慢病毒載體既可以轉(zhuǎn)導(dǎo)分裂細(xì)胞也可以轉(zhuǎn)導(dǎo)非分裂細(xì)胞，被認(rèn)為是安全的,，并且可以提供長期的轉(zhuǎn)基因表達(dá),，是目前較通用的基因轉(zhuǎn)移方法之一。因慢病毒載體能有效地轉(zhuǎn)導(dǎo)靶細(xì)胞,，如造血干細(xì)胞和T細(xì)胞，在細(xì)胞和基因藥物中的應(yīng)用越來越guang泛,。源自人類胚胎腎細(xì)胞的HEK293細(xì)胞系是成熟的生產(chǎn)LV的系統(tǒng),，因為它們非常適合懸浮培養(yǎng)并且易于轉(zhuǎn)染。在無血清培養(yǎng)基中的懸浮培養(yǎng)在大規(guī)模生產(chǎn)中具有優(yōu)勢,，因為它消除了批次之間的差異并降低了不定因子污染的風(fēng)險,。M-SAN HQ ELISA kit規(guī)格是12*8 strip，提高使用效率,。海南等滲條件中鹽核酸酶

對于含包膜的病毒載體,，如慢病毒LV,、逆轉(zhuǎn)錄病毒RV等，在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中收獲,。而M-SAN HQ中鹽核酸酶,，作為市場上更適合生理鹽條件的核酸酶，所以,，M-SAN HQ成了包膜病毒載體生產(chǎn)的更好選擇,。優(yōu)勢在于：1. M-SAN HQ兼容多種細(xì)胞培養(yǎng)體系，在細(xì)胞培養(yǎng)鹽濃度條件下具有更優(yōu)活性,；2. M-SAN HQ酶活更高,、酶切速度更快，縮短孵育時間,；3. M-SAN HQ能夠高效剪切染色質(zhì)到更小片段,，簡化下游工藝流程；4. 相比Benzonase,，M-SAN HQ用量減少1/2-2/3,，降低了酶用量及生產(chǎn)成本。云南中鹽核酸酶70950M-SAN HQ中鹽核酸酶用在生產(chǎn)工藝流程中,，在生理鹽條件下去除雙鏈及單鏈的DNA及RNA,。

宿主細(xì)胞DNA殘留的擔(dān)憂是基于致ai風(fēng)險理論，特別是生產(chǎn)細(xì)胞系所包含的致ai序列,，比如較常見腺病毒基因E1A和E1B（HEK293, PerC.6 和CAP 細(xì)胞系）,，人乳tou瘤病毒E6和E7基因（HeLa細(xì)胞系)等。當(dāng)使用致ai細(xì)胞系生產(chǎn)AAV時,，下游純化須盡可能減少殘留DNA,。工業(yè)上一般使用核酸酶分解殘留DNA，普遍認(rèn)為小于200 bp的DNA片段可有效降低致ai風(fēng)險,。宿主細(xì)胞蛋白殘留與免疫原性,、炎癥或過敏性休克有關(guān)。盡管與非人類的生產(chǎn)原料相比（非人類細(xì)胞系如BHK21或昆蟲細(xì)胞,，以及輔助病毒如HSV,、腺病毒、桿狀病毒）,，人類細(xì)胞免疫原性比較弱,。

逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以將7.5Kb左右外源基因整合入靶細(xì)胞基因組,，并穩(wěn)定持久地表達(dá),，已經(jīng)在批準(zhǔn)的CAR-T產(chǎn)品和許多臨床產(chǎn)品中得到應(yīng)用。Shou個成功的基因藥物臨床試驗是利用小鼠白血病病毒(Murin Leukemia Virus,MLV,，gamma逆轉(zhuǎn)錄病毒)作為基因轉(zhuǎn)移載體醫(yī)治兒童的X性染色體連鎖嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷（SCID-X1）,。目前上市的6個細(xì)胞藥物產(chǎn)品全部采用逆轉(zhuǎn)錄病毒（3個為gamma逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,，3個慢病毒載體）作為基因轉(zhuǎn)移載體。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體目前常用的主要有兩個：gamma逆轉(zhuǎn)錄病毒載體(Retroviral vector,RV)和慢病毒載體(Lentivirus vector,LV),。兩種病毒均屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科,，在自身攜帶的逆轉(zhuǎn)錄酶催化下將其正鏈RNA均逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。病毒顆粒比較大,，約為100nm（70-100nm,，有的至200nm）,外層為表面突起的脂蛋白套膜，套膜內(nèi)為20面體的衣殼（capsid）,核衣殼內(nèi)由一螺旋結(jié)構(gòu)的核酸,。相比全能核酸酶,，M-SAN HQ中鹽核酸酶能將HCD酶切成更小片段，破壞核小體結(jié)構(gòu),。

殘留的宿主DNA是生產(chǎn)中產(chǎn)生的雜質(zhì),，其存在潛在的致瘤性、傳染性和免疫原性等風(fēng)險,。相關(guān)研究表明,，基因的大小普遍在200bp以上，因此大于200bp有可能會有一定的致病性,，而且殘留DNA片段越大,，生物制品的風(fēng)險等級越高。因此,，各國監(jiān)管機(jī)構(gòu)對其提出了嚴(yán)格要求。美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）在《關(guān)于人類基因zhiliao新產(chǎn)品生產(chǎn)指導(dǎo)文件》中明確指出HCD的片段要小于200bp,。2022年5月,，國家藥品監(jiān)督管理局藥品評審中心（CDE）發(fā)布的《體內(nèi)基因藥物產(chǎn)品藥學(xué)研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》中也明確指出需對DNA殘留量和殘留片段大小進(jìn)行控制，建議盡量將DNA殘留片段的大小控制在200bp以下,。中鹽核酸酶的生產(chǎn)在符合ISO13485:2016體系基礎(chǔ)上,，增加了cGMP相應(yīng)要求,。湖南等滲條件中鹽核酸酶70950-202

中鹽核酸酶具有純度高（≥99%）,、 內(nèi)毒水平低（<0.25EU/1kU）的特點(diǎn)；海南等滲條件中鹽核酸酶

在生物工藝中,，核酸酶的主要作用是高效消化宿主細(xì)胞DNA（HCD）,，并將其分解成足夠小的片段，以便在下游純化過程中去除,。雖然大多數(shù)核酸酶可以在生理鹽條件下高效地將裸DNA降解成微小片段,，比如Benzonase和SANs都可以把dsDNA分解成小于8nt的寡核苷酸鏈，但實際生產(chǎn)中的核酸污染情況更加復(fù)雜,。HCD通常以染色質(zhì)形式存在,，與細(xì)胞裂解碎片,、病毒顆粒等結(jié)合在一起，影響核酸酶的識別及剪切,。因此,，HCD去除的關(guān)鍵在于——核酸酶如何在復(fù)雜的生產(chǎn)體系中識別并剪切HCD。海南等滲條件中鹽核酸酶