AngiotensinIConvertingEnzyme(ACE-2),alsocalledACEH(ACEhomologue),isadimeric,zinc-dependentmetalloproteaseoftheACEfamilythatalsoincludessomaticandgerminalACE.ACE-2mRNAisfoundathighlevelsinheart,testis,andkidneyandatlowerlevelsinawidevarietyoftissues.ACE-2istheSARS-CoVandSARS-CoV2Spikeproteinreceptorinvivo,functionscatalyticallyasacarboxypeptidasetocleaveseveralsubstratesincludingangiotensinsIandII,andactsasapartnerforB0AT1-familyaminoacidtransporters.Throughthesefunctions,ACE-2hasbeenshowntobeinvolvedinseveraldiseasesincludingSARS,COVID19,acutelunginjury,heartdisease,liverandlungfibrosis,inflammatorylungdisease,andcardiopulmonarydisease.FulllengthACE-2proteinincludesanextracellularregioncomposedofasingleN-terminalpeptidasedomainandC-terminalcollectrin-likedomain(CLD),atransmembranedomain,andashortcytoplasmictail.TheN-terminalpeptidaseregionisrequiredforbindingtoSARS-CoVandSARS-CoV2spikeproteins,whiletheCLDcontainsaregionthatpromotesdimerizationandassociationwithaminoacidtransporters.泛素化是一個可逆的過程,,存在去泛素化酶可以去除泛素分子,,從而調(diào)節(jié)泛素化的水平和功能。Recombinant Mouse IL-20RA Protein,hFc Tag
IdeSProtease全稱免疫球蛋白G降解酶,,酶活(Enzymeactivity)40U/μL酶活定義(UnitDefinition)在37℃條件下,,反應(yīng)30min,剪切>95%的1μg重組單克隆IgG所需要的酶量定義為一個活性單位,。儲存條件-25~-15℃保存,,有效期1年。使用方法1.在消化液中加入適量IgG(加至5mg),;2.在IgG樣本中加入IdeS蛋白酶(每1μgIgG加入1個單位的IdeS);3.將樣品置于37℃孵育30-60min,。IdeS蛋白酶在中性pH或接近中性pH的緩沖中活性強(qiáng),。推薦反應(yīng)緩沖是50mM磷酸鈉,150mMNaCl(pH6.6),,多數(shù)常見的生物緩沖也適用,,比如Tris或PBS;注意:不在此pH范圍(例如乙酸鹽緩沖液)的緩沖也可能適用,但是孵育時間或酶量需要根據(jù)實際情況進(jìn)行優(yōu)化,。注意事項1.IdeS不能識別切割小鼠IgG1/IgG2b,大鼠,、豬、牛和山羊IgG,,對小鼠IgG2a和IgG3具有中等酶切活性,,酶切小鼠IgG2a和IgG3建議增加IdeS的用量(推薦用量為正常用量的5-10倍)。2.IdeS不能切割非IgG亞型的單抗分子,,包括IgA,、IgM、IgD和IgE,。Recombinant Human HVEM/TNFRSF14 Protein,hFc TagCB1受體分布于大腦和外周神經(jīng)系統(tǒng)中,,與多種生理功能有關(guān),包括疼痛感知,、食欲調(diào)節(jié),、情緒調(diào)節(jié)。
泛素化是通過三個酶促步驟實現(xiàn)的,。在ATP依賴的過程中,,泛素酶(E1)催化與泛素形成活性硫酯鍵,然后轉(zhuǎn)移到泛素載體蛋白的活性位點(diǎn)半胱氨酸(E2),。泛素級聯(lián)對特定底物蛋白的選擇性依賴于E2結(jié)合酶(細(xì)胞中包含的相對較少)和泛素-蛋白連接酶(E3)之間的相互作用,,迄今為止已經(jīng)鑒定出600多種這種酶。E3s是一個大的,,多樣化的蛋白質(zhì)組,,其特征是幾個確定的基序之一。這些包括HECT(與e6相關(guān)蛋白c端同源),,RING(真正有趣的新基因)或U-box(沒有Zn2+結(jié)合配體的完整補(bǔ)充的修飾的RING基序)結(jié)構(gòu)域,。而HECTE3s在泛素化過程中具有直接的催化作用,RING和U-boxE3s促進(jìn)蛋白質(zhì)泛素化,。后兩種E3類型充當(dāng)適配器類分子,。它們使E2和底物足夠接近,從而促進(jìn)底物的泛素化,。雖然許多RING-typee3,,如MDM2和c-Cbl,可以單獨(dú)發(fā)揮作用,,但其他一些是作為更大的多蛋白復(fù)合體的組成部分,,如后期促進(jìn)復(fù)合體。綜上所述,,這些多面的特性和相互作用使E3s能夠利用泛素-蛋白酶體系統(tǒng),,在真核生物的所有細(xì)胞中提供一種強(qiáng)大而具體的蛋白質(zhì)機(jī)制,。該篩選了11種常用E2結(jié)合酶,可以篩選具有E3連接酶活性的蛋白所匹配的E2酶.
