可以。為了能夠高效提取細(xì)胞培養(yǎng)上清中的外泌體,磁珠可重復(fù)使用5次(同一樣品)。試劑盒里的緩沖液含5次提取需要的量。1mL體積以上細(xì)胞上清樣本建議進(jìn)行濃縮后再回收,,提取時可進(jìn)行反復(fù)抽提,提高提取效率,。用血液樣品進(jìn)行實驗時,,需要根據(jù)磁珠狀況來判斷是否能重復(fù)利用;若磁珠發(fā)生聚集,,利用渦旋儀也無法使磁珠分散,,不建議繼續(xù)使用,。詳情參考操作說明書。太好了,,這樣實驗成本瞬間就降下來了,,那樣品純化所需的比較低量是?老師:使用旋轉(zhuǎn)器的需要500μL以上,,使用離心管混合器的需要100μL,。樣品量更少的情況下加TBS到所需比較低量后再使用ExosomeCapture固定化磁珠。同學(xué):電鏡分析需要外泌體的量是多少,?外泌體提?。壕哂懈哒扯鹊纳飿悠贰J徍?guī)外泌體提取試劑服務(wù)電話
外泌體(exosome),,特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?,F(xiàn)已證實可以分泌外泌體的細(xì)胞有:肥大細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞,、瘤細(xì)胞,、間充質(zhì)干細(xì)胞等。外泌體在免疫中抗原呈遞,、瘤的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用,。同時,,不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物,。細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì),、mRNA、miRNA和脂質(zhì)運輸來完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介,,根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類,,包括外泌體、微泡和凋亡小體,。其中,,外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡,由多種細(xì)胞分泌,,內(nèi)含有特定的蛋白質(zhì),、脂質(zhì)、細(xì)胞因子或遺傳物質(zhì),。來源于不同的組織的外泌體不光具有其特異性蛋白分子,,而且還包含其行使功能的關(guān)鍵分子南京正規(guī)外泌體提取試劑直銷廠家近幾年來,,市場上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒。
PS不是你想有,,想有就能有,,迄今為止所發(fā)現(xiàn)的外泌體,并非所有的外膜表面都暴露PS,。例如,,細(xì)菌來源的外泌體膜表面沒有PS,因此,,本款試劑不能提取這種外泌體?,F(xiàn)在的研究尚未得知是否所有的外泌體上都會露出PS,但是上述的外泌體標(biāo)記根據(jù)細(xì)胞種類不同表現(xiàn)出的信號強(qiáng)弱差大,,通過利用本試劑盒PS親和法捕捉,、提取外泌體是較好的方法。:這個MagCapture?ExosomeIsolationKitPS,,1次提取的外泌體量大概是多少,?實驗樣品的種類和體積不同,提取的外泌體量也不一樣,。Wako的操作實例中,,一次提取操作可獲得蛋白量約30μg/mL(BCA法檢測),粒子數(shù)1~2×1010(NanoSightLM10檢測)(經(jīng)莫能菌素鈉刺激外泌體分泌的K562培養(yǎng)上清5mL濃縮為1mL后,,對其進(jìn)行提?。A硗?,和光驗證了從1mL正常人混合血清提取一次,,可回收約34μg/mL蛋白質(zhì)(BCA法檢測),約5×109/mL的粒子數(shù)(NanoSightLM10檢測),。本試劑盒終可獲得100μL的洗脫液,。
1983年,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),,1987年Johnstone將其命名為“exosome”,。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,且外泌體天然存在于體液中,,包括血液,、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中,。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,,參與細(xì)胞間通訊,,對外泌體的研究興趣日益增長,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā),。如何高效地提取外泌體是實現(xiàn)這項新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵,。外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢:適用于多種物種。
外泌體與免疫系統(tǒng):不同的細(xì)胞來源的外泌體,,包括免疫細(xì)胞(B細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞),、病細(xì)胞、上皮細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞,,釋放出帶有載體的外泌體,,可影響先天免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中受體細(xì)胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細(xì)胞可直接或間接地受到外泌體的影響,,刺激或壓制其增殖和功能,。外泌體與代謝性和心血管疾病:外泌體可以通過攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發(fā)生的發(fā)展過程中起作用,。體外培養(yǎng)心血管疾病的細(xì)胞收集的外泌體與疾病相關(guān)的代謝適應(yīng)有關(guān),;體外培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞的外泌體具有保護(hù)心血管的作用。外泌體提?。焊咚匐x心以消除更大的囊泡,。金華外泌體提取試劑廠家直銷
是一種用于一些病癥診斷和預(yù)后監(jiān)測的非常理想的新型生物標(biāo)記物一些疾病的早期診斷。蕪湖正規(guī)外泌體提取試劑服務(wù)電話
外泌體與神經(jīng)退行性疾?。和饷隗w可能促進(jìn)或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質(zhì)的聚集,。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測到Tau和Aβ蛋白。類似的現(xiàn)象也在PD和ALS疾病中發(fā)現(xiàn),。PD病人腦脊液外泌體可檢測到α-synuclein,ALS病人外泌體中也可以檢測到SOD1或TDP-43,。外泌體與疾病診斷(應(yīng)用潛能):外泌體生成機(jī)制表明,,通過分析外泌體的組分,可以幫助識別其來源的細(xì)胞類型,。這一特性已被應(yīng)用于開發(fā)心血管疾病,,神經(jīng)系統(tǒng)疾病和一些病癥的分子診斷方法,也在肝腎肺相關(guān)疾病中進(jìn)行研發(fā)測試,。將沉淀物用PBS緩沖液進(jìn)行懸浮,,使外泌體懸浮于液體上層。蕪湖正規(guī)外泌體提取試劑服務(wù)電話