Hot-Start Taq DNA Polymerase:助力高特異性PCR擴(kuò)增在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)是不可或缺的工具,,而Taq DNA聚合酶作為PCR反應(yīng)的酶,其性能直接影響擴(kuò)增結(jié)果的準(zhǔn)確性和效率,。近年來(lái),,Hot-Start Taq DNA Polymerase憑借其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)Hot-Start Taq DNA Polymerase是一種經(jīng)過(guò)特殊處理的Taq DNA聚合酶,通過(guò)化學(xué)修飾或結(jié)合溫度敏感的抑制劑,,能夠在低溫條件下抑制酶的活性,,從而避免非特異性擴(kuò)增的發(fā)生。這種設(shè)計(jì)使得反應(yīng)體系在室溫下組裝時(shí),,引物不會(huì)因非特異性結(jié)合而導(dǎo)致錯(cuò)誤擴(kuò)增,,顯著提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。其主要特點(diǎn)包括:高特異性:通過(guò)抑制低溫下的酶活性,,有效避免引物二聚體和非特異性結(jié)合,,從而提高擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性。高靈敏度:即使在低拷貝數(shù)的模板中,,也能高效擴(kuò)增目標(biāo)片段,。操作簡(jiǎn)便:無(wú)需額外的高溫步驟,反應(yīng)體系可在室溫下直接組裝,。兼容性強(qiáng):適用于多種復(fù)雜的模板,,如富含AT的DNA和經(jīng)過(guò)亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的DNA。
Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/μl):高效除PCR污染的關(guān)鍵酶在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)的應(yīng)用極為廣,,但PCR產(chǎn)物的交叉污染問(wèn)題一直是影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵因素之一,。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作為一種高效的酶工具,憑借其獨(dú)特的性能和廣的應(yīng)用,,已成為解決這一問(wèn)題的理想選擇,。一、產(chǎn)品特點(diǎn)高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能夠特異性地催化DNA中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖之間的N-糖苷鍵水解,,釋放游離尿嘧啶,。這種酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均有效,,但對(duì)RNA或長(zhǎng)度不超過(guò)6個(gè)堿基的DNA寡核苷酸無(wú)活性。防止PCR產(chǎn)物污染UDG的主要應(yīng)用之一是防止PCR產(chǎn)物的交叉污染,。通過(guò)在PCR反應(yīng)中使用dUTP替代dTTP,,生成含有dU的PCR產(chǎn)物,UDG可以特異性地切割這些含有dU的DNA,,從而防止其在后續(xù)反應(yīng)中作為模板被擴(kuò)增,。反應(yīng)條件兼容性UDG在pH8.0左右表現(xiàn)出活性,且不需要二價(jià)陽(yáng)離子,,可在較寬的pH范圍內(nèi)工作,。它對(duì)高離子強(qiáng)度(>200mM)敏感,因此在使用時(shí)需注意反應(yīng)體系的離子濃度,。Recombinant Human LAP (TGF beta 1) Protein,His TagUltra-Long Master Mix (2×)(With Dye)經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的穩(wěn)定性測(cè)試,,即使在反復(fù)凍融后仍能保持穩(wěn)定的活性。
Probe qPCR Mix (2×, Low ROX):高特異性與低背景校正的qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×, Low ROX) 是一種為探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液,,適用于需要低濃度ROX校正染料的qPCR儀器,。該預(yù)混液結(jié)合了熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,、dNTPs以及低濃度ROX,,能夠?qū)崿F(xiàn)高效、特異的基因定量檢測(cè),。產(chǎn)品特點(diǎn)高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,,有效減少非特異性擴(kuò)增,提高檢測(cè)靈敏度,。低濃度ROX校正:適用于需要低濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器,,如ABI 7500、ViiA 7,、QuantStudio系列等,。防污染系統(tǒng):部分產(chǎn)品含有dUTP和UNG(尿嘧啶DNA糖基化酶),能夠有效降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,,防止假陽(yáng)性,。快速反應(yīng):支持快速qPCR程序,,可在短時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè),,提高實(shí)驗(yàn)效率。操作簡(jiǎn)便:2×預(yù)混液設(shè)計(jì),,只需加入引物,、探針和模板即可進(jìn)行反應(yīng),減少了操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn),。應(yīng)用場(chǎng)景基因表達(dá)分析:用于定量檢測(cè)特定基因的表達(dá)水平,。病原體檢測(cè):快速檢測(cè)病毒,、細(xì)菌等病原體的DNA。SNP分型和拷貝數(shù)變異分析:通過(guò)探針?lè)▽?shí)現(xiàn)高特異性的基因分型,。多重qPCR:可在同一反應(yīng)中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)基因,。
