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Recombinant Mouse IL-2R gamma/CD132 Protein

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-27

N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定義(UnitDefinition)1個(gè)酶活力單位指在10μL的反應(yīng)體系中,,37℃條件下1小時(shí)從10μg變性RNaseB中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量,。儲(chǔ)存條件-15~-25℃保存,,有效期1年,。使用說明變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg),,至終體積10μL;2)100℃溫度下煮沸10min使其變性,,冰上冷卻,,離心10秒;3)加入2μL的Buffer2,、2μL的10%NP-40,、6μL去離子水,總反應(yīng)體積20μL,;4)加入0.2~0.5μL的PNGase,,輕輕混勻。在37℃孵育1-3h,。非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg)至體積為20μL,。2)加入0.5~1μL的PNGaseF,輕輕混勻。3)37°C孵育4-24h,。注意:在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化,,在非變性條件下可能需要增加PNGaseF的量和延長孵育時(shí)間。SUMO蛋白酶識(shí)別完整的含有100個(gè)氨基酸的SUMO標(biāo)簽蛋白,,并能高效地把SUMO從融合蛋白上切割下來,。Recombinant Mouse IL-2R gamma/CD132 Protein,His Tag

Recombinant Mouse IL-2R gamma/CD132 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

糖苷內(nèi)切酶H是一種重組糖苷酶,能夠?qū)-糖蛋白中的高甘露糖和某些雜合型寡聚糖的殼二糖結(jié)構(gòu)進(jìn)行切割,,去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖,。糖苷內(nèi)切酶H克隆自褶皺鏈霉菌(Streptomycesplicatus)。并在酵母中重組表達(dá),。本產(chǎn)品帶his標(biāo)簽,,常應(yīng)用于抗體及其相關(guān)蛋白完全去糖基化。另外,,我司還提供其他類型的糖苷酶,,包括糖苷內(nèi)切酶S(Cat#20413ES),酵母重組表達(dá)的N-糖苷酶F(比活性:750000U/mL),,酵母重組表達(dá)的N-糖苷酶F(比活性:100000U/mL),。儲(chǔ)存條件-15~-25℃保存,有效期1年,。使用說明變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg),,至終體積10μL,;2)100℃溫度下煮沸10min使其變性,冰上冷卻,,離心10秒,;3)加入2μL的Buffer2,8μL去離子水,,總反應(yīng)體積20μL,;4)加入1-2μL的EndoH,輕輕混勻,。在37℃孵育1-3h,。5)65℃下熱失活10分鐘。非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg)至終體積為20μL,。2)加入2~5μL的EndoH,輕輕混勻,。3)37°C孵育4-24h。注意:在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化,,在非變性條件下可能需要增加EndoH的量和延長孵育時(shí)間,。Recombinant Human PD-1/PDCD1 Protein,hFc Tag重組腸激酶(rEK)是一種高純度的重組牛腸激酶輕鏈片段,氨基酸序列與牛腸激酶輕鏈一致,,有著酶切位點(diǎn),。

Recombinant Mouse IL-2R gamma/CD132 Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

RecombinantHumanACE2/ACEHProtein,hFcTag性能參數(shù),分子別名(Synonyms)ACE2;ACEH;ACE-2表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)HumanACE2/ACEHProteinisexpressedfromHEK293withhFctagattheC-Terminus.ItcontainsGln18-Ser740.[Accession|Q9BYF1-1]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof109.2kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto115-130kDabasedonSDS-PAGEresult.Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC.活性(Activity)ELISAData:ImmobilizedSARS-COV-2SpikeS(B.1.1.529/Omicron)Trimer,HisTagat1μg/ml(100μl/well)ontheplate.DoseresponsecurveforHumanACE2,hFcTagwiththeEC50of13.7ng/mldeterminedbyELISA.制劑(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重構(gòu)方法(Reconstitution)Centrifugethetubebeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.

