雙光子顯微鏡為什么穿透能力強(qiáng),？因?yàn)榻M織對(duì)可見(jiàn)光區(qū)域的較強(qiáng)吸收和散射帶來(lái)兩個(gè)嚴(yán)重的問(wèn)題第1個(gè)是激發(fā)光的減弱,，第2個(gè)就是另外就是由于物鏡本身光的光學(xué)特性，單光子激發(fā)的背景較強(qiáng)，所以才有共聚焦系統(tǒng)提高成像的分辨率因?yàn)榻M織對(duì)可見(jiàn)光區(qū)域的較強(qiáng)吸收和散射帶來(lái)兩個(gè)嚴(yán)重的問(wèn)題第1個(gè)是激發(fā)光的減弱,，第2個(gè)就是另外就是由于物鏡本身光的光學(xué)特性,，單光子激發(fā)的背景較強(qiáng),，所以才有共聚焦系統(tǒng)提高成像的分辨率剛好雙光子在這兩點(diǎn)具有很大的優(yōu)勢(shì)上面的內(nèi)容基本在談到雙光子優(yōu)勢(shì)都會(huì)相對(duì)說(shuō)明,，在實(shí)際操作中成像的深度和樣品的關(guān)系很大，雙光子成像利用高亮度的熒光標(biāo)記材料,，已經(jīng)有做到mm級(jí)別的穿透深度如果已經(jīng)有了飛秒光,，就可以幾套雙光子顯微鏡共享一臺(tái)，只需分光即可,。ultima2PPLUS雙光子顯微鏡供應(yīng)商聯(lián)系方式

從雙光子的原理和特點(diǎn)我們就可以明顯的得出雙光子的優(yōu)點(diǎn)：☆光損傷?。河捎陔p光子顯微鏡使用的是可見(jiàn)光或近紅外光作為激發(fā)光源，這一波段的光對(duì)***細(xì)胞和組織的光損傷小,，適用于長(zhǎng)時(shí)間的研究,；☆穿透能力強(qiáng)：相對(duì)于紫外光，可見(jiàn)光和近紅外光都具有更強(qiáng)的穿透能力,，因而受生物組織散射的影響更小，解決對(duì)生物組織中深層物質(zhì)的層析成像研究問(wèn)題；☆高分辨率：由于雙光子吸收截面很小,，只有在焦平面很小的區(qū)域內(nèi)可以激發(fā)出熒光,，雙光子吸收只局限于焦點(diǎn)處的體積約為波長(zhǎng)3次方的范圍內(nèi)；☆漂白區(qū)域?。河捎诩ぐl(fā)只存在于交點(diǎn)處,，所以焦點(diǎn)以外的區(qū)域都不會(huì)發(fā)生光漂白現(xiàn)象；☆熒光收集率高：與共聚焦成像相比,，雙光子成像不需要光學(xué)濾波器（共焦***）,，這樣就提高了對(duì)熒光的收集率，而收集率的提高直接導(dǎo)致圖像對(duì)比度的提高,；☆圖像對(duì)比度高：由于熒光波長(zhǎng)小于入射波長(zhǎng),，因而瑞利散射產(chǎn)生的背景噪聲只有單光子激發(fā)時(shí)的1/16，較大降低了散射的干擾,；☆光子躍遷具有很強(qiáng)的選擇激發(fā)性,，所以可以對(duì)生物組織中一些特殊物質(zhì)進(jìn)行成像研究；國(guó)內(nèi)激光熒光雙光子顯微鏡廠家有哪些雙光子顯微鏡有這么多優(yōu)點(diǎn),，那么雙光子顯微鏡有哪些應(yīng)用呢,？

和很多偉大的科學(xué)發(fā)明一樣，雙光子顯微鏡的出現(xiàn)也有一點(diǎn)偶然,，但正是那瞬間的靈感為生物科學(xué)尤其是神經(jīng)科學(xué)帶來(lái)了一種**性的成像技術(shù)：雙光子激發(fā)熒光顯微鏡,。1990年初，當(dāng)WinfriedDenk剛從康奈爾大學(xué)博士畢業(yè)準(zhǔn)備前往瑞士讀博后時(shí),，他看了一本關(guān)于激光掃描顯微鏡的書(shū),，從中了解到非線性光學(xué)效應(yīng)——強(qiáng)光和物質(zhì)的相互作用。當(dāng)時(shí),，Denk有同事研究生物樣品中的鈣離子但苦于沒(méi)有強(qiáng)大的紫外激光器和光學(xué)元件,，于是他就想到如果使用雙光子吸收就能夠繞開(kāi)紫外，換言之,，與其通過(guò)一個(gè)紫外光子激發(fā)標(biāo)記的鈣離子,，通過(guò)兩個(gè)雙倍波長(zhǎng)的可見(jiàn)光光子也能激發(fā)相同的熒光。

