細(xì)胞在受到外界刺激時(shí),，隨著刺激時(shí)間的增長(zhǎng),，即使刺激繼續(xù)存在，Ca2+熒光信號(hào)不但不會(huì)繼續(xù)增強(qiáng),，反而會(huì)減弱,，直至恢復(fù)到未加刺激物時(shí)的水平。對(duì)于細(xì)胞受精過(guò)程中Ca2+熒光信號(hào)的變化情況,，研究發(fā)現(xiàn),，配了在粘著過(guò)程中，Ca2+熒光信號(hào)未發(fā)生任何變化，而配子之間發(fā)生融合作用時(shí),，Ca2+熒光信號(hào)強(qiáng)度卻會(huì)出現(xiàn)一個(gè)不穩(wěn)定的峰值,，并可持續(xù)幾分鐘。這些現(xiàn)象,，對(duì)研究受精發(fā)育的早期信號(hào)及Ca2+在卵細(xì)胞和受精卵的發(fā)育過(guò)程中的作用具有重要的意義,。在其它一些生理過(guò)程如細(xì)胞分裂、胞吐作用等,，Ca2+熒光信號(hào)強(qiáng)度也會(huì)發(fā)生很的變化,。精確觀測(cè)生物分子相互作用，多光子顯微鏡推動(dòng)生命科學(xué)研究發(fā)展,。全自動(dòng)多光子顯微鏡暗場(chǎng)成像

快速光柵掃描有多種實(shí)現(xiàn)方式,，使用振鏡進(jìn)行快速2D掃描，將振鏡和可調(diào)電動(dòng)透鏡結(jié)合在一起進(jìn)行快速3D掃描,，但可調(diào)電動(dòng)透鏡由于機(jī)械慣性的限制在軸向無(wú)法快速進(jìn)行焦點(diǎn)切換,，影響成像速度，現(xiàn)可使用空間光調(diào)制器（SLM）代替,。遠(yuǎn)程聚焦也是一種實(shí)現(xiàn)3D成像的手段,。在LSU模塊中，掃描振鏡進(jìn)行橫向掃描,，ASU模塊包括物鏡L1和反射鏡M,，通過(guò)調(diào)控M的位置實(shí)現(xiàn)軸向掃描。該技術(shù)不僅可以校正主物鏡L2引入的光學(xué)像差,，還可以進(jìn)行快速的軸向掃描,。想要獲得更多神經(jīng)元成像，可以通過(guò)調(diào)整顯微鏡的物鏡設(shè)計(jì)來(lái)擴(kuò)大FOV,，但是具有大NA和大FOV的物鏡通常重量較大,，無(wú)法快速移動(dòng)以進(jìn)行快速軸向掃描，因此大型FOV系統(tǒng)依賴于遠(yuǎn)程聚焦,、SLM和可調(diào)電動(dòng)透鏡,。美國(guó)嚙齒類多光子顯微鏡實(shí)驗(yàn)操作多光子顯微鏡，實(shí)現(xiàn)無(wú)創(chuàng),、無(wú)標(biāo)記的生物組織觀測(cè)方案。

在生物成像中,，我司多光子顯微鏡具有清（清晰）,，快（快速），深（深層）,，活這四個(gè)方面,。結(jié)合了多光子上轉(zhuǎn)化材料以及時(shí)間編碼的結(jié)構(gòu)光超分辨技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了快速（50MHz的掃描速度），超分辨（超衍射極限）成像,。作為一種新的高速,，超高分辨率的成像系統(tǒng)，MUTE-SIM可以幫助我們對(duì)快速運(yùn)動(dòng)的生物圖像進(jìn)行分辨率高的成像,。盡管關(guān)于深度成像的應(yīng)用我們沒(méi)有進(jìn)一步展示,，但是結(jié)合1560nm近紅外光相對(duì)于可見(jiàn)光更佳的穿透性，我們相信該技術(shù)將有利于對(duì)生物組織進(jìn)行高速,，超分辨,，高深度地成像，有助于生物影像學(xué)的發(fā)展,。滔博生物TOP-Bright是一家集研發(fā),，生產(chǎn)，銷售于一體的專注于神經(jīng)科學(xué)產(chǎn)品及致力于向高校,、科研機(jī)構(gòu)等領(lǐng)域提供實(shí)驗(yàn)室一體化方案的高科技企業(yè),。業(yè)務(wù)服務(wù)范圍已遍布至全國(guó)各地幾百家實(shí)驗(yàn)室。目前公司主營(yíng)產(chǎn)品是享譽(yù)全球的國(guó)際品牌和產(chǎn)品,這些儀器設(shè)備都是科學(xué)研究所必備且不可替代的基礎(chǔ)儀器,。