在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)已成為不可或缺的工具,,廣泛應(yīng)用于基因擴(kuò)增,、突變檢測(cè)、基因表達(dá)分析等多個(gè)領(lǐng)域,。而一款PCR Master Mix則是確保實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素之一,。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)憑借其性能和獨(dú)特的產(chǎn)品特點(diǎn),為科研工作者提供了高效,、可靠的實(shí)驗(yàn)解決方案,。一、酶性能Phusion Master Mix的成分是Phusion DNA聚合酶,,這是一種具有高保真性的熱穩(wěn)定酶。它能夠以極高的準(zhǔn)確性復(fù)制DNA模板,,錯(cuò)誤率極低,,為普通Taq酶的1/500,這使得它在擴(kuò)增長(zhǎng)片段DNA或?qū)π蛄袦?zhǔn)確性要求極高的實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出色,。例如,,在進(jìn)行基因克隆或構(gòu)建基因文庫(kù)時(shí),Phusion酶能夠確保擴(kuò)增產(chǎn)物的序列與原始模板高度一致,,從而提高了后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功率,。二、快速擴(kuò)增能力盡管Phusion酶具有高保真性,,但其擴(kuò)增速度并未受到影響,。它能夠在短時(shí)間內(nèi)完成長(zhǎng)片段DNA的擴(kuò)增,提高了實(shí)驗(yàn)效率,。對(duì)于長(zhǎng)度在5kb以內(nèi)的DNA片段,,Phusion Master Mix可以在幾分鐘內(nèi)完成擴(kuò)增,這對(duì)于需要快速獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果的研究人員來(lái)說(shuō)是一個(gè)巨大的優(yōu)勢(shì),。例如,,在進(jìn)行高通量基因篩查或大規(guī)模樣本分析時(shí),Phusion Master Mix能夠縮短實(shí)驗(yàn)周期,,提高工作效率,。該聚合酶還被應(yīng)用于病原體基因組的擴(kuò)增測(cè)序,以及修復(fù)受損DNA模板中的尿嘧啶,,從而提高擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性,。
在分子生物學(xué)研究中,,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 則是實(shí)現(xiàn)高保真擴(kuò)增的理想選擇,。這種預(yù)混液結(jié)合了Pfu DNA聚合酶的高保真特性和優(yōu)化的反應(yīng)體系,,為科研人員提供了一個(gè)效率、便捷且可靠的實(shí)驗(yàn)平臺(tái),。Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs,、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及必要的輔助成分,。Pfu DNA聚合酶以其保真性而聞名,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過(guò)程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,,從而提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性,。與Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,,使其成為需要精確擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)(如基因克隆,、突變分析和測(cè)序準(zhǔn)備)的優(yōu)先工具。此外,,Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 的無(wú)染料配方為實(shí)驗(yàn)提供了更大的靈活性,。實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)具體需求選擇后續(xù)的檢測(cè)方法,例如凝膠電泳分析,、平末端克隆或測(cè)序,,而無(wú)需擔(dān)心染料對(duì)結(jié)果的干擾。這種無(wú)染料設(shè)計(jì)特別適合需要進(jìn)一步處理的PCR產(chǎn)物,,例如用于構(gòu)建重組質(zhì)?;蜻M(jìn)行下游功能分析。Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作,。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動(dòng)配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差,。FnCas12a的雙鏈或單鏈DNA靶標(biāo)都能激發(fā)其反式剪切活性,,即在形成三元復(fù)合物后,針對(duì)非特異序列ssDNA的剪切,。磁珠法mRNA純化試劑盒
該預(yù)混液適用于多種抗凝劑處理的血液樣本,,但優(yōu)先推薦使用EDTA抗凝血,因?yàn)镋DTA可以更好地抑制核酸降解,。Recombinant Human MERTK/Mer Protein,His Tag
產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度與特異性SYBRGreen是一種熒光染料,,能夠特異性地結(jié)合到雙鏈DNA的小溝區(qū)域。在qPCR過(guò)程中,隨著DNA鏈的延伸,,SYBRGreen的熒光信號(hào)不斷增強(qiáng),,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)基因的實(shí)時(shí)定量。這種染料的結(jié)合特異性極高,,確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。即使在低濃度的模板條件下,也能檢測(cè)到目標(biāo)基因的存在,,靈敏度可達(dá)單拷貝水平,。2×預(yù)混體系,操作簡(jiǎn)便該產(chǎn)品采用2×預(yù)混體系,,預(yù)先將Taq酶,、dNTPs、MgCl?等關(guān)鍵組分混合均勻,,實(shí)驗(yàn)人員需加入引物和模板即可進(jìn)行反應(yīng),。這種預(yù)混體系簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作步驟,減少了人為誤差,,同時(shí)保證了反應(yīng)體系的均一性和穩(wěn)定性,。無(wú)論是初學(xué)者還是經(jīng)驗(yàn)豐富的研究人員,都能輕松上手,,快速開(kāi)展實(shí)驗(yàn),。低ROX參比染料,減少背景干擾ROX染料作為qPCR反應(yīng)中的參比染料,,用于校正孔間熒光信號(hào)的差異,。然而,,過(guò)高的ROX濃度可能會(huì)引入背景熒光,,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。SYBRGreenqPCRMix(2×,LowROX)采用了低濃度的ROX染料,,有效降低了背景干擾,,提高了熒光信號(hào)的信噪比,使得定量結(jié)果更加精確可靠,。Recombinant Human MERTK/Mer Protein,His Tag