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具體步驟是:以下所有步驟都在4℃下進(jìn)行,，1,、300×g10min,，棄沉淀，去除細(xì)胞2,、2000×g20min，棄沉淀,，去除死細(xì)胞3,、10,000×g30min，棄沉淀,，去除細(xì)胞碎片等亞細(xì)胞成分4,、10,000×g70min，棄上清,，沉淀即為外泌體5,、PBS（每10ml細(xì)胞培養(yǎng)液用30mlPBS重懸）清洗沉淀物，混勻,，10,000×g70min6,、lmlPBS溶解沉淀（外泌體），立即使用或置于-80℃?zhèn)溆谩?,、一般超速離心法會(huì)結(jié)合密度梯度離心,，這樣得到的外泌體更純，具體做法第4步后蔗糖梯度離心,，10,000×g70min,，以去除密度大于1.21g/ml的顆粒。優(yōu)點(diǎn)是：成本低,，操作簡(jiǎn)單,，獲得的囊泡...

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn),，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升,。此外,，還有研究表明,，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn),，NY-ESO-1是其中對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物,。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表...

外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡,，直徑約為30-200nm,，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯狀形態(tài),、雙層膜結(jié)構(gòu),，天然存在于血液,、尿液、唾液,、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中,。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類型的細(xì)胞（免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞,、干細(xì)胞),，都可以產(chǎn)生并釋放exosome。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA,，Exosome可通過細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞,，也可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA,、miRNA,、lncRNA,、circRNA,，甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞，參與細(xì)胞間通訊,。Exosome在免疫應(yīng)答,、炎癥反應(yīng)、血管生成,、凋亡,、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關(guān)鍵作...

近年來，隨著外泌體研究的不斷深入,，它的應(yīng)用已經(jīng)涉及一些病癥治病領(lǐng)域,、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域、寄生蟲領(lǐng)域,；臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng),、內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)等。外泌體來源及內(nèi)含物,。幾乎所有類型的細(xì)胞都可以分泌外泌體,，同時(shí)外泌體也普遍存在于體液中，包括血液,、眼淚,、尿液、唾液,、乳汁,、腹水等。目前研究發(fā)現(xiàn)外泌體中富含核酸（microRNA,、lncRNA,、circRNA,、mRNA、tRNA等）,、蛋白,、膽固醇等。外泌體的表面marker主要有CD63,、CD81,、CD9、TSG101,、HSP27等,。外泌體鑒定。目前對(duì)于外泌體的鑒定主要有四種方法：透射電子顯微鏡（TEM）,、Nanosight,、WesternBlot、流式...

外泌體提?。?,、過濾。超濾膜也可用于分離外泌體,。根據(jù)外泌體的大小,，從蛋白質(zhì)和其他大分子中分離外泌體。較常見的過濾膜具有0.8μm,、0.45μm或0.22μm的孔徑,，可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌體,，也有設(shè)計(jì)成微柱多孔硅纖毛結(jié)構(gòu)以分離40-100nm外泌體：不過,，該方法由于過濾膜的粘附，可能會(huì)損失外泌體,，并且過濾時(shí)的壓力和剪切力,，可能會(huì)使外泌體變形受損。2,、基于聚合物的沉淀技術(shù),。基于聚合物的沉淀技術(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合,，在4℃溫育并低速離心,。用于聚合物沉淀的較常見聚合物之一是聚乙二醇（PEG）。用這種聚合物沉淀具有許多優(yōu)點(diǎn),，包括對(duì)分離的外泌體影響小,、pH...

CD47是信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α（SIRPα，也稱為CD172a）的配體,，CD47-SIRPα間的結(jié)合能夠發(fā)出“不要吃我”的信號(hào),，從而壓制吞噬作用,。病基因RAS能夠促進(jìn)胰腺病細(xì)胞增殖，增強(qiáng)胞飲作用從而促進(jìn)一些病癥細(xì)胞攝取外泌體,。合成納米顆粒對(duì)細(xì)胞有一定毒性作用,，但使用外泌體能夠較小化對(duì)細(xì)胞的毒性。研究人員發(fā)現(xiàn),，CD47和病基因KRAS驅(qū)動(dòng)的胞飲作用都會(huì)壓制外泌體被循環(huán)系統(tǒng)的清理,，并增強(qiáng)胰腺病細(xì)胞對(duì)外泌體的特異性。所以,，外泌體的這種特性增強(qiáng)了它們通過遞送RNAi來特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力,，并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實(shí)驗(yàn)PDAC小鼠模型的總生存期。現(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有：...