α-凝血酶(α-Thrombin)是一種高度特異性的絲氨酸蛋白酶,,由凝血酶原(Prothrombin,II因子)經(jīng)蛋白水解活化而來,。它在凝血過程中起著非常重要的作用,,不僅能夠促使纖維蛋白凝塊的產(chǎn)生,還負(fù)責(zé)提供反饋信號(hào)來尋找前輔因子:V因子和VIII因子,。也可以用作血管收縮劑,。在體內(nèi),活化的X因子(FactorXa)切割凝血酶原,,釋放出活性肽并將凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶,。α-凝血酶由一條輕鏈(Achain)(Mw~6,000)和一條重鏈(Bchain)(Mw~31,000)通過二硫鍵連接而成。某些情況下,,α-凝血酶會(huì)發(fā)生自溶生成β-凝血酶和γ-凝血酶,。β-凝血酶由對α-凝血酶A鏈水解并切割含有B鏈糖基化位點(diǎn)的小片段(B1,B2)組合而成,。除了用于凝血研究之外,,α-凝血酶還常用來位點(diǎn)特異性切割融合蛋白?;蛑亟M時(shí)將凝血酶識(shí)別位點(diǎn)插入在目的蛋白與利于后續(xù)純化和/或表達(dá)的多肽或者蛋白之間,,通過凝血酶切割表達(dá)的重組子即可釋放目的蛋白,。凝血酶本身可通過親和層析技術(shù)快速去除。本品是由勻質(zhì)化的人凝血酶原經(jīng)由Xa因子,,Va因子和磷脂活化而得,,經(jīng)SDS-PAGE檢測確保凝血酶原的完全活化,并以NIH凝血酶的標(biāo)準(zhǔn)品為參考,,提供的酶活力不少于3091NIHU/mg,。UbcH3還有兩個(gè)泛素結(jié)合位點(diǎn)UBS1(來自aa 205-215)和UBS2(來自aa 216-225),以及一個(gè)c端酸性尾部結(jié)構(gòu)域,。

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大腸桿菌系統(tǒng)通常是小分子細(xì)胞質(zhì)蛋白或結(jié)構(gòu)域表達(dá)的宿主。用大腸桿菌生產(chǎn)蛋白質(zhì),,由于只需要簡單的培養(yǎng)基和條件,,因此費(fèi)用低且方便。此外,,除了無細(xì)胞表達(dá),,它是速度的系統(tǒng),大腸桿菌倍增時(shí)間(約20min)比酵母(2h),、昆蟲細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞都快,。一般來說,在大腸桿菌中表達(dá)重組蛋白包括:1.將一個(gè)編碼目標(biāo)蛋白的質(zhì)粒導(dǎo)入宿主菌,;2.培養(yǎng)細(xì)胞至對數(shù)生長期,;3.誘導(dǎo)蛋白表達(dá)。選擇合適的表達(dá)載體合適的宿主選定后,,相應(yīng)的有許多工程化克隆位點(diǎn)和用于驅(qū)動(dòng)蛋白表達(dá)的非編碼序列的載體可用,。啟動(dòng)子通常是可誘導(dǎo)的,以在細(xì)胞生長到合適的密度前阻止目標(biāo)蛋白表達(dá),。大部分載體還提供目標(biāo)蛋白與一系列蛋白標(biāo)簽構(gòu)建融合蛋白的選擇,。常用的大腸桿菌表達(dá)載體分為以下兩大類:E.coliRNA聚合酶轉(zhuǎn)錄的載體α-凝血酶(α-Thrombin)可以啟動(dòng)XIII因子和血小板,或者用作血管收縮劑,。Recombinant Cynomolgus EPHA5 Protein,His Tag

隨著年齡的增長,,人體合成透明質(zhì)酸的能力會(huì)逐漸下降,導(dǎo)致皮膚中透明質(zhì)酸的含量降低,。Recombinant Mouse IL-2R gamma/CD132 Protein,His Tag

重組型TEV蛋白酶(rTEV)是經(jīng)過基因工程改造和純化后的重組蛋白酶,,不僅保持天然TEV酶的功能活性,且在廣譜的溫度范圍內(nèi)表現(xiàn)出更強(qiáng)的穩(wěn)定性和特異性,。rTEV是一種用來切除融合蛋白上親和標(biāo)簽的常用工具酶,,具有很強(qiáng)的位點(diǎn)特異性,嚴(yán)格識(shí)別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),,切割位點(diǎn)在谷氨酰胺和甘氨酸/絲氨酸之間,。普遍應(yīng)用的七氨基酸序列為:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly,。rTEV在pH7.0,30℃時(shí)可達(dá)活性,,但在pH6.0-8.5和溫度4-30℃范圍內(nèi)皆有活性(見表1),,使得反應(yīng)條件的選擇可根據(jù)目的蛋白的情況而靈活變動(dòng)。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His標(biāo)簽,,通過Ni-NTA樹脂去除,,以達(dá)到純化目的蛋白的目的。產(chǎn)品性質(zhì)來源(Source)大腸桿菌外觀(Appearance)無色透明液體比活力(SpecificActivity)5U/μL活性定義(UnitDefinition)在1×rTEVBuffer(50mMTris,,pH8.0,,0.1mMEDTA,1mMDTT)中,,30℃反應(yīng)1h,,剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位。純化(Purification)Ni柱親和純化純度(Purity)≥95%(bySDS-PAGE)產(chǎn)品組分運(yùn)輸與保存方法冰袋運(yùn)輸,。Recombinant Mouse IL-2R gamma/CD132 Protein,His Tag