外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,，而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣,、硬件要求高,、操作難度大,。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,，組分經(jīng)過優(yōu)化處理,，適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清,、血漿,、尿液及其他體液（腦脊液、腹水,、羊水,、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取，并搭配純化過濾裝置,，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒,。注意事項(xiàng)：1.對(duì)于待測(cè)樣品粘度過大時(shí)，可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進(jìn)行等體積稀釋處理,。2.當(dāng)血清,、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,，收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時(shí),，可用4℃預(yù)冷的1×PBS進(jìn)行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對(duì)外泌體標(biāo)志蛋白（CD63,CD9,CD81等）進(jìn)行Westernblot檢測(cè),，可以鑒定所提的外泌體,。通過超速離心(120000g/分鐘)20小時(shí)以上才能獲得足夠的外泌體量外泌體提取：可分離到大小相近的囊泡顆粒,。廈門外泌體提取試劑推薦廠家

外泌體的提取,、分離方法：開發(fā)高效、快速,、穩(wěn)定,，并且保持外泌體結(jié)構(gòu)和生物功能完整性的方法，是目前外泌體應(yīng)用于臨床的基礎(chǔ)和前提。從細(xì)胞上清和體液中提取分離外泌體的方法很多,，但是外泌體的純度和產(chǎn)量卻和分離方法息息相關(guān)。通常分離步驟少,、產(chǎn)率高,，但是純度會(huì)受到影響。鑒于每種分離方法都有其優(yōu)缺點(diǎn),，實(shí)驗(yàn)可以根據(jù)樣本來源,、下游實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡龋x擇合適的外泌體分離方法,。2015年,，國際囊泡組織(InternationSocietyforExtracelluarVesicles,ISEV)指出，簡(jiǎn)單依靠一種分離方法得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都難滿足實(shí)驗(yàn)的需求,。因此,，推薦聯(lián)合使用各種方法，從而得到高純度和高產(chǎn)量的外泌體,。寧波正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,，使得它具有潛在的應(yīng)用價(jià)值，可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo),。

外泌體相關(guān)技術(shù)在過去幾年一直在快速發(fā)展,，預(yù)計(jì)市場(chǎng)將大幅增長(zhǎng)，因?yàn)樗鼈兛杀粦?yīng)用到液體活檢,、精細(xì)醫(yī)學(xué)和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,。特別是，一些疾病衍生的外泌體通過調(diào)節(jié)血管生成,、轉(zhuǎn)移和免疫來影響細(xì)胞的侵襲性,，使其成為用于一些疾病檢測(cè)、診斷和治病選擇的極其有用的生物標(biāo)志物來源,。在風(fēng)險(xiǎn)投資方面,，有很多市場(chǎng)活動(dòng)。2016年1月,，ExosomeDiagnostics公司在B輪融資中獲得6000萬美元資金,，并于2017年7月獲得3000萬美元的C輪融資。同樣,，CodiakBiosciences公司于2016年由MDAnderson一些疾病中心與兩家風(fēng)險(xiǎn)投資公司共同成立,，以8000多萬美元的A和B輪融資成立該公司。2017年11月29日,，CodiakBioSciences公司又增加了7650萬美元的C輪融資,。在整個(gè)A、B和C輪融資中，CodiakBioSciences公司募集了驚人的1.685億美元,。

當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),，外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸,、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性,。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合，進(jìn)而啟動(dòng)靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,，從而啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細(xì)胞膜上未能檢測(cè)出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,，非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì),、mRNA以及microRNA。人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,，包括內(nèi)皮細(xì)胞,、免疫細(xì)胞、血小板,、平滑肌細(xì)胞等,。超離法是較常用的外泌體純化手段，采用低速離心,、高速離心交替進(jìn)行,，可分離到大小相近的囊泡顆粒。

外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),，現(xiàn)今,，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年,，外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,，且外泌體天然存在于體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、腦脊液和乳汁中,。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究,。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,，參與細(xì)胞間通訊，對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng),，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā),。是一種用于一些病癥診斷和預(yù)后監(jiān)測(cè)的非常理想的新型生物標(biāo)記物一些疾病的早期診斷。寧波正規(guī)外泌體提取試劑生產(chǎn)廠家

外泌體提?。夯诰酆衔锏某恋砑夹g(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合,。廈門外泌體提取試劑推薦廠家

外泌體在肺病進(jìn)程中的作用：在一些病癥微環(huán)境中,，一些病癥細(xì)胞來源的外泌體能夠誘導(dǎo)CD4+T分化為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞,，壓制機(jī)體的抗一些病癥免疫反應(yīng)；肺病細(xì)胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a,，可在免疫細(xì)胞中結(jié)合并啟動(dòng)TLR8,，使TLR介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路活化，從而導(dǎo)致一些病癥的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移,。在肺病的侵襲和轉(zhuǎn)移過程中,，細(xì)胞間通訊扮演著重要的角色。據(jù)有關(guān)報(bào)道稱,，NSCLC分泌的外泌體內(nèi)TGFβ和IL10的高表達(dá)與肺病的轉(zhuǎn)移密切相關(guān),。此外，啟動(dòng)的T細(xì)胞可以通過調(diào)控Fas信號(hào)通路增加基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP9）的表達(dá),，進(jìn)而促進(jìn)肺病的轉(zhuǎn)移,。這些機(jī)制有望成為肺病治病的潛在靶點(diǎn)。雖然大多數(shù)外泌體都是促進(jìn)一些病癥的侵襲與轉(zhuǎn)移,，但也有報(bào)道稱,，外泌體miR-302b可以通過壓制TGFβRⅡ來壓制肺病細(xì)胞的轉(zhuǎn)移與增殖。如純度和回收率低,，雜蛋白較多（假陽性）,，顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物,。廈門外泌體提取試劑推薦廠家