雙光子顯微成像技術(shù)不是什么新技術(shù),，早在20多年前就有了,，目前已經(jīng)在生命科學(xué)和材料科學(xué)中廣泛應(yīng)用。幾年前雙光子過(guò)期后,，已經(jīng)推出自己的雙光子顯微鏡的廠家估計(jì)不少于10家以上,。即便如此，世界上很多實(shí)驗(yàn)室都搭雙光子,，自己搭的好處有很多,，首先是便宜，尤其是實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)有飛秒激光器，那就更很省錢(qián)了,。其次是靈活,，可以選擇針對(duì)特殊用途的搭配，改動(dòng)也靈活,。好處就是可以鍛煉隊(duì)伍,，一趟走下來(lái)可以把新手帶出來(lái)，后期維護(hù)也更加自由,。當(dāng)然壞處也不少,，首先是操心，特別是第1次搭的時(shí)候,，開(kāi)始要想方案,，后來(lái)要解決各種實(shí)際問(wèn)題。其次是花時(shí)間,，加上買(mǎi)配件的時(shí)間,，比買(mǎi)一臺(tái)現(xiàn)成的商業(yè)化雙光子耗時(shí)長(zhǎng)。現(xiàn)在已經(jīng)有不少關(guān)于如何搭雙光子顯微鏡的文章,，各種protocol,，大多是老外寫(xiě)的，中文的較少,。其實(shí)完全自己搭一套好用的系統(tǒng)還是不容易的,，尤其是沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)的時(shí)候，容易走彎路,，多花錢(qián),，也多花時(shí)間，再加上雙光子的重要器件都需要從國(guó)外購(gòu)買(mǎi),，在國(guó)內(nèi)買(mǎi)這些東西耗時(shí)較長(zhǎng),。因此，我想總結(jié)一下我們的經(jīng)驗(yàn),，貼出來(lái)分享,，希望能幫到想自己動(dòng)手的實(shí)驗(yàn)室，雙光子顯微鏡的探測(cè)器,該怎么選用?

雙光子顯微鏡在各領(lǐng)域研究中已有許多成功實(shí)例,；生物領(lǐng)域：貝爾實(shí)驗(yàn)室的Svoboda等人研究了大腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)鈣離子動(dòng)力學(xué)情形,。利用雙光子顯微鏡觀察到的現(xiàn)象證明了鈣離子的增加依賴于肌體觸發(fā)的鈉離子作用電勢(shì)。信息領(lǐng)域：美國(guó)科學(xué)家Rentzepis提出了一種在現(xiàn)有二維光盤(pán)的基礎(chǔ)上將數(shù)據(jù)儲(chǔ)存擴(kuò)展到三維空間,。由于雙光子激發(fā)具有作用精細(xì)體積小的特點(diǎn),，避免了層與層之間的互相干擾，較大地提高了數(shù)據(jù)儲(chǔ)存密度,。雙光子顯微鏡已延伸到各個(gè)領(lǐng)域研究中,，它能對(duì)樣品進(jìn)行三維觀察,，其基礎(chǔ)雙光子激發(fā)效應(yīng)也具有極高的應(yīng)用價(jià)值。我們可以相信,，隨著科技不斷發(fā)展,，其他技術(shù)的不斷結(jié)合，雙光子顯微鏡將得到更大的發(fā)展與更廣的應(yīng)用,。雙光子顯微鏡放大倍數(shù)是多少？investigator雙光子顯微鏡代理商

雙光子顯微鏡使用高能量鎖模脈沖激光器,。ultima2PPLUS雙光子顯微鏡供應(yīng)商聯(lián)系方式

雙光子顯微鏡為什么穿透能力強(qiáng),？生物組織在近紅外波段存在兩個(gè)窗口,第1個(gè)近紅外窗口對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)在700nm-900nm,第2個(gè)近紅外窗口對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)在1000nm-1400nm之間。舉例說(shuō)明就是單晶硅對(duì)于可見(jiàn)光幾乎是不透明的,，但是對(duì)于紅外波段就像是“水晶”一樣通透性很好了,。原因有兩點(diǎn)：1.生物組織對(duì)紅外光的吸收弱，對(duì)可見(jiàn)光吸收強(qiáng),。類似的,，平時(shí)用手電筒照射手指，會(huì)看到手通透紅亮,，也是由于生物組織對(duì)長(zhǎng)波長(zhǎng)的紅光吸收少,。2.生物組織對(duì)紅外光的散射弱。因?yàn)槿鹄⑸涞膹?qiáng)度反比于波長(zhǎng)λ的四次方,。類似的,，早晨的太陽(yáng)非常紅，也就是因?yàn)殚L(zhǎng)波長(zhǎng)的紅光穿透力更強(qiáng),。這兩點(diǎn)共同導(dǎo)致長(zhǎng)波長(zhǎng)的紅外光比可見(jiàn)光對(duì)生物組織的穿透能力強(qiáng),。ultima2PPLUS雙光子顯微鏡供應(yīng)商聯(lián)系方式