(bǔ)加過量的Mg2+即可恢復(fù)核酸酶活性,。加熱,、還原劑(如DTT)、咪唑,、甘油及表面活性劑(如高于15%濃度的Triton X-100,、SDS、尿素等)等都可以使其不可逆失活,。在生物工藝流程,,需要結(jié)合上下游應(yīng)用需要選擇合適的方法去除或滅活核酸酶。江蘇500mM鹽濃度條件高鹽核酸酶70921-202ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期,,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?),。

江蘇500mM鹽濃度條件高鹽核酸酶70921-202,高鹽核酸酶

經(jīng)過多年的經(jīng)驗(yàn)積累及市場積淀,倍篤生物已組合多條不同產(chǎn)品線,,分別滿足體外診斷,、organoid及干細(xì)胞、細(xì)胞基因藥物等領(lǐng)域的需求,。其中,,細(xì)胞基因藥物領(lǐng)域產(chǎn)品線包含SAN HQ高鹽核酸酶及M-SAN HQ中鹽核酸酶、泊洛沙姆P 188 Bio,、GMP級(jí)MSC/PSC培養(yǎng)基,、GMP級(jí)膠原酶、AAV滴度檢測產(chǎn)品、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測產(chǎn)品,、AAV中和抗體蛋白酶等,;相關(guān)品牌有挪威ArcticZymes Technologies、德國BASF,、德國Sartorius,、德國Nordmark、瑞典Genovis,、中國君研生物等,。

ArcticZymes Technologies有兩條產(chǎn)品線,分別針對(duì)分子診斷和生物藥物生產(chǎn)兩個(gè)領(lǐng)域,。在分子診斷領(lǐng)域,,產(chǎn)品有蝦堿酶(SAP)、UNG酶,、等溫?cái)U(kuò)增酶(IsoPol),、連接酶、蛋白酶,、內(nèi)切核酸酶及外切核酸酶等,,涉及核酸抽提、擴(kuò)增及測序等應(yīng)用,。在生物藥物生產(chǎn)領(lǐng)域,,全球創(chuàng)新的鹽活性核酸酶(Salt Active Nucleases, SANs)系列產(chǎn)品以其獨(dú)特優(yōu)勢,在細(xì)胞基因藥物及RNA藥物生產(chǎn)中表現(xiàn)出更好的性能,。其中,,鹽活性核酸酶SANs系列產(chǎn)品包含兩款產(chǎn)品,,分別是SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶,;兩款酶的差別在于發(fā)揮酶活的鹽濃度范圍分別是生理鹽濃度范圍和400-600mM高鹽濃度范圍。SAN HQ是生物工藝流程中去除核酸污染的理想選擇,。

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ArcticZymes Technologies于2017年推出了SAN HQ高鹽核酸酶及其對(duì)應(yīng)的SAN HQ ELISA kit,。該試劑盒原理是采用雙抗夾心法定量檢測各種生物制品的中間品、半成品和成品中SAN HQ高鹽核酸酶的殘留含量,,特異性的anti-SAN作為捕獲抗體偶聯(lián)在96-well plate,,生物素Biotin標(biāo)記anti-SAN作為檢測抗體,鏈霉親和素-HRP偶聯(lián)物起到信號(hào)放大作用,,TMB是終反應(yīng)底物,。該試劑盒特異識(shí)別SAN HQ高鹽核酸酶,對(duì)其它核酸酶沒有特異性結(jié)合,。它的定量范圍是0.4-25.6ng/ml,,檢測精確度高RSD<=15%,2-8℃條件下保存12個(gè)月。SAN HQ高鹽核酸酶更適合用于AAV生產(chǎn),。遼寧SAN HQ高鹽核酸酶70921-202

在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上,,增加了cGMP相應(yīng)要求。江蘇500mM鹽濃度條件高鹽核酸酶70921-202

ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期,,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?),;立足北極海洋區(qū),致力于從海洋生物中識(shí)別新的冷適應(yīng)酶,,用于分子研究,、體外診斷和藥物領(lǐng)域。以其產(chǎn)品的獨(dú)特性質(zhì)及超過30年的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)積淀,,ArcticZymes Technologies得到國際分子診斷及生物藥物領(lǐng)域客戶的肯定及大力支持,,ArcticZymes產(chǎn)品線已用于診斷產(chǎn)品及生物藥物生產(chǎn)中。2005年,,ArcticZymes在Olso證券交易所上市,,并且持續(xù)得到挪威國家基金的支持。江蘇500mM鹽濃度條件高鹽核酸酶70921-202