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RNA提?。侯A(yù)備工作(1)塑料制品:盡量使用一次性無菌塑料制品,。已標(biāo)明RNase-free的塑料制品,如沒有開封使用過,,通常不必再處理,。處理的步驟如下:O在玻璃燒杯中注入去離子水,加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%(DEPC-H2O),。(DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強(qiáng)的劇毒物,須在通風(fēng)櫥中小心使用)O將待處理的塑料制品放入一個(gè)可以高溫滅菌的容器中,,注入DEPC-H2O,,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中,在通風(fēng)柜中37℃或室溫下處理過夜,。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中,,將裝有DEPC-H2O處理過的塑料制品的容器以鋁箔封口,高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘,。O滅菌塑料制品烘烤干燥,,置潔凈處備用。(2)玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時(shí)以上,。植物花總RNA提取試劑盒:40~60分鐘內(nèi)即可完成提取過程,,提取的總RNA純度高。石家莊正規(guī)RNA提取試劑廠家
如果把一個(gè)細(xì)胞比作一個(gè)城市,,那么DNA就像是一個(gè)管理人員,,它坐在細(xì)胞核內(nèi),監(jiān)視著“細(xì)胞城”的一舉一動(dòng),,像哪里細(xì)胞膜破了需要修補(bǔ),,什么時(shí)候需要合成蛋白質(zhì),顯而易見,光靠我們DNA管理人員一個(gè)人自然忙不過來啦,,于是我們的DNA管理人員決定給自己找一些“打工仔”,,它們就是RNA,但是近年來越來越多的研究發(fā)現(xiàn),,這些RNA似乎遠(yuǎn)遠(yuǎn)不止一個(gè)普通默默無聞的“公務(wù)員”那樣簡單,,它們在基因表達(dá)中發(fā)揮著不亞于DNA的巨大的作用,如2006年諾貝爾獎(jiǎng)生理/醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)就頒發(fā)給了RNA干擾的兩位發(fā)現(xiàn)者,。RNA干擾現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)為遺傳研究提供了一種強(qiáng)大的研究手段,,這也說明這些對RNA的研究有著巨大的前景.而作為南大較好科研接班人的我們自然也不能甘于人后,于是我們決定從酵母RNA的提取開始做起,。廣州正規(guī)RNA提取試劑生產(chǎn)廠家移去水相后,,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機(jī)相得到蛋白質(zhì),。
植物花總RNA提取試劑盒:采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,,配合特殊的提取緩沖液,可以從多糖多酚植物的根,、莖,、葉以及花組織中快速提取總RNA,40~60分鐘內(nèi)即可完成提取過程,,提取的總RNA純度高,,沒有DNA和蛋白質(zhì)污染,適用于RT-PCR,、qRT-PCR,、芯片分析、Northernblot雜交等實(shí)驗(yàn),。特殊的提取緩沖液保證特殊植物材料中的總RNA充分溶解,。總RNA提取速度快,,提取效率高,。有效去除植物花組織中的多糖、多酚類等雜質(zhì),,提取純度高,。細(xì)菌總RNA提取試劑盒:本試劑盒可以快速從細(xì)菌體內(nèi)提取總RNA,提取的總RNA純度高,,沒有DNA和蛋白質(zhì)污染,,適用于RT-PCR、qRT-PCR,、芯片分析,、Northernblot雜交等實(shí)驗(yàn),。吸附柱特異吸附總RNA,提取速度快,。提取效率高,。有效去除蛋白質(zhì)、鹽類,、脂類等雜質(zhì),,提取純度高。
