膠原蛋白的功效與作用:1、膠原蛋白中含有大量甘氨酸,,在人體內(nèi)不僅參與合成膠原,,而且還是大腦細胞中是一種克制性遞質(zhì),以產(chǎn)生對的安靜作用,,對焦慮癥,、神經(jīng)衰弱等有良好的治好作用膠原蛋白食品,在胃里可以克制蛋白質(zhì)因胃酸作用引起的凝聚作用,,從而有利于食物的消化,還有克制胃酸和胃原酶分泌的作用,,可減輕胃潰瘍患者疼痛,,促進胃潰瘍愈合。2,、膠原蛋白是身體免疫作用中負責重要功能的阿米巴細胞清掃異物的感知器,,因此對預防疾病很有幫助??商岣呙庖邫C能,、克制細胞、活化細胞機能,、活化筋骨,、治好關(guān)節(jié)炎及酸痛。取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘,。溫州正規(guī)鼠尾膠原報價
詳細步驟如下:1.75%酒精浸泡大鼠尾巴30min;2.將尾巴剪開,、去掉皮毛,,并剪成小段(3cm左右),抽出銀色的尾鍵,;3.把剪碎的尾鍵置于150ml,,0.1%消過毒的醋酸中,4℃放置,,并不時振蕩,;4.48h后取上清,4000轉(zhuǎn)離心30min后,,取上清,;5.分裝上清(鼠尾膠)4度(或-20度)保存,。有時可繼續(xù)向4。中沉淀中加入10-20ml醋酸,,重復以上步驟,,以制備更多的鼠尾膠。在使用時,,先將冰存的膠原液在室溫下解凍,,再按以下步驟包被培養(yǎng)器皿:1)用吸管吸取膠原液,在無菌的培養(yǎng)器皿的生長面內(nèi)壁上均勻地涂上薄薄的一層膠原溶液,。2)若包被的是培養(yǎng)瓶,,可向培養(yǎng)瓶通入氨氣或用浸有氨水的棉球封口片刻。讓氨氣充入瓶內(nèi)后,,即可旋緊瓶蓋或塞緊瓶塞,。若為培養(yǎng)皿或板的話,可將培養(yǎng)皿或板放在已消毒的飯盒內(nèi),,將浸有氨水的棉球放入飯盒內(nèi),,蓋緊飯盒蓋,四周用封口膠封死,。徐州正規(guī)鼠尾膠原廠家I型膠原蛋白分布非常普遍,,是主纖維束的主要成分。
利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,。方法通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白,,并重構(gòu)成膠原纖維。然后,,將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2~6d,,通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。結(jié)果酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維,,并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu),。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示:礦化2d后,羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,,膠原纖維部分礦化,;礦化6d后,膠原纖維內(nèi)部完全礦化,,形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料,。結(jié)論利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維,經(jīng)礦化可形成與人類自體骨組織化學成分和分子結(jié)構(gòu)一致的仿生骨材料,。
鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用:膠原蛋白具有抗氧化作用,,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構(gòu)建,對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用,。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實驗組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,,并且均用0,10,,100μmol/LH2O2誘導,。24h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態(tài),,應用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態(tài),流式細胞技術(shù)檢測心肌細胞凋亡率,,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax,、Bcl-2的表達,。制備鼠尾膠原(兩個同學一組操作)。
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明:不含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,,1mg/ml三維膠為例):將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,,加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻,。再加入100ul10×PBS或10×培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,,初次使用時需要用pH試紙測試),。將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi),。如果配制中使用的是10×PBS,,使用前需要加入適當體積的細胞培養(yǎng)液預平衡。使用前需要加入適當體積的細胞培養(yǎng)液預平衡,。開封正規(guī)鼠尾膠原單價
用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL,。溫州正規(guī)鼠尾膠原報價
以鼠尾膠原為支架的類似物的建立:探尋建立類似物的培養(yǎng)方法。方法:原代培養(yǎng)人皮膚成纖維細胞,,制備鼠尾膠原,,將鼠尾膠原溶液、濃縮培養(yǎng)基,、NaOH溶液和以血清重懸的成纖維細胞溶液在適當?shù)谋壤禄旌虾笮纬赡z構(gòu)建類似物,。結(jié)果:形成的類似物中成纖維細胞生長狀態(tài)良好,并且組織塊具有一定彈性和抗拉伸能力,。結(jié)論:①利用鼠尾膠原可以構(gòu)建類似物,,該模型是進行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復合皮的關(guān)鍵與基礎(chǔ),;②成纖維細胞膠原凝膠復合物有著良好的生物學特性,它是研究成纖維細胞與細胞外基質(zhì)之間以及細胞之間相互作用的良好模型,。溫州正規(guī)鼠尾膠原報價