糖苷內(nèi)切酶H是一種重組糖苷酶,,能夠?qū)-糖蛋白中的高甘露糖和某些雜合型寡聚糖的殼二糖結(jié)構(gòu)進(jìn)行切割,,去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖。糖苷內(nèi)切酶H克隆自褶皺鏈霉菌(Streptomycesplicatus),。并在酵母中重組表達(dá),。本產(chǎn)品帶his標(biāo)簽,常應(yīng)用于抗體及其相關(guān)蛋白完全去糖基化,。另外,,我司還提供其他類型的糖苷酶,包括糖苷內(nèi)切酶S(Cat#20413ES),,酵母重組表達(dá)的N-糖苷酶F(比活性:750000U/mL),,酵母重組表達(dá)的N-糖苷酶F(比活性:100000U/mL)。儲存條件-15~-25℃保存,,有效期1年,。使用說明變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg),至終體積10μL,;2)100℃溫度下煮沸10min使其變性,,冰上冷卻,離心10秒,;3)加入2μL的Buffer2,,8μL去離子水,總反應(yīng)體積20μL,;4)加入1-2μL的EndoH,,輕輕混勻。在37℃孵育1-3h,。5)65℃下熱失活10分鐘,。非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目標(biāo)糖蛋白(1-20μg)至終體積為20μL。2)加入2~5μL的EndoH,輕輕混勻,。3)37°C孵育4-24h,。注意:在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加EndoH的量和延長孵育時間,。C5aR(C5a 受體)是補(bǔ)體系統(tǒng)的一部分,,它有兩種已知的受體:C5aR1(CD88)和C5L2。
牛血漿作為肉制品工業(yè)的重要副產(chǎn)品,,其中富含的纖維蛋白原具有經(jīng)濟(jì)和醫(yī)學(xué)價值,。本文綜述了牛血漿中纖維蛋白原的提取方法、結(jié)構(gòu)特性,、生物學(xué)功能以及在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用前景,。引言纖維蛋白原是血漿中的關(guān)鍵凝血因子,對于止血和傷口愈合至關(guān)重要,。由于其在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用,,牛血漿中纖維蛋白原的提取和應(yīng)用受到了科研工作者和醫(yī)學(xué)界的高度關(guān)注。纖維蛋白原的結(jié)構(gòu)特性牛纖維蛋白原由α,、β,、γ三對多肽鏈組成,分子量約為340 kDa,。這些多肽鏈通過二硫鍵連接,,形成了纖維蛋白原穩(wěn)定的三維結(jié)構(gòu)。纖維蛋白原含有約4%的碳水化合物,,對其生物學(xué)功能至關(guān)重要,。提取與純化技術(shù)牛血漿中纖維蛋白原的提取通常采用鹽析法和有機(jī)溶劑沉淀法。鹽析法利用硫酸銨等中性鹽進(jìn)行蛋白質(zhì)的沉淀,,而有機(jī)溶劑沉淀法則使用乙醇等有機(jī)溶劑,。這些方法簡便、成本低廉,,適合大規(guī)模生產(chǎn),。然而,為了獲得高純度的纖維蛋白原,,通常需要進(jìn)一步的純化步驟,,如離子交換色譜。在生物制藥工業(yè)中,,腸激酶用于生產(chǎn)重組蛋白質(zhì)藥物,,通過專一性切割去除不需要的序列,提高藥物純度和活性,。Recombinant Human CD40/TNFRSF5(His Tag)
在藥物篩選中,,全長CB1受體可用于高通量篩選實驗,以發(fā)現(xiàn)和優(yōu)化潛在的藥物候選物,。Recombinant Mouse IL-20RA Protein,hFc Tag
Endo H糖苷內(nèi)切酶H:結(jié)構(gòu),、功能及其在糖生物學(xué)中的應(yīng)用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H(Endo H)是一種專門作用于糖鏈的內(nèi)切酶,對研究蛋白質(zhì)糖基化修飾具有重要意義,。本文將探討Endo H的結(jié)構(gòu)特性,、催化機(jī)制以及在糖生物學(xué)研究中的應(yīng)用。引言蛋白質(zhì)糖基化是一種普遍存在的翻譯后修飾,,對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),、穩(wěn)定性和功能發(fā)揮著關(guān)鍵作用。Endo H是一種能夠特異性識別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈的內(nèi)切酶,,廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)糖基化分析,。Endo H的結(jié)構(gòu)特性Endo H由菌Helix pomatia分泌,,其分子量約為130 kDa。該酶具有一個催化中心,,能夠識別并切割特定的糖苷鍵,。Endo H的三維結(jié)構(gòu)尚未完全解析,但其氨基酸序列和某些關(guān)鍵催化殘基已被確定,。催化機(jī)制Endo H通過水解N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)與N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)之間的β-1,4糖苷鍵,,從而釋放高甘露糖型N-連接糖鏈。該過程不涉及輔因子,,表明Endo H催化機(jī)制可能依賴于其活性位點(diǎn)的氨基酸殘基,。Recombinant Mouse IL-20RA Protein,hFc Tag