除了His標(biāo)簽和GST標(biāo)簽,,還有多種融合伴侶技術(shù)可以用于提高蛋白的表達(dá)和純度,,包括但不限于以下幾種:1.Flag標(biāo)簽:Flag是一個(gè)八肽序列(DYKDDDDK),,可以通過抗Flag標(biāo)簽的抗體進(jìn)行免疫沉淀或西方印跡分析,有助于提高蛋白的純度,。2.Fc融合蛋白:Fc標(biāo)簽是免疫球蛋白的恒定區(qū),,可以提高蛋白在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的溶解性和穩(wěn)定性,并且可以通過蛋白A親和層析進(jìn)行純化,。3.人血清白蛋白(HSA):HSA作為融合伴侶可以提高蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,,延長(zhǎng)半衰期,并通過其固有的結(jié)合特性進(jìn)行純化,。4.轉(zhuǎn)鐵蛋白:轉(zhuǎn)鐵蛋白可以作為融合伴侶,利用其與鐵的高親和力進(jìn)行純化,,并且有助于提高蛋白的穩(wěn)定性。5.XTEN聚合物:XTEN是一種柔性的多肽聚合物,,可以提高蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,有助于防止聚集,。6.彈性蛋白樣多肽(ELP):ELP具有可逆的熱響應(yīng)性質(zhì),,可以通過溫度誘導(dǎo)的相分離進(jìn)行純化,有助于提高純度,。7.Strep標(biāo)簽:Strep標(biāo)簽是一個(gè)短肽序列,,可以通過Strep-Tactin親和層析進(jìn)行高效率的純化,。8.MBP融合蛋白:麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)可以作為融合伴侶,提高蛋白的溶解性,,并通過親和層析進(jìn)行純化,。。50×TAE粉劑憑借其高效,、經(jīng)濟(jì)和穩(wěn)定的特點(diǎn),成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中理想的緩沖液選擇,。福建CHO細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)技術(shù)服務(wù)研發(fā)
CRISPR-Cas9技術(shù)在金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)基因組編輯中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:1.基因敲除與功能研究:通過設(shè)計(jì)特定的sgRNA,,利用CRISPR-Cas9技術(shù)可以高效地在金黃色葡萄球菌基因組中實(shí)現(xiàn)基因敲除,進(jìn)而研究這些基因的功能,。例如,,研究者利用CRISPR-Cas9技術(shù)成功構(gòu)建了srtA基因敲除的金黃色葡萄球菌,分析其對(duì)菌株毒力的影響,。2.耐藥性研究手段開發(fā):金黃色葡萄球菌,,特別是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)和耐萬古霉素金黃色葡萄球菌(VRSA),,因其耐藥性帶來了巨大挑戰(zhàn)。CRISPR-Cas9技術(shù)可用于研究耐藥機(jī)制,,并開發(fā)新型手段,。季泉江教授課題組與韓大力研究員課題組合作,在金黃色葡萄球菌中建立了單堿基編輯技術(shù),,有助于加快耐藥機(jī)制研究和藥物靶標(biāo)發(fā)現(xiàn),。3.基因編輯技術(shù)的優(yōu)化:CRISPR-Cas9技術(shù)在金黃色葡萄球菌中的應(yīng)用還包括對(duì)編輯技術(shù)的優(yōu)化。例如,,研究者開發(fā)了基于CRISPR/Cas9的單質(zhì)粒系統(tǒng),,允許在金黃色葡萄球菌中進(jìn)行快速有效的染色體操作,該系統(tǒng)可以實(shí)現(xiàn)無標(biāo)記,、和快速的遺傳操作,,加速了金黃色葡萄球菌基因功能的研究。天津人源膠原蛋白開發(fā)技術(shù)服務(wù)開發(fā)Plant Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)是一種專門針對(duì)植物樣本設(shè)計(jì)的高效PCR預(yù)混液,,它無需提取DNA,。
TthDNAPolymerase的高保真性能TthDNAPolymerase具有較高的保真度,在DNA合成過程中能準(zhǔn)確地識(shí)別和配對(duì)堿基,,減少錯(cuò)誤摻入的發(fā)生,。其獨(dú)特的活性中心結(jié)構(gòu)使其對(duì)底物具有高度選擇性,降低了堿基錯(cuò)配的概率,。在基因克隆,、測(cè)序等對(duì)準(zhǔn)確性要求極高的實(shí)驗(yàn)中,能夠保證合成的DNA序列與模板高度一致,,為后續(xù)的研究提供了可靠的基因材料,,避免因堿基突變導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差,保障了分子生物學(xué)研究的科學(xué)性和嚴(yán)謹(jǐn)性,。TthDNAPolymerase的反應(yīng)速度此酶的催化反應(yīng)速度較快,,能夠在較短時(shí)間內(nèi)完成DNA鏈的延伸。在PCR反應(yīng)中,,它可以快速地添加核苷酸到引物的3'-OH末端,,使得目標(biāo)DNA片段的擴(kuò)增效率顯著提高。例如在大規(guī)模的基因篩查實(shí)驗(yàn)中,,快速的反應(yīng)速度能夠在短時(shí)間內(nèi)獲得大量的擴(kuò)增產(chǎn)物,,節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,加快了研究進(jìn)程,,滿足了現(xiàn)代分子生物學(xué)高通量,、高效率的實(shí)驗(yàn)需求。
Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE):DNA電泳的高效選擇在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,,瓊脂糖凝膠電泳是分析DNA片段大小和純度的常用技術(shù),,而Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE)作為經(jīng)典的緩沖液之一,,因其高效、穩(wěn)定和經(jīng)濟(jì)的特點(diǎn),,成為實(shí)驗(yàn)室中不可或缺的工具,。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE)的主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、硼酸和EDTA(乙二胺四乙酸),。這種配方能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保DNA片段的清晰分離,。高效分離:TBE緩沖液具有較高的離子強(qiáng)度,,適合分離小分子量的DNA片段。它能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的電流,,確保DNA條帶清晰,、分辨率高。兼容性強(qiáng):TBE緩沖液適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),,滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。經(jīng)濟(jì)實(shí)用:5×的高濃度設(shè)計(jì)使得該緩沖液在使用時(shí)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活稀釋,,減少浪費(fèi),,降低實(shí)驗(yàn)成本。穩(wěn)定性高:液體形式的TBE緩沖液在保存和使用過程中更加穩(wěn)定,,只需按照說明稀釋即可使用,,無需額外配制。使用方法使用Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE)時(shí),,需按照以下步驟操作:稀釋緩沖液:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,,取適量的5×TBE緩沖液,加入去離子水稀釋至1×工作液,。Plant Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)表現(xiàn)出色,。它能夠耐受植物樣本中的多種抑制物,,如多糖,、酚類等。
λ DNA HindIII + EcoRI:精細(xì)的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)λ DNA HindIII + EcoRI 是一種廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),,由λ噬菌體DNA經(jīng)HindIII和EcoRI兩種限制性酶完全酶切后制備而成,。這種酶切產(chǎn)物包含多條不同長(zhǎng)度的DNA片段,能夠?yàn)镈NA片段的大小分析提供精確的參考,。產(chǎn)品特點(diǎn)片段組成:λ DNA HindIII + EcoRI Marker 包含12-13條雙鏈DNA片段,,片段大小范圍從125 bp到21,226 bp。這些片段覆蓋了從小片段到大片段的廣范圍,,適用于多種DNA分析場(chǎng)景,。即用型設(shè)計(jì):產(chǎn)品已預(yù)混1×Loading Buffer,,可直接上樣,無需額外處理,。穩(wěn)定性高:在-20℃下可長(zhǎng)期保存,,室溫下也能穩(wěn)定保存6個(gè)月。使用方法預(yù)熱處理:為獲得清晰的電泳圖像,,建議在65℃加熱5分鐘,,然后立即冰浴3分鐘。上樣量:根據(jù)加樣孔的大小,,取2-5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中,。電泳條件:推薦使用1.0%的瓊脂糖凝膠,電泳電壓4-10 V/cm,,電泳時(shí)間45分鐘,。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,,紫外燈下觀察,。注意事項(xiàng)預(yù)熱的重要性:如果不進(jìn)行預(yù)熱處理,21,226 bp和3,530 bp的片段可能會(huì)結(jié)合形成24,756 bp的額外條帶,,同時(shí)3,530 bp的亮度會(huì)明顯減弱,。其穩(wěn)定的性能和清晰的條帶,使得實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加可靠,,更好地提高了實(shí)驗(yàn)效率,。天津漢遜酵母表達(dá)人膠原蛋白技術(shù)服務(wù)研發(fā)
Ultra-Long Master Mix (2×)(With Dye)適用于多種長(zhǎng)片段PCR應(yīng)用,包括但不限于基因組測(cè)序,、基因克隆,。福建CHO細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)技術(shù)服務(wù)研發(fā)
50×TAE是一種高濃度的緩沖液,主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷),、醋酸鈉和EDTA(乙二胺四乙酸),。它是一種常用的電泳緩沖液,廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳中,,用于分離和分析DNA片段,。50×TAE的優(yōu)勢(shì)高效分離:TAE緩沖液在低濃度下具有較低的離子強(qiáng)度,適合分離大分子量的DNA片段,。它能夠提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,,確保DNA在電泳過程中保持完整的結(jié)構(gòu)。兼容性強(qiáng):50×TAE適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,,無論是低濃度還是高濃度的凝膠,,都能提供良好的分離效果。此外,它還兼容多種核酸染料,,如EB,、GoldView等。經(jīng)濟(jì)實(shí)用:50×TAE的高濃度設(shè)計(jì)(50倍濃縮)使其在使用時(shí)只需稀釋至工作濃度(1×TAE),,減少了儲(chǔ)存空間和使用成本,。使用方法使用50×TAE時(shí),通常需要將其稀釋至1×工作濃度,。具體操作如下:取適量50×TAE液體,。按照1:49的比例加入去離子水,使其稀釋至1×TAE,。配制好的1×TAE可用于制備瓊脂糖凝膠或作為電泳槽的緩沖液,。在電泳過程中,1×TAE能夠提供穩(wěn)定的電流和電壓條件,,確保DNA片段在凝膠中均勻遷移,。此外,TAE緩沖液在電泳結(jié)束后也便于后續(xù)的DNA回收和純化操作,。保存與注意事項(xiàng)50×TAE液體應(yīng)保存在室溫或4℃條件下,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在高溫或強(qiáng)光下。福建CHO細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)技術(shù)服務(wù)研發(fā)