鼠尾膠原備用膠凝程序:1)在冰上放置以下物品:膠原蛋白I,、無菌10×PBS,、無菌蒸餾水,、無菌1MNaOH,。2)確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積,。3)在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I,。4)在無菌條件下執(zhí)行以下步驟。4.1加入10×PBS(終體積/10)mL4.2計算要使用的膠原蛋白I的體積(不要添加到管中直到步驟4.6為止)終體積x終膠原蛋白I濃度(mg/mL),。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的膠原體積×0.023)mL的無菌冰冷1MNaOH,。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水:添加蒸餾水體積=V(終)—V(膠原蛋白)—V(10×PBS)—V(1MNaOH)4.5混合管中的物質(zhì)并放入冰中。4.6加入膠原蛋白I并計算體積,,混勻,,冰上備用。5)膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時,。6)使用時,,無菌條件下將溶液加入到細胞培養(yǎng)裝置中37°C凝膠30min,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,,并且制作簡便,,成本低廉。結(jié)論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,。鄭州鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
實驗應(yīng)用:探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細胞膜片鉗實驗中的促進毛細胞貼壁效果,。方法制作鼠尾膠原,觀察全細胞膜片鉗實驗中,,自制的鼠尾膠原對前庭毛細胞的貼壁黏附作用,。結(jié)果無鼠尾膠原時,前庭毛細胞懸浮于外液,,不宜封接,;有鼠尾膠原時,前庭毛細胞貼附于培養(yǎng)皿底壁,,易于封接和長時間(約8h)的觀察和記錄,。鼠尾膠原對前庭毛細胞具有良好的貼壁黏附促進作用。結(jié)論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,,并且制作簡便,成本低廉,。廈門鼠尾膠原哪里買將黏稠的膠體溶液進行高速冷凍離心處理,。
蘇州君欣生物科技有限公司鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑,可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,,特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng),;也可用于制備三維膠,,模擬真實的生長環(huán)境,,使細胞在三維環(huán)境中生長。不開玩笑的說,,本身高純度的鼠尾膠原蛋白是能吃的,。但是,實驗室里制備出來的各種材料和原材料都不應(yīng)該被食用,,實驗室也是禁食的,。這是傳說中的制作方法:面對大家都感興趣的知識,智圈始終抱著嚴謹且專業(yè)的態(tài)度,,決心找出科學(xué)的制作方法,。
對于生物科研汪們來說,大白鼠,、小白鼠們簡直渾身是寶,,從毛發(fā),、皮膚,到心肝脾肺,,甚至各種排泄物,,都是我們重要的研究對象。尾巴,,自然也是,。所以耗子尾汁不僅存在,甚至是我們生物實驗中必不可少的實驗材料和實驗對象,。有不少人靠「耗子尾汁」發(fā)了CNS和頂刊,。沒有「耗子尾汁」,很多課題可能都沒辦法開展,。在以小鼠為模式生物進行科學(xué)研究的實驗室中,,日常和基本的一個實驗就是提取它們的遺傳物質(zhì)—DNA(脫氧核糖核酸)進行基因型鑒定,檢測這些小動物的基因組中是否含有特定的DNA,??梢岳斫鉃榻o小動物做核酸檢測。堿法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰,、氫氧化鈉,、碳酸鈉等。
鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑,,可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,,特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠原凝膠,,使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長,。制備鼠尾膠原方法:1、取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘,;2、手持尾巴,,用止血鉗夾住鼠尾的較高,,折斷尾骨后拉出尾腱;3,、將尾腱剪斷置于平皿中,,生理鹽水浸泡;4,、重復(fù)步驟2,、3,直至尾腱量夠用,;5,、吸去生理鹽水,,將尾腱稱重(0.5-1克);6,、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,,轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中;7,、按每克尾腱50ml的比例,,加入0.1%醋酸溶液;8,、搖晃,,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期,;9,、離心,4000轉(zhuǎn)/分,,10-15分鐘,;10、吸取上清,,分裝成小瓶,,4℃保存。鼠尾膠原蛋白的用途很普遍,,可用于化妝品,,工業(yè)和食品生產(chǎn)等領(lǐng)域。南京北京鼠尾膠原
鼠尾膠原醋酸溶解:在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜,。鄭州鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨
鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,,pH7左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,,在成膠過程中需要加入0.06X體積的0.1mol/LNaOH來中和,。需要的溶液(均需要無菌、預(yù)冷):10xPBS(可含10mg/L的酚紅用于pH指示)或10x培養(yǎng)液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),雙蒸水不含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,,1mg/ml三維膠為例):將200ul生友鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,,加入690ulH2O,。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻,。再加入100ul10xPBS或10x培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,,初次使用時需要用pH試紙測試),。鄭州鼠尾膠原廠家現(xiàn)貨