RNA提取試劑的選擇:選擇合適的提取試劑是較重要的一步。好的提取試劑在確保成功的同時,,操作方便且經(jīng)濟(jì)實(shí)用,。對于動物組織、簡單的植物材料,、各種微生物,、培養(yǎng)細(xì)胞的totalRNA提取,,Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市,,進(jìn)一步豐富了TakaraRNA提取的產(chǎn)品線,。該產(chǎn)品采用了獨(dú)特的細(xì)胞裂解系統(tǒng),無需苯酚氯仿抽提等步驟,,簡單快捷,。組織或細(xì)胞裂解后,提取操作光需20分鐘便可完成適用樣品:全血,,哺乳動物細(xì)胞,,細(xì)菌細(xì)胞和菌類細(xì)胞。天津正規(guī)RNA提取試劑廠家推薦
新型土壤總RNA快速提取試劑盒:獨(dú)特裂解劑/裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶,,然后RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于玻璃奶,,然后將粗純化的玻璃奶轉(zhuǎn)移到離心柱,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,漂洗液將腐植酸,、細(xì)胞代謝物,、蛋白等雜質(zhì)去除,較后低鹽的洗脫緩沖液將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫,。試劑盒特點(diǎn):離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好,??朔藝a(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。兼容性強(qiáng),,適用于各種不同的土壤,、糞便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟,??焖伲喗?,單個樣品操作一般可在1小時內(nèi)完成,。多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達(dá)1.9以上,,可直接用于PCR,,Northern-blot和各種酶切反應(yīng)~上海正規(guī)RNA提取試劑單價血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對血清、血漿樣本中miRNA提取而開發(fā)的,。
對RNA的科學(xué)研究,,首先要從植物或者動物等組織中提取出合格的RNA。在實(shí)際RNA提取中,,有幾個提取原則:1,、保證RNA一級結(jié)構(gòu)的完整性,;2、提取的RNA樣品中不應(yīng)存在對酶存在壓制作用的有機(jī)溶劑及過高濃度的金屬離子,;3,、其他生物大分子如蛋白質(zhì)、多糖和脂類分子的污染應(yīng)降低到較低程度,;4,、排除其它核酸分子(DNA)的污染。常用RNA提取方法有:1TRIzol法,;2TRIzol+過柱法,;3CTAB+過柱法;4試劑盒法,。RNA提取試劑盒BiomarkerPlantTotalRNAIsolationKit(Polysaccharides&Polyphenolics–rich),,能從植物組織,特別是富含多糖多酚或淀粉的植物組織(如成熟水稻葉片,,棉花葉片,,擬南芥種子,香蕉,,馬鈴薯塊莖,,蘋果,西瓜果肉,,獼猴桃,,梨,月季等)中快速提取總RNA,,同時可以處理大量不同樣品,。
法爾和梅洛的發(fā)現(xiàn)??茖W(xué)家在矮牽?;▽?shí)驗(yàn)中所觀察到的奇怪現(xiàn)象,其實(shí)是因?yàn)樯矬w內(nèi)某種特定基因“沉默”了,。導(dǎo)致基因“沉默”的機(jī)制就是RNA干擾機(jī)制,。此前,RNA分子只是被當(dāng)作從DNA(脫氧核糖核酸)到蛋白質(zhì)的“中間人”,、將遺傳信息從“藍(lán)圖”傳到“工人”手中的“信使”。但法爾和梅洛的研究讓人們認(rèn)識到,,RNA作用不可小視,,它可以使特定基因開啟、關(guān)閉,、更活躍或更不活躍,,從而影響生物的體型和發(fā)育等,。諾貝爾獎評審會在評價法爾和梅洛的研究成果時說:“他們的發(fā)現(xiàn)能解釋許多令人困惑、相互矛盾的實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果,,并揭示了控制遺傳信息流動的自然機(jī)制,。這開啟了一個新的研究領(lǐng)域?!奔?xì)胞裂解后,,細(xì)胞釋放出蛋白質(zhì)、DNA,、RNA等物質(zhì),。
酵母總RNA快速提取試劑盒(離心柱型):一、原理簡介,。改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶,,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物,、蛋白等雜質(zhì)去除,,較后低鹽的RNasefreewater將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。二,、試劑盒特點(diǎn):1,、離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,,可重復(fù)性好,。克服了國產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端,。2,、結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點(diǎn),,不需要異丙醇沉淀和乙醇洗滌過程,,RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過度干燥不易溶解問題。3,、獨(dú)有的RL裂解液配方,,可以有效的消除基因組污染。4,、多次漂洗去蛋白過程,,提取RNA純度更高。5,、有效的去除了無用的5S在總RNA中含量,,提高了純度~植物花總RNA提取試劑盒:40~60分鐘內(nèi)即可完成提取過程,提取的總RNA純度高,。正規(guī)RNA提取試劑直銷廠家
RNA存在于水相中,。水相轉(zhuǎn)移后,,RNA通過異丙醇沉淀回收。天津正規(guī)RNA提取試劑廠家推薦
RNA提?。侯A(yù)備工作(1)塑料制品:盡量使用一次性無菌塑料制品,。已標(biāo)明RNase-free的塑料制品,如沒有開封使用過,,通常不必再處理,。處理的步驟如下:O在玻璃燒杯中注入去離子水,加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%(DEPC-H2O),。(DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強(qiáng)的劇毒物,,須在通風(fēng)櫥中小心使用)O將待處理的塑料制品放入一個可以高溫滅菌的容器中,注入DEPC-H2O,,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中,,在通風(fēng)柜中37℃或室溫下處理過夜。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中,,將裝有DEPC-H2O處理過的塑料制品的容器以鋁箔封口,,高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。O滅菌塑料制品烘烤干燥,,置潔凈處備用,。(2)玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時以上。天津正規(guī)RNA提取試劑廠家推薦
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