外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷：近年來眾多文獻(xiàn)報(bào)道,，肺病細(xì)胞分泌的外泌體中富含多種蛋白質(zhì)并促進(jìn)肺病的發(fā)生的發(fā)展,，是早期診斷肺病的有效途徑。有研究發(fā)現(xiàn),，NSCLC患者肺組織外泌體表面EGFR免疫染色呈陽性的占80%,，而慢性肺炎組織的外泌體EGFR呈陽性的只占2%，因而認(rèn)為外泌體的EGFR蛋白可以用作NSCLC與慢性肺炎鑒別診斷的生物標(biāo)志物,。Park等通過Sys-BodyFlu-id數(shù)據(jù)庫分析發(fā)現(xiàn)153種特異性胸腔積液外泌體蛋白質(zhì),，進(jìn)一步的Westernblotting分析顯示多種特異性胸腔積液外泌體蛋白參與EGFR信號(hào)傳導(dǎo)途徑以促進(jìn)一些病癥的發(fā)生的發(fā)展，因此外泌體蛋白可能作為肺病診斷篩查的生物學(xué)標(biāo)...

外泌體項(xiàng)目獲批學(xué)科方向：從統(tǒng)計(jì)來看,，與前年相似外泌體立項(xiàng)集中的領(lǐng)域還是一些病癥學(xué)，近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在一些病癥的形成,，耐藥性,，檢測(cè)等方面有關(guān)。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer（IF=10.679）上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號(hào)通路在女性食管ai中促進(jìn)維持ai癥干細(xì)胞樣細(xì)胞的動(dòng)態(tài)平衡,。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch（IF=5.646）上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)p-STAT3可促進(jìn)結(jié)直腸ai細(xì)胞獲得性5-FU耐藥性,。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的...

外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體，可通過細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體,，內(nèi)涵體與細(xì)胞膜融合后釋放其中的小囊泡,。外泌體的直徑在40-110nm之間，其中包含RNA,、蛋白質(zhì),、microRNA、DN**段等多種物質(zhì),，存在于血液,、唾液、尿液,、腦脊液和母乳等多種體液中,。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史,，雖然較初被認(rèn)為可能是細(xì)胞的“垃圾”，所以才被排出來,，但是近年來研究表明外泌體具有功能活性并可進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞,。如今，研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中,、一些病癥細(xì)胞發(fā)生的發(fā)展,、神經(jīng)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中都發(fā)揮著重要作用。專利申請(qǐng)利用分離培養(yǎng)人尿液來源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基來進(jìn)行體外培養(yǎng),。外泌體...

聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集細(xì)菌，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,，其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān),。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性）,，顆粒大小不均一,，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等,，因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑,。外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如CD63、CD9蛋白）,，用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,，即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高,、操作簡(jiǎn)便,、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn)，但是效率低,，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,，不利于下游實(shí)驗(yàn)，難以普遍普...

如果您正在或者準(zhǔn)備或者計(jì)劃開展外泌體研究,，歡迎加入我們的外泌體小課堂,。首先，來個(gè)自我介紹：(實(shí)物照)品牌背景FUJIFILMWako前身為和光純藥株式會(huì)社,，企業(yè),，也是全球前列的試劑供應(yīng)商，在歐美都設(shè)有分公司,。自成立以來一直致力于的試劑生產(chǎn)與開發(fā),，并獲得ISO9001、ISO/IEC17025、ISO14000等多項(xiàng)國際認(rèn)證,。2017年被大佬FUJIFILMGroup（富士膠片集團(tuán)）斥收購（你沒看錯(cuò),，就是做相機(jī)、膠卷的那個(gè)富士）,，更名為富士フイルム和光純薬株式會(huì)社（FUJIFILMWako）,。外泌體提取試劑盒是FUJIFILMWako的明星產(chǎn)品哦，有關(guān)外泌體,、如何成功獲取高質(zhì)量的外泌體等問題,，請(qǐng)...

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn),，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升,。此外，還有研究表明,，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率,。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn)，NY-ESO-1是其中對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物,。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表...

外泌體在肺病進(jìn)程中的作用：肺病細(xì)胞來源外泌體（LCC-exosome）可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進(jìn)一些病癥的生長(zhǎng),。據(jù)相關(guān)報(bào)道稱,，LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進(jìn)一些病癥血管的生成,；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動(dòng)脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進(jìn)肺病的生血管作用,。此外，有研究發(fā)現(xiàn),，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）,。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達(dá)增加，促使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT,，從而使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖，遷移能力,。色譜法,。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小...

