TOPTICAFemtoFiberultra920超快光纖激光器是一種易于操作和免維護的激光系統(tǒng)其輸出波長為920nm，非常適合常規(guī)熒光基團(如GFP,、eGFP,、曙紅、GCaMP,、CFP,、鈣黃綠素或金星)的雙光子激發(fā)。它可以為熒光基團提供相對較高的峰值功率,，常用于神經(jīng)科學和其他與激光相關(guān)的光子學,。此外，其獨特的設(shè)計(簡單和經(jīng)濟的光源)具有創(chuàng)新雙光子熒光顯微鏡發(fā)展的潛力,。在雙光子顯微鏡中,，峰值功率就是亮度！如果你想獲得更好的圖像亮度,，那么你需要短脈沖,，高功率,，更重要的是，干凈的時間脈沖形狀,。FemtoFiberultra920具有足夠高的輸出功率,、短脈沖、獨特的Clean-Pulse技術(shù)和相對較高的峰值功率,，這使得在雙光子顯微鏡中實現(xiàn)****亮度而無需對樣品進行不必要的加熱成為可能,。FemtoFiberultra920全包式、完全集成的色散補償(可確保樣品處的短脈沖),、內(nèi)置電源控制,、直觀的操作及其堅固緊湊的設(shè)計使系統(tǒng)具有非常友好的用戶體驗，是非線性顯微鏡應(yīng)用的良好解決方案,。例如,，熒光蛋白的雙光子激發(fā)和基于SHG的對比機制優(yōu)勢來源于其雙光子光源的非線性光學效應(yīng),。熒光激光雙光子顯微鏡熒光壽命計數(shù)

雙光子熒光顯微鏡是結(jié)合了激光掃描共聚焦顯微鏡和雙光子激發(fā)技術(shù)的一種新技術(shù),。雙光子激發(fā)的基本原理是：在高光子密度的情況下，熒光分子可以同時吸收2個長波長的光子,，在經(jīng)過一個很短的所謂激發(fā)態(tài)壽命的時間后,，發(fā)射出一個波長較短的光子；其效果和使用一個波長為長波長一半的光子去激發(fā)熒光分子是相同的,。雙（多）光子成像優(yōu)勢在于,，具有更深的組織穿透深度，利用紅外光,，能夠在層面檢測極限達1mm的組織區(qū)域,；因信號背景比高，而具有更高的對比度,；因激發(fā)體積小,，具有定點激發(fā)的特性，具有更少的光毒性,；激發(fā)波長由紫外,、可見光調(diào)整為紅外激發(fā)，使其能夠更加安全,。進口bruker雙光子顯微鏡授權(quán)供應(yīng)商雙光子顯微鏡使用高能量鎖模脈沖激光器,。

從雙光子的原理和特點我們就可以明顯的得出雙光子的優(yōu)點：☆穿透能力強：相對于紫外光，可見光和近紅外光都具有更強的穿透能力,，因而受生物組織散射的影響更小,，解決對生物組織中深層物質(zhì)的層析成像研究問題；☆高分辨率：由于雙光子吸收截面很小,，只有在焦平面很小的區(qū)域內(nèi)可以激發(fā)出熒光,，雙光子吸收局限于焦點處的體積約為波長3次方的范圍內(nèi),；☆漂白區(qū)域小：由于激發(fā)只存在于交點處,，所以焦點以外的區(qū)域都不會發(fā)生光漂白現(xiàn)象,；☆熒光收集率高：與共聚焦成像相比，雙光子成像不需要光學濾波器（共焦）,，這樣就提高了對熒光的收集率,，而收集率的提高直接導致圖像對比度的提高。

