通用細(xì)胞凍存液(無血清)的簡介：隨著實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展,，除了原代培養(yǎng)之外,，人工開發(fā)出來的細(xì)胞系的保存越來越重要。細(xì)胞冷凍的原理在于盡可能降低細(xì)胞內(nèi)的晶體形成,，減少細(xì)胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對細(xì)胞造成的低溫?fù)p傷,，從提高細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的存活率。細(xì)胞凍存的數(shù)量應(yīng)保證復(fù)蘇時(shí)低溫保護(hù)劑獲得稀釋,，稀釋后的細(xì)胞濃度扔高于正常傳代的細(xì)胞濃度為宜,，這是因?yàn)楫?dāng)?shù)蜏乇Ｗo(hù)劑稀釋以后，該濃度一般不會對細(xì)胞造成毒性損傷,。通用細(xì)胞凍存液(無血清)主要由培養(yǎng)基,、DMSO等組成，不含血清,，是一種經(jīng)典的無菌凍存液,。用于各種哺乳動物原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞系,、雜交瘤細(xì)胞等的凍存,。1000 rmp離心5分鐘，去除離心管中的上清液,，收集細(xì)胞沉淀,。寧波開封無血清細(xì)胞凍存液

無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)點(diǎn)有哪些呢：很多所使用的傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液的成份主要是：新鮮的培養(yǎng)基，其中含有10%的胎牛血清和5-10%的DMSO,。凍存的方法：將冷凍管置于4℃條件喜愛10分鐘,，接著在-20℃的條件下30分鐘，-80℃的條件下保存16-18個小時(shí)（或隔夜保存也可以）,，較后再液氮的環(huán)境中進(jìn)行長期的儲存,。需要注意在-20℃的環(huán)境下保存不可超過1個小時(shí)，主要用以防止冰晶產(chǎn)生過大,，造成細(xì)胞大量的死亡,。對于無血清的細(xì)胞凍存液來說，其所含有的成分是：不含血清,，含DMSO,、pH調(diào)節(jié)劑、葡萄糖等各種細(xì)胞營養(yǎng)成分等,。其中不含有動物來源性的蛋白,，所以能夠減少各類的細(xì)菌、霉菌,、支原體等帶來的污染,，而且可以確保凍存細(xì)胞的安全,。比較通用于各種動物的細(xì)胞株。溫州正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液廠家推薦無血清凍存液特性：適合各種動物細(xì)胞,。

細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一,。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,，這樣在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn),。細(xì)胞凍存的原理：細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以較大限度的保存細(xì)胞活力,。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。

以前在另一家實(shí)驗(yàn)室的時(shí)候,，凍存細(xì)胞根本就沒有講究這些標(biāo)準(zhǔn)操作,。凍存的細(xì)胞有293T、PT67,、C2C12,、MEF(鼠胚胎成纖維細(xì)胞）、HelaS3,、HelaD,、U2OS、HKC,、RK3E,、ECO、H292,、HSY,、COS7、SupT1等,。將細(xì)胞酶消化后直接參與離心，加入凍存液（含90%的血清和10%的DMS0),，直接放在-80℃冰箱,。兩三天后移入液氮中，較久保存,，幾年后細(xì)胞的活力仍沒有什么受損,，照常能復(fù)蘇,，成活率高。但有三點(diǎn)須注意：（1）一是細(xì)胞的生長狀態(tài)要好,，不能長得過稀,，同樣也不能過密，細(xì)胞的狀態(tài)看起來相當(dāng)健康,。70%密度的要保存的細(xì)胞須再長24h才能全滿,，萬一細(xì)胞狀態(tài)不好，可以酶消化后再繁殖一次,；（2）凍存細(xì)胞的量要留心,，不能太密也不能太稀，一般1OOmm培養(yǎng)皿的細(xì)胞凍存為3~4管,；（3）存放在-80℃冰箱的時(shí)間不能過長,，一兩天后轉(zhuǎn)移到液氮罐里。我們也曾取出存放在-80℃冰箱的細(xì)胞,，半年還有30%~50%的細(xì)胞有活性,，但一年的細(xì)胞就沒有活的。無血清細(xì)胞凍存液使用方法：選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率,。

無血清細(xì)胞凍存液：1.逐滴加入5-7mL的預(yù)熱的培養(yǎng)基到15mL的離心管中,，加入的同時(shí)輕輕混勻。2.室溫（15-25°C）以300xg離心5分鐘,。3.吸出培養(yǎng)基,，使細(xì)胞沉淀完好無損。使用2mL血清移液管輕輕將細(xì)胞沉淀重懸于1mL的培養(yǎng)基中,。小心保持細(xì)胞作為聚集體,。4.將0.5mL的細(xì)胞混合物轉(zhuǎn)移到含有培養(yǎng)基的預(yù)包被的6孔板的培養(yǎng)孔中（例如，每個冷凍管可以鋪板兩個孔）,。注意：鋪板多少孔可能需要根據(jù)凍存的細(xì)胞聚集體數(shù)量進(jìn)行調(diào)整,。通常在復(fù)蘇后，要比在常規(guī)的傳代鋪板更多的細(xì)胞聚集體數(shù)量,。將培養(yǎng)板放入37°C培養(yǎng)箱,。快速前后左右的搖晃培養(yǎng)板數(shù)次,，將細(xì)胞聚集體分布均勻,。24小時(shí)內(nèi)不要移動培養(yǎng)板。無血清細(xì)胞凍存液：降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,，減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,。杭州無血清細(xì)胞凍存液單價(jià)

在凍存細(xì)胞時(shí)將細(xì)胞懸浮于凍存液中，可使冰點(diǎn)降低，提高細(xì)胞膜對水的通透性,。寧波開封無血清細(xì)胞凍存液

無血清細(xì)胞凍存液通用于各種動物細(xì)胞株（tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞）,，大部分的干細(xì)胞，凍存細(xì)胞可在-80℃長期保存,。不含動物源性蛋白,，不含血清成分，可有效減少各類細(xì)菌,、病毒和支原體等污染,，保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO,、葡萄糖等各種細(xì)胞營養(yǎng)成分,，提高細(xì)胞存活率和活力，亦適合于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞,。產(chǎn)品優(yōu)勢：1,、無需程序性降溫，可直接將細(xì)胞置于-80℃凍存,，凍存液無需稀釋,。2、細(xì)胞可于-80℃長期保存,。3,、凍存液不含血清等，較大降低細(xì)胞污染的可能性,。保存方法：冰袋運(yùn)輸,，4℃保存，保質(zhì)期一年,。寧波開封無血清細(xì)胞凍存液

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