人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體，包括內(nèi)皮細(xì)胞,、免疫細(xì)胞,、血小板、平滑肌細(xì)胞等,。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),，外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性,。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,，進(jìn)而靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,，剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，從而細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細(xì)胞膜上未能檢測(cè)出,。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì),、mRNA以及microRNA外泌體（Exosome）發(fā)現(xiàn)于1986...

外泌體可通過流式,、WB（檢測(cè)指標(biāo)有CD9,CD63,CD81）、電鏡觀察,、NTA粒徑追蹤等手段檢測(cè),，普遍應(yīng)用于藥物載體、疾病診斷marker,、精細(xì)醫(yī)療,、一些病癥治病等方面研究。由于外泌體直徑小,，樣本含量低,，提取十分困難。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心,、超濾離心法,、免疫磁珠抗體捕獲、商用試劑盒等,。但到目前為止,，仍沒有一種提取方法能同時(shí)保證外泌體的含量、純度以及生物活性,。外泌體是細(xì)胞間進(jìn)行物質(zhì)運(yùn)輸和信息交流的重要工具,，可以通過調(diào)節(jié)免疫功能促進(jìn)一些病癥的增殖，血管新生和一些病癥轉(zhuǎn)移,。與細(xì)菌傳染,，幫助細(xì)菌逃避免疫關(guān)系很大，并與心血管疾病,，老年癡呆等疾病具有密切關(guān)系,。通過過濾膜對(duì)上述體液樣本進(jìn)行過濾...

用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng)：1、選擇血清還是血漿,？推薦大多數(shù)研究選擇血漿,。血液凝固過程中血小板會(huì)產(chǎn)生大量外泌體，含量占血清中外泌體的50%以上，選擇血漿可避免不必要的影響,。2,、注意抗凝劑的選擇。肝素類抗凝劑與PCR假陰性有關(guān),，這可能是因?yàn)楦嗡嘏c引物和/或酶有競(jìng)爭(zhēng)作用,。除了克制PCR，肝素可以與外泌體結(jié)合,，阻止細(xì)胞攝取外泌體,。因此需要記錄肝素類藥物的患者的血液樣本。EDTA和雙嘧達(dá)莫（CTAD）,，CTAD可以阻止血小板的并克制其釋放外泌體,。EDTA可能會(huì)干擾PCR反應(yīng)（盡管其程度小于肝素），但是還是優(yōu)于其他選擇,。此外,，有研究表明鈣螯合劑可在體外促進(jìn)外泌體與血小板的結(jié)合從而降低經(jīng)EDTA、或...

研究初次發(fā)現(xiàn)瘧原蟲傳染小鼠血漿外泌體(exosomes)能夠壓制一些病癥血管生成,，并初步闡明其分子機(jī)制,。研究加深了對(duì)瘧原蟲傳染宿主所分泌的外泌體與一些病癥血管生成之間的相互作用的認(rèn)識(shí)，為開發(fā)瘧原蟲傳染來源的外泌體作為一種新型抗一些病癥制劑奠定了基礎(chǔ),。研究人員選用肺病小鼠模型作為研究對(duì)象,，從傳染瘧原蟲的小鼠血漿中獲得外泌體，并將這些外泌體注射到小鼠的一些病癥內(nèi)部,，并與沒有瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體進(jìn)行對(duì)照,。研究發(fā)現(xiàn)，瘧原蟲傳染小鼠的血漿外泌體明顯壓制一些病癥血管的生成,。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn),，瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體通過至少四種特殊的微小RNA(miR16-5p/17-5p/322-5p/497-5...

外泌體項(xiàng)目獲批學(xué)科方向：從統(tǒng)計(jì)來看，與前年相似外泌體立項(xiàng)集中的領(lǐng)域還是一些病癥學(xué),，近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在一些病癥的形成,，耐藥性，檢測(cè)等方面有關(guān),。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer（IF=10.679）上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號(hào)通路在女性食管ai中促進(jìn)維持ai癥干細(xì)胞樣細(xì)胞的動(dòng)態(tài)平衡,。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch（IF=5.646）上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)p-STAT3可促進(jìn)結(jié)直腸ai細(xì)胞獲得性5-FU耐藥性。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的...

外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),，現(xiàn)今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。1983年,，外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,，且外泌體天然存在于體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、腦脊液和乳汁中。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究,。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細(xì)胞間通訊,，對(duì)外泌體的研究興趣日益增...