配合雙光子激發(fā)技術(shù),，激光共聚掃描顯微鏡則能更好得發(fā)揮功效,。那么，什么是雙光子激發(fā)技術(shù)呢,？在高光子密度的情況下,，熒光分子可以同時吸收2個長波長的光子使電子躍遷到較高能級，經(jīng)過一個很短的時間后,，電子再躍遷回低能級同時放出一個波長為長波長一半的光子（P=h/λ）,。利用這個原理，便誕生了雙光子激發(fā)技術(shù),。雙光子顯微鏡使用長波長脈沖激光,，通過物鏡匯聚，由于雙光子激發(fā)需要很高的光子密度,，而物鏡焦點處的光子密度是比較高的,，所以只有在焦點處才能發(fā)生雙光子激發(fā)，產(chǎn)生熒光,，該點產(chǎn)生的熒光再穿過物鏡,，被光探頭接收，從而能夠達到逐點掃描的效果,。雙光子顯微鏡使用的是高能量鎖模脈沖器,。

雙光子技術(shù)在醫(yī)療診斷應(yīng)用中具有巨大的潛力，該領(lǐng)域還未形成標準和體系,，還仍需要系統(tǒng)的醫(yī)學研究與龐大的醫(yī)療數(shù)據(jù)加以支撐,，通過研究人體基于多光子成像技術(shù)，進行細胞結(jié)構(gòu),、生化成分,、微環(huán)境、組織形態(tài),、代謝功能的影響信息,，找到與疾病的細胞學、分子生物學,、組織病理學,、診斷和特征的關(guān)聯(lián)關(guān)系,，共同探究生理病理基礎(chǔ)和分子細胞生物學機制，篩選鑒定,、皮膚病,、自身免疫病及其他疑難疾病的診斷及鑒別診斷依據(jù)，建立全新的多光子細胞診斷的完整數(shù)據(jù)庫,，定義出針對不同疾病的多光子臨床檢測設(shè)備的產(chǎn)品標準,。討論環(huán)節(jié)，來自病理科,、呼吸中心,、心臟科、神經(jīng)科,、皮膚科及研究所的多位醫(yī)師及研究人員紛紛結(jié)合各自的工作領(lǐng)域與王愛民副教授展開了熱烈的討論,，其中毛發(fā)中心楊頂權(quán)主任計劃再次邀請王愛民副教授進行學術(shù)交流。通過本次學術(shù)交流,，病理科與研究所分別與王愛民副教授課題組達成了初步的合作意向,。雙光子顯微鏡已成為較厚有生命體生物組織三維成像中不可或缺的工具。ultima2PPLUS雙光子顯微鏡供應(yīng)商聯(lián)系方式

雙光子顯微鏡能夠進行光裂解,、光轉(zhuǎn)染和光損傷等光學操縱,。熒光激光雙光子顯微鏡熒光壽命計數(shù)

雙光子的來源:飛秒激光的雙光子吸收理論早在1931年就由諾貝爾獎獲得者MariaGoeppertMayer提出，并在30年后因為激光而得到實驗驗證,，但WinfriedDenk用了近30年才發(fā)明了雙光子顯微鏡。要理解雙光子的技術(shù)挑戰(zhàn)和飛秒激光發(fā)揮的重要作用,，首先要理解非線性過程,。雙光子吸收相當于和頻產(chǎn)生的非線性過程，需要極高的電場強度,，電場取決于聚焦光斑的大小和激光脈沖寬度,。聚焦光斑越小，脈沖寬度越窄,，雙光子吸收效率越高,。對于衍射極限顯微鏡，聚焦在樣品上的光斑大小只與物鏡NA和激光波長有關(guān),，所以關(guān)鍵變量只有激光脈沖寬度,。基于以上分析,，能夠輸出高重復率(100MHz)的超短脈沖(100fs量級)的飛秒激光已經(jīng)成為雙光子顯微鏡的標準激發(fā)光源,。這再次顯示了雙光子顯微鏡的優(yōu)勢:雙光子吸收只能在焦平面形成，而在焦平面之外,，由于光強較低,，無法激發(fā),，所以雙光子成像更清晰。熒光激光雙光子顯微鏡熒光壽命計數(shù)