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來源: 發(fā)布時間:2022-05-19

鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:兩組培養(yǎng)皿中,,隨著過氧化氫濃度的增高,均可見細胞凋亡狀態(tài)明顯加重,,細胞存活率及細胞內過氧化氫活力明顯下降,,細胞凋亡率及細胞內丙二醛水平明顯增高,Bcl-2/Bax比值明顯降低,,呈劑量依賴性,。而在相同濃度過氧化氫誘導下,與對照組相比,,實驗組細胞凋亡狀態(tài)明顯減弱,,細胞存活率、超氧化物歧化酶活力及Bcl-2/Bax比值增高,,細胞凋亡率和丙二醛水平明顯減低,。表明鼠尾膠原對過氧化氫所致的心肌細胞氧化損傷具有保護作用,其機制可能與提高超氧化物歧化酶活力,,減少丙二醛產(chǎn)生及提高Bcl-2的表達有關,。方法制作鼠尾膠原,觀察全細胞膜片鉗實驗中,,自制的鼠尾膠原對前庭毛細胞的貼壁黏附作用,。寧波正規(guī)鼠尾膠原進貨價

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鼠尾膠原備用膠凝程序:1)在冰上放置以下物品:膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水,、無菌1MNaOH,。2)確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3)在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I,。4)在無菌條件下執(zhí)行以下步驟,。4.1加入10×PBS(終體積/10)mL4.2計算要使用的膠原蛋白I的體積(不要添加到管中直到步驟4.6為止)終體積x終膠原蛋白I濃度(mg/mL)。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的膠原體積×0.023)mL的無菌冰冷1MNaOH,。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水:添加蒸餾水體積=V(終)—V(膠原蛋白)—V(10×PBS)—V(1MNaOH)4.5混合管中的物質并放入冰中,。4.6加入膠原蛋白I并計算體積,混勻,,冰上備用,。5)膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時。6)使用時,,無菌條件下將溶液加入到細胞培養(yǎng)裝置中37°C凝膠30min,。南昌鼠尾膠原推薦廠家鼠尾膠原蛋白的用途是什么:顧名思義,鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來的物質,。

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鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明:含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,,1mg/ml三維膠為例):準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞,并放置于冰浴中,。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結),立即混勻,。再加入23ul10×PBS或10×培養(yǎng)液,,混勻(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,,初次使用時需要用pH試紙測試),。加入760ul的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,,加入適當體積的細胞培養(yǎng)液,轉移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

鼠尾膠原:1實驗制備:實驗設備及材料:大鼠尾巴,、剪刀、鑷子,、止血鉗,、彎頭吸管、平皿,、三角燒瓶,、燒杯、量筒,、天平,、生理鹽水、75%酒精,、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆,、鼠尾膠原。實驗內容:1,、制備鼠尾膠原(兩個同學一組操作),。2、切割小玻片,。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內。實驗步驟:制備鼠尾膠原:1,、取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘;2,、手持尾巴,,用止血鉗夾住鼠尾的較高,折斷尾骨后拉出尾腱,;3,、將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡,;4,、重復步驟2、3,,直至尾腱量夠用,;5、吸去生理鹽水,,將尾腱稱重(0.5-1克),。利用鼠尾Ⅰ型膠原構建與人類自體骨組織化學成分和分子結構相近的仿生骨材料。

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膠原蛋白是脊椎動物和無脊椎動物支持結構的主要組成,。在人的身體中這是皮膚,、筋、軟骨,、骨骼及結締組織的較主要的蛋白質,。膠原蛋白占人體蛋白質總量的三分之一,不論來源于哪一種動物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,,有脯氨酸和羥脯氨酸,。根據(jù)其遺傳分子結構遺傳基因的差別,膠原蛋白分為20幾個亞型,。但較為常見的為Ι,、Π、ΙΙΙ型膠原蛋白,,即間質膠原蛋白,。其中I型較為豐富且品質優(yōu)良。將尾腱剪斷置于平皿中,,生理鹽水浸泡,。溫州長沙鼠尾膠原

鼠尾膠原醋酸溶解:按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。寧波正規(guī)鼠尾膠原進貨價

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,,pH左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和,。需要的溶液(均需要無菌,、預冷)10mg/L酚紅用于pH指示)0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),,雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,,加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結)立即混勻,。再加入100ul10PBS10培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,,初次使用時需要用pH試紙測試),。寧波正規(guī)鼠尾膠原進貨價