Endo H糖苷內(nèi)切酶H：結(jié)構(gòu)、功能及其在糖生物學(xué)中的應(yīng)用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H（Endo H）是一種專門作用于糖鏈的內(nèi)切酶,，對研究蛋白質(zhì)糖基化修飾具有重要意義,。本文將探討Endo H的結(jié)構(gòu)特性、催化機制以及在糖生物學(xué)研究中的應(yīng)用,。引言蛋白質(zhì)糖基化是一種普遍存在的翻譯后修飾,，對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、穩(wěn)定性和功能發(fā)揮著關(guān)鍵作用,。Endo H是一種能夠特異性識別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈的內(nèi)切酶,，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)糖基化分析。Endo H的結(jié)構(gòu)特性Endo H由菌Helix pomatia分泌，其分子量約為130 kDa,。該酶具有一個催化中心,，能夠識別并切割特定的糖苷鍵。Endo H的三維結(jié)構(gòu)尚未完全解析,，但其氨基酸序列和某些關(guān)鍵催化殘基已被確定,。催化機制Endo H通過水解N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）與N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）之間的β-1,4糖苷鍵，從而釋放高甘露糖型N-連接糖鏈,。該過程不涉及輔因子,，表明Endo H催化機制可能依賴于其活性位點的氨基酸殘基。全長A2aR蛋白具有天然完整構(gòu)象,，VLP（病毒樣顆粒）固有特征可以帶來更高的免疫原性,。Recombinant Cynomolgus SPARC Protein,His Tag

3C蛋白酶（3C Protease），也稱為3Cpro或3C樣蛋白酶（3CLpro）,，是一類在RNA病毒復(fù)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用的酶,。它們負責(zé)切割病毒的多聚蛋白前體，從而釋放出成熟的病毒蛋白,，這些蛋白對于病毒的復(fù)制和組裝至關(guān)重要,。3C蛋白酶在多種病毒中都有發(fā)現(xiàn)，包括冠狀病毒,、小RNA病毒等,。結(jié)構(gòu)與功能3C蛋白酶通常具有特定的酶切位點，能夠識別并切割特定的氨基酸序列,。例如,，小RNA病毒科的3C蛋白酶識別位點為Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro，切割位點位于谷氨酰胺（Gln）和甘氨酸（Gly）之間,，稱為Q-G位點4,。抗病毒藥物開發(fā)3C蛋白酶因其在病毒生命周期中的關(guān)鍵作用，成為抗病毒藥物開發(fā)的重要靶點,。通過抑制3C蛋白酶的活性,，可以有效阻斷病毒的復(fù)制過程。例如,，SARS-CoV-2（病毒）的3CLpro是抗冠狀病毒藥物的重要靶點,，西湖大學(xué)胡奇團隊等合作揭示了SARS-CoV-2 3CLpro潛在耐藥機制，為解決潛在的耐藥問題提供了重要信息3,。耐藥性研究隨著3CLpro抑制劑的使用,，其耐藥問題也日益受到關(guān)注。研究表明,，3CLpro的某些突變可能導(dǎo)致病毒對抑制劑產(chǎn)生耐藥性,。Nuclear Localiation Signal PeptideC5a通過與髓源性抑制細胞 (MDSCs) 膜上的受體C5aR1結(jié)合,，招募MDSCs至炎癥局部，抑制CD8+ T細胞增殖與功能,。

3C蛋白酶是切割小RNA病毒科非結(jié)構(gòu)蛋白的關(guān)鍵酶，在病毒復(fù)制過程中發(fā)揮著重要作用,。鼻病毒屬于小RNA病毒科,，其中的人鼻病毒3C蛋白酶基因編碼區(qū)全長552bp，編碼的蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量約為22000Da,。人鼻病毒3C蛋白酶具有高度的酶切特異性,，能特異切割位于Gln-Gly之間的肽鍵，識別位點為Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro,。本公司將人鼻病毒3C蛋白酶的編碼區(qū)基因,，在大腸桿菌中進行重組表達，純化后獲得了高純度的重組3C蛋白酶,，該蛋白酶能特異切割含有3C酶切位點的融合蛋白,，具有良好的生物學(xué)活性。同時,，本公司生產(chǎn)的3C蛋白酶帶有GST和MAT標簽蛋白,，有利于后期將其從酶切體系中去除。產(chǎn)品性質(zhì):中文別名（Chinesesynonym）:3C蛋白酶英文別名（Englishsynonym）:3CProtease來源（Source）:大腸桿菌表達標簽（label）:GST-3CProtease-MAT純度（Purity）:經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析,，純度>95%分子量（Molecularweight）:47.38kDa比活性（Specificactivity）:500U/ml緩沖液組分（Buffer）:50mMTris-HCl,，150mMNaCl，1mMEDTA,，1mMDTT,，pH7.0酶活定義（UnitDefinition）:在緩沖液中切割100μg被檢測的融合蛋白，反應(yīng)條件為4℃16小時,切割率≥90%運輸和保存方法:干冰運輸,；保存于-20℃,。

