鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明：含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升，1mg/ml三維膠為例）：準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞，并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻。再加入23ul 10×PBS或10×培養(yǎng)液,，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試),。加入760ul的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄，并且制作簡(jiǎn)便,，成本低廉,。鼠尾膠原，是一種細(xì)胞支持物,，它是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成份,。長(zhǎng)沙鼠尾膠原廠家推薦

鼠尾膠原醋酸溶解：1．將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中，制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解,。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動(dòng)或攪拌,。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白,。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過夜,。5．從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,，這時(shí)候可以在無菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。在接種細(xì)胞前用無菌的水漂洗。天津鼠尾膠原生產(chǎn)廠家鼠尾膠原醋酸溶解：在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解,。

含細(xì)胞的三維膠原的制備（以配制1毫升,，1mg/ml三維膠為例）：準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞，并放置于冰浴中,。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,，會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻,。再加入23ul 10xPBS或10x培養(yǎng)液,，混勻(混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試),。加入760ul的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

鼠尾膠原蛋白的用途是什么：顧名思義,，鼠尾膠原蛋白是從老鼠尾巴提取出來的物質(zhì)。膠原蛋白是一種蛋白質(zhì),，能幫助連接皮膚,，骨頭和肌腱等身體組織。鼠尾膠原蛋白的用途很普遍,，可用于化妝品,，工業(yè)和食品生產(chǎn)等領(lǐng)域。它在實(shí)驗(yàn)室中也有一定用途,，因?yàn)樗鼛缀跏羌兡z原蛋白,。在食品加工領(lǐng)域，鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中,。它還可以當(dāng)作酸奶,，冰淇淋，果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用,。在一些低脂肪食品中,，它用于模仿全脂食品的感覺和質(zhì)地。它還用于生產(chǎn)膳食保健品,，據(jù)說能讓手指甲和皮膚看起來更好,。此外,，還有基于膠原蛋白的保健品，可用于促進(jìn)關(guān)節(jié)健康,。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動(dòng)或攪拌。

鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,，其特征在于,，包括以下步驟: (1)將無組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,，真空冷凍干燥備用,； (2)凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至200?400目； (3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,，鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL,，期間不斷攪拌，防止凍結(jié)成塊,，得到膠原溶脹液,； (4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中，鼠尾腱與蛋白酶質(zhì)量比為50: I?100: 1,，在4°C,，48?74小時(shí)酶解，期間間歇性攪拌,。鼠尾膠原醋酸溶解：稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。開封正規(guī)鼠尾膠原

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鼠尾膠原包被培養(yǎng)板：胎干細(xì)胞在體外可誘導(dǎo)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞,進(jìn)而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細(xì)胞來源之一。目的:探討建立定向誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的方法,。方法:在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞H1,將H1細(xì)胞團(tuán)塊轉(zhuǎn)移到鼠尾膠原包被的培養(yǎng)板,貼壁24-48h后,培養(yǎng)基換為含不同輔助因子和內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑的EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基,。結(jié)果與結(jié)論:①在EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基誘導(dǎo)下,細(xì)胞逐步表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記基因VEGFR-2、PECAM1,、vWF,、CD34、VE-cadherin,、GATA-2,。②分化細(xì)胞表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記VE-cadherin、CD31,。③分化細(xì)胞具有吞噬低密度脂蛋白功能,。說明將人胚胎干細(xì)胞接種在鼠尾膠原包被培養(yǎng)板上,通過EGM-2內(nèi)皮培養(yǎng)體系誘導(dǎo),可直接分化為功能性血管內(nèi)皮細(xì)胞。為研究胞外基質(zhì)對(duì)誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的作用以及相關(guān)信號(hào)分子機(jī)制打下了基礎(chǔ),。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄，并且制作簡(jiǎn)便,，成本低廉,。長(zhǎng)沙鼠尾膠原廠家推薦