外泌體項(xiàng)目獲批學(xué)科方向：從統(tǒng)計(jì)來看,，與前年相似外泌體立項(xiàng)集中的領(lǐng)域還是一些病癥學(xué)，近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在一些病癥的形成,，耐藥性,，檢測(cè)等方面有關(guān)。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer（IF=10.679）上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號(hào)通路在女性食管ai中促進(jìn)維持ai癥干細(xì)胞樣細(xì)胞的動(dòng)態(tài)平衡,。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch（IF=5.646）上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)p-STAT3可促進(jìn)結(jié)直腸ai細(xì)胞獲得性5-FU耐藥性,。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的...

外泌體鑒定：外泌體分離之后，需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體,。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物,，多角度進(jìn)行鑒定。l透射電鏡鑒定法：簡(jiǎn)稱TEM,，適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察,，即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法：簡(jiǎn)稱NTA,，該方法能保證外泌體原始狀態(tài),、檢測(cè)速度快，檢測(cè)后能提供外泌體粒徑和濃度信息,。lWesternblot分子標(biāo)志物檢測(cè)：外泌體標(biāo)志蛋白包括四跨膜蛋白家族,，如CD9、CD63和CD81,；細(xì)胞質(zhì)蛋白,，如肌動(dòng)蛋白（Actin）和鈣磷脂結(jié)合蛋白（Annexins）；將人尿液來源細(xì)胞的培養(yǎng)基通過0.22微米濾膜過濾,，以去除大的細(xì)胞殘片以及其它雜質(zhì),。金華外泌體提取...

外泌體（Exosome）是細(xì)胞主動(dòng)分泌的囊泡樣小體,，大小均一，直徑30-200nm,，密度1.10-1.18g/ml,，來源普遍，幾乎所有細(xì)胞都可分泌,，在血液,，尿液，唾液,，腦脊液,，腹水，乳汁等體液中普遍分布,。外泌體較早在1986年發(fā)現(xiàn)于培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中,。1996年，研究者發(fā)現(xiàn)外泌體作為抗原呈遞因子參與T細(xì)胞依賴的抗一些病癥反應(yīng),，開啟了外泌體蛋白研究的新天地,。2013年諾貝爾生物/醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)解答了細(xì)胞如何組織其內(nèi)部較重要的運(yùn)輸系統(tǒng)之一——囊泡傳輸系統(tǒng)的奧秘。近年來,，隨著人們對(duì)外泌體的研究和認(rèn)識(shí)加深,。無錫正規(guī)外泌體提取試劑直銷價(jià)在這項(xiàng)新的研究中，經(jīng)過基因修飾的外泌體（被稱作iExosome）能夠運(yùn)...

研究初次發(fā)現(xiàn)瘧原蟲傳染小鼠血漿外泌體(exosomes)能夠壓制一些病癥血管生成,，并初步闡明其分子機(jī)制,。研究加深了對(duì)瘧原蟲傳染宿主所分泌的外泌體與一些病癥血管生成之間的相互作用的認(rèn)識(shí)，為開發(fā)瘧原蟲傳染來源的外泌體作為一種新型抗一些病癥制劑奠定了基礎(chǔ),。研究人員選用肺病小鼠模型作為研究對(duì)象,，從傳染瘧原蟲的小鼠血漿中獲得外泌體，并將這些外泌體注射到小鼠的一些病癥內(nèi)部,，并與沒有瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體進(jìn)行對(duì)照,。研究發(fā)現(xiàn)，瘧原蟲傳染小鼠的血漿外泌體明顯壓制一些病癥血管的生成,。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn),，瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體通過至少四種特殊的微小RNA(miR16-5p/17-5p/322-5p/497-5...

外泌體的提取、分離方法：免疫親和層析法,。免疫親和層析法是利用生物體內(nèi)存在的抗原,、抗體之間高度特異性的親和力進(jìn)行分離的方法，主要用于生物大分子的分離,、純化,。將其應(yīng)用于外泌體的分離主要是借助外泌體表面的特異性抗體，如TSG101或四跨膜蛋白,。此方法的原理是利用抗原抗體的特異性結(jié)合,，只有囊泡表面有特異性的抗體才可以被識(shí)別,，這使得提取的外泌體純度高，但是產(chǎn)量低,。Zarovni等分別用超速離心、密度梯度離心和免疫層析法,，從血漿和細(xì)胞上清中提取外泌體蛋白,，結(jié)果表明，免疫親和層析法得到的外泌體表面存在多種標(biāo)記蛋白(Alix,、CD9,、CD63)，同時(shí),，ELISA和PCR結(jié)果也證明了該方法的可行性,。外泌體提取：...