核糖核酸(縮寫為RNA,,即RibonucleicAcid),,存在于生物細(xì)胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體,。RNA由核糖核苷酸經(jīng)磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子,。一個(gè)核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構(gòu)成,。RNA的堿基主要有4種,,即A(腺嘌呤)、G(鳥嘌呤),、C(胞嘧啶),、U(尿嘧啶),其中,,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T,。核糖核酸在體內(nèi)的作用主要是引導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成。人體一個(gè)細(xì)胞含RNA約10pg(含DNA約7pg),。與DNA相比,,RNA種類繁多,分子量較小,,含量變化大。RNA可根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能的不同分為信使RNA和非編碼RNA,。非編碼RNA分為非編碼大RNA和非編碼小RNA,。非編碼大RNA包括核糖體RNA、長鏈非編碼RNA,。非編碼小RNA包括轉(zhuǎn)移RNA,、核酶、小分子RNA等,。小分子RNA(20~300nt)包括miRNA,、SiRNA、piRNA,、scRNA,、snRNA,、snoRNA等,細(xì)菌也有小分子RNA(50~500nt),??俁NA提取試劑:自備新開封或?qū)iT氯仿,異丙醇,,75%乙醇,,DEPC處理水。
拭子RNA提取試劑的選擇,?1,、產(chǎn)品價(jià)格。價(jià)格也是選購產(chǎn)品的重要考量因素,。對于絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)如Northern雜交,、RT-PCR、RealTimeRT-PCR,、cDNA文庫構(gòu)建等,,國產(chǎn)試劑盒都能滿足質(zhì)量要求。與國外有名品牌相比,,國產(chǎn)試劑盒的價(jià)格較為便宜,,價(jià)格還不到國外品牌價(jià)格的30%,性價(jià)比較高,。因而,,對于以上實(shí)驗(yàn)建議選用國產(chǎn)試劑盒。一些經(jīng)費(fèi)不是很多的課題研究或樣本量較大的臨床檢測項(xiàng)目,,特別適合選用國產(chǎn)試劑盒,。2、與國外有名品牌相比,,國產(chǎn)試劑盒在拭子RNA提取純度上略有不足,,但不影響大多數(shù)實(shí)驗(yàn),特別是下游需要PCR擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)和分子雜交類實(shí)驗(yàn),。在提取得率上,,國內(nèi)試劑盒與國外品牌差別不大,而在價(jià)格方面,,國產(chǎn)試劑盒具有比較明顯的優(yōu)勢,。如果經(jīng)費(fèi)充足,RNA純度要求特別高,,可考慮選擇Q等國外有名品牌,。如果經(jīng)費(fèi)不多或下游主要做PCR或分子雜交等實(shí)驗(yàn),可考慮選擇性價(jià)比較高的國產(chǎn)品牌,。在提取時(shí),,實(shí)驗(yàn)人員需要佩戴口罩和手套等各種防護(hù)裝備,,以防實(shí)驗(yàn)室污染。合肥RNA提取試劑廠家批發(fā)價(jià)
總RNA提取試劑,,適用于動(dòng)植物細(xì)胞或組織及細(xì)菌的總RNA抽提,,可有效防止RNA在提取過程中的降解。石家莊正規(guī)RNA提取試劑廠家
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒自主研發(fā)生產(chǎn),,博取眾家之長,,根據(jù)多年來市場反饋不斷進(jìn)行技術(shù)升級和改良得來。具有操作步驟少,,實(shí)驗(yàn)快捷,,RNA產(chǎn)量純度高,充分滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)要求的需要,,適用提取樣品普遍等特點(diǎn),。產(chǎn)量:每100mg樣品提取的RNA平均值在20-50ug不等。純度:OD值一般在1.9以上,。得到的RNA無DNA污染,,可直接用于反轉(zhuǎn)錄,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(尤其對RNA溶液中DNA非常敏感)等所有后續(xù)實(shí)驗(yàn),。1,、快速:多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作步驟簡化快捷從時(shí)間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解(一般樣品十多分鐘就能完一個(gè)樣RNA的提取,較大縮短了一般試劑盒提取所需要的半小時(shí)甚至更長的時(shí)間,,),。2、高產(chǎn)量:多糖多酚植物RNA提取試劑盒擁有較強(qiáng)細(xì)胞裂解液,,保證后續(xù)RNA提取的得率,。(能完全通過化學(xué)方法徹底裂解細(xì)胞讓RNA釋放完整,并且有效成分能壓制內(nèi)源RNA酶的降解作用)石家莊正規(guī)RNA提取試劑廠家