RecombinantBiotinylatedHumanHBV(HLA-A*02:01)Protein,His-AviTag性能參數(shù)表達區(qū)間及表達系統(tǒng)（Source）RecombinantBiotinylatedHumanHBV(HLA-A*02:01)ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-terminalItcontainsGly25-Thr305(HLA-A*02:01),Ile21-Met119(B2M)andFLLTRILTIpeptide.[Accession|A0A140T913(HLA-A*02:01)&P61769(B2M)&FLLTRILTIpeptide]分子量大小（MolecularWeight）TheproteinhasapredictedMWof50.5kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto52-62kDabasedonTris-BisPAGEresult.（Endotoxin）Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度（Purity）>95%asdeterminedby>95%asdeterminedbyHPLC制劑（Formulation）Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重構(gòu)方法（Reconstitution）Centrifugetubesbeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.α-凝血酶是研究血液凝固機制和血栓性疾病發(fā)展的主要靶點,。重組α-凝血酶用于體外測定,。

透明質(zhì)酸酶，英文名稱Hyaluronidase,，一類能夠降低體內(nèi)透明質(zhì)酸活性的酶的總稱,，結(jié)構(gòu)上由4個相同亞基構(gòu)成，每個亞基分子量接近14kDa,，該酶是一種糖蛋白,，包含5%的甘露糖和2.2%的葡萄糖胺。功能上該酶可隨機裂解透明質(zhì)酸,、軟骨素和硫酸軟骨素中的β-N-乙酰己糖胺-[1→4]糖苷鍵,。常與膠原酶聯(lián)合使用于降解細胞外基質(zhì)，從而從組織中分離活細胞。本品來源于牛睪丸,，活力值為400–1,000units/mg,，合適的pH值為4.5–6.0。產(chǎn)品性質(zhì)中文別名（ChineseSynonym）玻璃糖醛酸酶,；玻璃酸酶英文別名（EnglishSynonym）Hyaluronoglucosaminidase,；Hyaluronate4-glycanohydrolaseCAS號（CASNO.）37326-33-3來源（Source）牛睪丸分子量（MolecularWeight）~55kDa類型（Type）I-S外觀（Appearance）淡黃色至米黃色至褐色粉末常用的跨膜蛋白表達系統(tǒng)包括大腸桿菌表達系統(tǒng)、酵母表達系統(tǒng),、昆蟲細胞表達系統(tǒng)和哺乳動物細胞表達系統(tǒng)等,。Recombinant Mouse CD83 Protein,hFc Tag

在蛋白質(zhì)工程中，PNGase F可以用于改變蛋白質(zhì)的糖基化模式,，以研究糖基化對蛋白質(zhì)功能的影響,。Recombinant Cynomolgus SPARC Protein,His Tag

膠原蛋白是哺乳動物體內(nèi)含量多的功能性蛋白[1]。膠原蛋白由3條α鏈的多肽鏈亞基組成,，α鏈自身構(gòu)型為左手螺旋,，三條α鏈又互相纏繞成右手螺旋結(jié)構(gòu)，即膠原蛋白的“膠原域”[2],。膠原蛋白的一級結(jié)構(gòu)分析結(jié)果顯示,，其肽鏈由(Gly-X-Y)n組成，其中X通常是脯氨酸,，Y通常是羥脯氨酸[3],。按照膠原蛋白發(fā)現(xiàn)的先后順序，可將其分為Ⅰ型,、Ⅱ型,、Ⅲ型等28種膠原蛋白[4]，Ⅰ型膠原蛋白分子組成為[α1(Ⅰ)]2α2(Ⅰ),，主要分布于骨骼中[5],；Ⅱ型膠原蛋白由[α1(Ⅱ)]3組成，主要由軟骨細胞產(chǎn)生,，因其含有大量賴氨酸殘基,，因而糖基化率較高[6]；Ⅲ型膠原蛋白分子組成為[α1(Ⅲ)]3,，因含半胱氨酸所以肽鏈間形成二硫鍵,，因此其本身就可形成細纖維，Ⅲ型膠原蛋白血管中含量較高,，主要存在于肺泡間質(zhì)中且分布雜亂,，因而形成復(fù)雜的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，正是這種結(jié)構(gòu)使得肺組織具有良好的柔韌性與彈性,，并且可以為細胞提供充足養(yǎng)分,，使得皮膚飽滿透亮[7],。Recombinant Cynomolgus SPARC Protein,His Tag