外泌體與肺病預(yù)后：外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子,。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn),，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外,，還有研究表明,，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn),，NY-ESO-1是其中對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物,。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA，其中l(wèi)et-7f,、miR-30e-3p和miR-20b表...

外泌體與肺病預(yù)后：在當(dāng)代精細(xì)醫(yī)療的大趨勢(shì)下,，外泌體的發(fā)現(xiàn)和研究為肺病的早期診斷和治病提供了嶄新的方向。外泌體在液體活檢中的巨大潛力可以為肺病患者的早期發(fā)現(xiàn)和早期診療提供可靠依據(jù),。根據(jù)一些病癥來源的外泌體在肺病的發(fā)生的發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移過程中的作用及相關(guān)機(jī)制的研究,，臨床醫(yī)療人員可以針對(duì)不同的患者制定較合適的治病方案，以達(dá)到改善肺病患者生存率,，延長(zhǎng)肺病患者生存時(shí)間的目的,。但是，針對(duì)外泌體的研究還存在諸多的問題有待廣大研究者解決,，如：外泌體的純化及標(biāo)記方法,、如何尋找外泌體的靶基因、外泌體的作用機(jī)制及信號(hào)通路等,?？偠灾饷隗w的研究有著廣闊的前景,，基于外泌體與肺病的研究,，有望研發(fā)出能夠應(yīng)用于肺病臨床診斷...

外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體,，可通過細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體，內(nèi)涵體與細(xì)胞膜融合后釋放其中的小囊泡,。外泌體的直徑在40-110nm之間,，其中包含RNA、蛋白質(zhì),、microRNA,、DN**段等多種物質(zhì)，存在于血液,、唾液,、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中,。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史,，雖然較初被認(rèn)為可能是細(xì)胞的“垃圾”，所以才被排出來,，但是近年來研究表明外泌體具有功能活性并可進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞,。如今，研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中,、一些病癥細(xì)胞發(fā)生的發(fā)展,、神經(jīng)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中都發(fā)揮著重要作用。專利申請(qǐng)利用分離培養(yǎng)人尿液來源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基來進(jìn)行體外培養(yǎng),。用于外...

外泌體的形成與鑒定：首先,，細(xì)胞膜內(nèi)陷形成一個(gè)杯狀結(jié)構(gòu)，包括細(xì)胞表面蛋白和與細(xì)胞外環(huán)境相關(guān)的可溶性蛋白,，導(dǎo)致早期胞內(nèi)體(early-sortingendosome,，ESE)的從頭形成，或者是杯狀結(jié)構(gòu)直接和已經(jīng)存在的ESEs融合,；trans-高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也能協(xié)助形成ESEs,。ESE成熟后形成晚期胞內(nèi)體(late-sortingendosomes，LSEs),，較終形成MVBs(也稱為多囊內(nèi)小體),。MVBs是通過endosome限制膜向內(nèi)凹(即質(zhì)膜雙凹)形成的，這一過程導(dǎo)致MVBs含有多個(gè)ILVs,。MVB可以與溶酶體或自噬體融合,，較終降解或與質(zhì)膜融合釋放作為外泌體的ILVs。外泌體表面蛋白包括四聚...

外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,，而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣,、硬件要求高、操作難度大,。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,，組分經(jīng)過優(yōu)化處理,，適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清,、血漿,、尿液及其他體液（腦脊液、腹水,、羊水,、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取，并搭配純化過濾裝置,，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項(xiàng)：1.對(duì)于待測(cè)樣品粘度過大時(shí),，可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進(jìn)行等體積稀釋處理,。2.當(dāng)血清、血漿,、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,，收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時(shí)，可用4℃預(yù)冷的1×PBS進(jìn)行稀釋后再通過EPF柱離心,。人尿液來源細(xì)胞的外泌體的獲取方法,，是首先分離培...

由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能，使得它具有潛在的應(yīng)用價(jià)值,，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo),，另一方面也可以作為治病手段，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床治病,。外泌體的分離純化一直是科研工作者關(guān)注的問題,，獲得高純度的外泌體對(duì)后續(xù)的研究至關(guān)重要。據(jù)了解,，目前人們多采用超速離心,、免疫磁珠、超濾,、沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離,。外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子）以及功能性的mRNAs,、miRNAs等生物活性物質(zhì),，在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊、細(xì)胞遷移,、促血管新生和抗一些病癥免疫等生理過程,，與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān)。外泌體提?。撼x法因操作簡(jiǎn)單,，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,。鄭...