從產(chǎn)品類型及技術(shù)方面來(lái)看,，正置顯微鏡占據(jù)絕大多數(shù)市場(chǎng)。2020年,，全球多光子激光掃描正置顯微鏡市場(chǎng)達(dá)到87.30百萬(wàn)美元,，預(yù)計(jì)到2027年該部分市場(chǎng)將達(dá)到154.02百萬(wàn)美元，年復(fù)合增長(zhǎng)率（2021-2027）為8.48%,。中國(guó)多光子激光掃描正置顯微鏡市場(chǎng)達(dá)到13.32百萬(wàn)美元,，預(yù)計(jì)到2027年該部分市場(chǎng)將達(dá)到25.21百萬(wàn)美元，年復(fù)合增長(zhǎng)率（2021-2027）為9.58%,。從產(chǎn)品市場(chǎng)應(yīng)用情況來(lái)看,，研究機(jī)構(gòu)為主要應(yīng)用領(lǐng)域，2020年約占全球市場(chǎng)46.28%,。2020年,，全球多光子激光掃描顯微鏡研究機(jī)構(gòu)應(yīng)用消費(fèi)量為174臺(tái)，預(yù)計(jì)2027年達(dá)到349臺(tái),，2021-2027年復(fù)合增長(zhǎng)率（CAGR）為9.72%,。滔博生物多光子顯微鏡是一種高級(jí)的顯微鏡技術(shù).

    現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展和科技的進(jìn)步，特別是隨著后基因組時(shí)代的到來(lái),，人們已經(jīng)能夠根據(jù)需要建立各種細(xì)胞模型,，為在體研究基因表達(dá)規(guī)律、分子間的相互作用,、細(xì)胞的增殖,、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、誘導(dǎo)分化、細(xì)胞凋亡以及新的血管生成等提供了良好的生物學(xué)條件,。然而,，盡管人們利用現(xiàn)有的分子生物學(xué)方法，已經(jīng)對(duì)基因表達(dá)和蛋白質(zhì)之間的相互作用進(jìn)行了深入,、細(xì)致的研究,，但仍然不能實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)和基因活動(dòng)的實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè),。在細(xì)胞的生理過(guò)程中,，基因、尤其是蛋白質(zhì)的表達(dá),、修飾和相萬(wàn)作用往往發(fā)生可逆的,、動(dòng)態(tài)的變化。目前的分子生物學(xué)方法還不能捕獲到蛋白質(zhì)和基因的這些變化,，但獲取這些信息對(duì)與研究基因的表達(dá)和蛋白質(zhì)之間的相互作用又至關(guān)重要,。因此，發(fā)展能用于,、動(dòng)態(tài),、實(shí)時(shí)、連續(xù)監(jiān)測(cè)蛋白質(zhì)和基因活動(dòng)的方法非常必要,。 高精度,，低光損，多光子顯微鏡為科研提供準(zhǔn)確依據(jù),。嚙齒類多光子顯微鏡研究

多光子顯微鏡可以更好的了解神經(jīng)信號(hào)之間復(fù)雜動(dòng)態(tài)的編碼過(guò)程,。全自動(dòng)多光子顯微鏡暗場(chǎng)成像

2020年，TonmoyChakraborty等人提出了加速2PM軸向掃描速度的方法[2],。在光學(xué)顯微鏡中,，物鏡或樣品緩慢的軸向掃描速度限制了體成像的速度。近年來(lái),，通過(guò)使用遠(yuǎn)程聚焦技術(shù)或電調(diào)諧透鏡(ETL)已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了快速軸向掃描,。但遠(yuǎn)程對(duì)焦時(shí)對(duì)反射鏡的機(jī)械驅(qū)動(dòng)會(huì)限制軸向掃描速度，ETL會(huì)引入球差和高階像差,，無(wú)法進(jìn)行高分辨率成像,。為了克服這些限制，該小組引入了一種新的光學(xué)設(shè)計(jì),，可以將橫向掃描轉(zhuǎn)換為無(wú)球面像差的軸向掃描,，以實(shí)現(xiàn)高分辨率成像。有兩種方法可以實(shí)現(xiàn)這種設(shè)計(jì),。***個(gè)可以執(zhí)行離散的軸向掃描,，另一個(gè)可以執(zhí)行連續(xù)的軸向掃描。如圖3a所示,，特定裝置由兩個(gè)垂直臂組成,，每個(gè)臂具有4F望遠(yuǎn)鏡和物鏡。遠(yuǎn)程聚焦臂由振鏡掃描鏡(GSM)和空氣物鏡(OBJ1)組成,，另一個(gè)臂(稱為照明臂)由浸沒(méi)物鏡(OBJ2)組成,。兩個(gè)臂對(duì)齊，使得GSM與兩個(gè)物鏡的后焦平面共軛,。準(zhǔn)直后的激光束經(jīng)偏振分束器反射進(jìn)入遠(yuǎn)程聚焦臂,，由GSM進(jìn)行掃描，使OBJ1產(chǎn)生的激光焦點(diǎn)可以進(jìn)行水平掃描,。全自動(dòng)多光子顯微鏡暗場(chǎng)成像