鼠尾膠原簡介：鼠尾I型膠原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備，純度達到95%以上,，可溶于0.006mol/L乙酸,。本品可用于細胞培養(yǎng)皿的包被,，特別適合普通細胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細胞的培養(yǎng),；也可用于制備三維膠原凝膠,，使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：1,、SDS-PAGE分析純度大于95%,。2、無菌檢驗結(jié)果為陰性,。3,、本品2μg/cm2包被細胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細胞，貼壁及生長正常,。4,、本品濃度1mg/mL，pH7.0時形成具有一定強度的三維膠原凝膠,，NIH-3T3細胞在三維凝膠內(nèi)生長正常,、PC-12細胞在三維凝膠表面生長正常。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解,。重慶正規(guī)鼠尾膠原廠家

鼠尾膠原：鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基和一種天然的黏附劑,。實驗設(shè)備及材料：大鼠尾巴、剪刀,、鑷子,、止血鉗、彎頭吸管,、平皿,、三角燒瓶、燒杯,、量筒,、天平、生理鹽水,、75%酒精,、0.1%醋酸溶液、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆、鼠尾膠原,。實驗內(nèi)容：1,、制備鼠尾膠原（兩個同學(xué)一組操作）。2,、切割小玻片,。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi)。制備鼠尾膠原：1,、取大鼠尾巴洗凈,，75%酒精浸泡5分鐘；2,、手持尾巴,，用止血鉗夾住鼠尾的，折斷尾骨后拉出尾腱,；3,、將尾腱剪斷置于平皿中，生理鹽水浸泡,；4,、重復(fù)步驟2、3,，直至尾腱量夠用,；5、吸去生理鹽水,，將尾腱稱重（0.5-1克）,；6、將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎,，轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中,；7、按每克尾腱50ml的比例,，加入0.1%醋酸溶液,；8、搖晃,，使尾腱分散于醋酸溶液中,，4℃放置一星期,；9,、離心，4000轉(zhuǎn)/分,，10-15分鐘,；10、吸取上清,，分裝成小瓶,，4℃保存。北京正規(guī)鼠尾膠原價格鼠尾型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,。

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：三維膠原的制備鼠尾膠原蛋白型在濃度1mg/ml以上,，pH左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml,。膠原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成膠過程中需要加入0.06體積的0.1mol/LNaOH來中和,。需要的溶液（均需要無菌,、預(yù)冷）10mg/L酚紅用于pH指示）0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一般不用),，雙蒸水200ul鼠尾膠原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,，加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)）立即混勻,。再加入100ul10PBS10培養(yǎng)液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時需要用pH試紙測試),。

鼠尾Ⅰ型膠原：組裝液的配置：1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL，用1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2,。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中,，倒入0.5mL自組裝液，室溫放置20min,。予自組裝液自組裝24h,。吸取0.05%戊二醛2mL至小培養(yǎng)皿中，將自組裝24h的膠原浸泡在戊二醛中,。然后將膠原經(jīng)去離子水,、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后進行TEM觀察,。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10mmol/L二水氯化鈣+150mmol/L氯化鈉+50mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中,，滴入聚丙烯(PAA)至濃度350μg/mL；滴加1mol/L的氯化氫,，調(diào)節(jié)酸堿度至7.4,，然后緩慢滴入25mL磷液(6mmol/L磷酸氫二鈉)，約16滴/min,。鼠尾膠原蛋白用于培養(yǎng)容器等實驗室設(shè)備的內(nèi)部涂層,。

膠原蛋白是脊椎動物和無脊椎動物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚,、筋,、軟骨、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì),。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,，不論來源于哪一種動物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸，有脯氨酸和羥脯氨酸,。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,，膠原蛋白分為20幾個亞型。但較為常見的為Ι,、Π,、ΙΙΙ型膠原蛋白，即間質(zhì)膠原蛋白,。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,。整個操作請于冰上進行，因室溫下鼠尾膠原I可迅速成膠,。杭州鼠尾膠原進貨價

酸法是提取膠原蛋白比較常用和有效的方法,，用酸法提取的膠原較大程度地保持了其三股螺旋結(jié)構(gòu)。重慶正規(guī)鼠尾膠原廠家

膠原的立體結(jié)構(gòu)與一般的球狀蛋白質(zhì)完全不同,，每一條亞基形成一股左手旋轉(zhuǎn)的螺旋,，其中每3個氨基酸殘基形成一圈螺旋。3條左手螺旋再扭在一起形成一個右手大螺旋,。這樣的螺旋稱為3股螺旋,。小的甘氨酸殘基位于3股螺旋內(nèi)部。3股螺旋式的棒狀膠原分子的大小約是3000×15埃,，這些棒狀分子首尾相連,，并側(cè)向排列形成膠原微絲（其直徑可從50埃至數(shù)千埃）。膠原分子在兩端及沿軸向每隔680埃的距離存在極性區(qū),，這些極性區(qū)能和重金屬離子結(jié)合,，使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu)。重慶正規(guī)鼠尾膠原廠家

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