鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：膠原蛋白具有抗氧化作用,，但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建，對(duì)于其抗氧化作用目前尚無(wú)相關(guān)研究,。目的：探討鼠尾膠原對(duì)過(guò)氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,。方法：將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿（實(shí)驗(yàn)組）和普通培養(yǎng)皿（對(duì)照組）中，并且均用0,，10,，100μmol/LH2O2誘導(dǎo)。24h后,，以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),，應(yīng)用MTT比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞存活率,，TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),，流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡率，黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶活力,，硫代巴比妥比色法檢測(cè)丙二醛水平,，Western-Blot檢測(cè)凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達(dá),。這種膠原蛋白在37℃的條件下會(huì)形成3股螺旋結(jié)構(gòu),，可以用來(lái)當(dāng)作細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)。蕪湖正規(guī)鼠尾膠原平均價(jià)格

鼠尾膠原醋酸溶解：1．將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,，制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動(dòng)或攪拌,。在2-8度中放置過(guò)夜,。在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過(guò)濾的方法無(wú)菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白,。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過(guò)夜,。5．從包被表面除去多余的液體,。過(guò)夜干燥。如果膠原溶液不是無(wú)菌的,，這時(shí)候可以在無(wú)菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過(guò)夜消毒,。在接種細(xì)胞前用無(wú)菌的水漂洗。蕪湖正規(guī)鼠尾膠原平均價(jià)格從包被表面除去多余的液體,。過(guò)夜干燥,。

鼠尾膠原實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：探討應(yīng)用鼠尾膠原在豚鼠前庭毛細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中的促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁效果。方法制作鼠尾膠原,，觀察全細(xì)胞膜片鉗實(shí)驗(yàn)中,，自制的鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞的貼壁黏附作用。結(jié)果無(wú)鼠尾膠原時(shí),，前庭毛細(xì)胞懸浮于外液,，不宜封接；有鼠尾膠原時(shí),，前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁,，易于封接和長(zhǎng)時(shí)間（約8h)的觀察和記錄。鼠尾膠原對(duì)前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用,。結(jié)論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄，并且制作簡(jiǎn)便,，成本低廉,。

一種基于鼠尾膠原蛋白：1.一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料，為鼠尾膠原蛋白,、聚乙烯醇,、殼聚糖、水制成的凍干止血材料,，各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?-10%0.2-5%0.2-2%,，余量為水。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,，其特征在于凍干止血材料中,，各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?%2%1%，余量的水,。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,，其特征在于鼠尾膠原蛋白來(lái)源于各品系SFP級(jí)大鼠鼠尾。制備鼠尾膠原：搖晃，使尾腱分散于醋酸溶液中,，4℃放置一星期,。

鼠尾膠原凝膠體在皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用：在國(guó)外的藥理,毒理和皮膚病學(xué)的研究領(lǐng)域中已得到的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細(xì)胞的材料和方法r1]實(shí)驗(yàn)材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細(xì)胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細(xì)胞的分離和細(xì)胞懸液的制備:2～3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細(xì)胞懸液,加入細(xì)胞培養(yǎng)液.用梯度離心收集細(xì)胞,以3xi0/m]濃度接種平皿.(3)鼠尾膠原凝膠體的制備:具體方法參見(jiàn)文獻(xiàn)c13o(4)培養(yǎng)皿的膠原鋪制:i.0ml的酸溶解膠原滴入~35mm培養(yǎng)皿中,鋪滿平皿底部;將平皿暴露于氨氣中30min,然后置空氣中30rain,散盡剩余氨氣。鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上,， pH 左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,。蕪湖正規(guī)鼠尾膠原廠家

制備鼠尾膠原：取大鼠尾巴洗凈，75%酒精浸泡5分鐘,。蕪湖正規(guī)鼠尾膠原平均價(jià)格

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法：膠原蛋白是脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物支持結(jié)構(gòu)的主要組成,。在人的身體中這是皮膚、筋,、軟骨,、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,，不論來(lái)源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性,。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸，有脯氨酸和羥脯氨酸,。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,，膠原蛋白分為20幾個(gè)亞型。但較為常見(jiàn)的為Ι,、Π,、ΙΙΙ型膠原蛋白，即間質(zhì)膠原蛋白,。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,。I型膠原蛋白分布非常普遍，是主纖維束的主要成分,，給結(jié)締組織以強(qiáng)度,；是較豐富的膠原蛋白類(lèi)型,，尤其是在皮膚真皮,、骨、筋和腱中,。蕪湖正規(guī)鼠尾膠原平均價(jià)格