在生物工藝流程中，需要使用核酸酶去除終產(chǎn)品中的核酸污染,，而核酸酶作為外源成份,，也需要在生產(chǎn)流程中去除。核酸酶去除工藝包括熱滅活法,、酶抑制劑,、離子交換和親合層析法等。慢病毒LV的pI在6.0-6.5左右,，包裝了完整基因組DNA后的AAV病毒顆粒PI大致為5.9,，來自于S.marcescens的全能核酸酶pI 6.85左右，M-SAN HQ中鹽核酸酶pI 8.7左右,。因此,，在同樣的條件下，從LV/AAV溶液中去除M-SAN HQ中鹽核酸酶比去除Benzonase全能核酸酶更容易,、更徹底,。ArcticZymes致力于提供高質(zhì)量產(chǎn)品，中鹽核酸酶具有好的批間一致性,、穩(wěn)定可靠的質(zhì)量,。廣東中鹽核酸酶70950-202

?通過三質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)體系生產(chǎn)病毒載體,，會引入宿主細(xì)胞DNA殘留（HCD）、蛋白殘留（HCP）,、工藝雜質(zhì)（如antibiotics,、核酸酶等外源物質(zhì)）等污染，存在潛在的致瘤性和免疫原性等風(fēng)險,。藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)一般允許生物制品中存在10ng/dose以下的殘留DNA,。此外，根據(jù)雜質(zhì)來源,、工藝以及產(chǎn)品類型不同,，也會對HCD限度做不同要求。為了達(dá)到這個要求,，一般通過核酸酶處理和色譜聯(lián)用的方法,。一般在細(xì)胞培養(yǎng)液裂解/收獲、澄清收獲及超濾濃縮等環(huán)節(jié)加入核酸酶處理,，需要工藝摸索來確認(rèn)處理方式,。廣東中鹽核酸酶70950-202US FDA指南要求：重組biologics終產(chǎn)品中，核酸雜質(zhì)含量低于10ng/dose,。

對于含包膜的病毒載體,，如慢病毒LV、逆轉(zhuǎn)錄病毒RV等,，在細(xì)胞培養(yǎng)上清液中收獲,。而M-SAN HQ中鹽核酸酶，作為市場上更適合生理鹽條件的核酸酶,，所以,，M-SAN HQ成了包膜病毒載體生產(chǎn)的更好選擇。優(yōu)勢在于：1. M-SAN HQ兼容多種細(xì)胞培養(yǎng)體系,，在細(xì)胞培養(yǎng)鹽濃度條件下具有更優(yōu)活性,；2. M-SAN HQ酶活更高、酶切速度更快,，縮短孵育時間,；3. M-SAN HQ能夠高效剪切染色質(zhì)到更小片段，簡化下游工藝流程,；4. 相比Benzonase,，M-SAN HQ用量減少1/2-2/3，降低了酶用量及生產(chǎn)成本,。

ArcticZymes Technologies成立于20世紀(jì)80年代后期,，致力于從海洋生物中識別新的冷適應(yīng)酶。ArcticZymes目標(biāo)明確,，推進(jìn)分子研究,、診斷和therapeutics領(lǐng)域的發(fā)展,。30多年來，ArcticZymes只專注于酶學(xué)研究,，匯集一批志同道合的科學(xué)家,，在酶學(xué)領(lǐng)域追求zhuoyue、勇于創(chuàng)新,。ArcticZymes開發(fā)創(chuàng)新解決方案,，與客戶緊密協(xié)作，提升產(chǎn)品品質(zhì),，從高質(zhì)量到zhuoyue,，達(dá)成他們的目標(biāo)，重新定義生物藥生產(chǎn)的邊界,。在ArcticZymes,，我們精心設(shè)計解決方案，以從未出現(xiàn)的方式推動行業(yè)向前發(fā)展,。中鹽核酸酶能夠?qū)捂溂半p鏈的DNA及RNA,，消化成5個堿基為主的寡核苷酸oligos。

逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以將7.5Kb左右外源基因整合入靶細(xì)胞基因組,，并穩(wěn)定持久地表達(dá),，已經(jīng)在批準(zhǔn)的CAR-T產(chǎn)品和許多臨床產(chǎn)品中得到應(yīng)用。Shou個成功的基因藥物臨床試驗是利用小鼠白血病病毒(Murin Leukemia Virus,MLV,，gamma逆轉(zhuǎn)錄病毒)作為基因轉(zhuǎn)移載體醫(yī)治兒童的X性染色體連鎖嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷（SCID-X1）,。目前上市的6個細(xì)胞藥物產(chǎn)品全部采用逆轉(zhuǎn)錄病毒（3個為gamma逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，3個慢病毒載體）作為基因轉(zhuǎn)移載體,。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體目前常用的主要有兩個：gamma逆轉(zhuǎn)錄病毒載體(Retroviral vector,RV)和慢病毒載體(Lentivirus vector,LV),。兩種病毒均屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科，在自身攜帶的逆轉(zhuǎn)錄酶催化下將其正鏈RNA均逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,。病毒顆粒比較大，約為100nm（70-100nm,，有的至200nm）,外層為表面突起的脂蛋白套膜,，套膜內(nèi)為20面體的衣殼（capsid）,核衣殼內(nèi)由一螺旋結(jié)構(gòu)的核酸。M-SAN HQ ELISA kit檢測產(chǎn)品能定量檢測該核酸酶,，與中鹽核酸酶搭配用在medicine生產(chǎn),。山東等滲條件中鹽核酸酶70950-202

ArcticZymes廠家管控整個供應(yīng)鏈及生產(chǎn)流程，協(xié)助客戶進(jìn)行文件審計及現(xiàn)場審計,。廣東中鹽核酸酶70950-202

在不同的鹽濃度條件下,，AAV病毒載體的存在形式不同。低鹽濃度條件下,，AAV病毒顆粒表面會通過電荷作用等非特異結(jié)合到HCD上,，從而產(chǎn)生病毒顆粒團(tuán)聚現(xiàn)象,。隨著溶液鹽濃度上升，AAV病毒顆粒與HCD的離子相互作用會被破壞,，AAV病毒顆粒會逐漸解離,。當(dāng)鹽濃度升到更高范圍（>400mM左右），AAV病毒顆粒與HCD的結(jié)合更弱,，AAV顆粒更穩(wěn)定,。因此，在高鹽濃度溶液中,，AAV顆粒更加穩(wěn)定,，且有數(shù)據(jù)表明高鹽濃度不會削弱AAV的侵染能力。所以,，我們推薦提高AAV病毒生產(chǎn)中的鹽濃度,。廣東中鹽核酸酶70950-202