HE染色:在組織病理學(xué)中,蘇木素-伊紅染色是一種日常使用比較普遍的常規(guī)染色方法,。常規(guī)蘇木素染色的對比染色是用伊紅,,也有采用焰紅,因為焰紅比伊紅色澤更鮮明,還有采用橘黃G,,比布里希猩紅,,波爾多紅等作為對比染色。伊紅是比較常用的胞質(zhì)染料,,本身溶于醇而不溶于水,,為磚紅色粉末狀或醬紅色結(jié)晶。配方:伊紅Y(水溶)0.5-1g,,蒸餾水99ml,。如果取用伊紅Y(醇溶性)應(yīng)當(dāng)溶于99ml 75%或95%的乙醇中。如果在伊紅液中加入0.5ml冰醋酸,,可以加速其染色過程,,使得胞質(zhì)的色澤更加艷麗。結(jié)果是細(xì)胞核呈藍(lán)色,,胞質(zhì),、肌肉,、結(jié)締組織、紅細(xì)胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色,。鈣鹽和各種微生物也可染成藍(lán)色或紫藍(lán)色,。關(guān)于...
HE染色實驗步驟:(1)樣品制備:對于貼壁生長細(xì)胞,胰酶消化,,調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml,,滴加于蓋玻片上(置于6孔板中),培養(yǎng)相應(yīng)時間后,,取出細(xì)胞爬片,,用PBS洗滌3次。(2)樣品固定:95%乙醇固定20min,,PBS洗滌2次,,每次1min。(3)染核:蘇木素染液染色2-3min,,自來水洗滌,。(4)分色:鏡下觀察,若細(xì)胞核染色過深,,用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒,,自來水洗滌。(5)染胞質(zhì):浸入伊紅染液染色1min,,自來水洗滌,。(6)吹干或自然晾干細(xì)胞爬片后,中性樹膠封片,。若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定,,則染色時間相應(yīng)延長,蘇木素染色12-15min,,伊紅5min即可HE染色,,南京英瀚斯,專業(yè)的實驗外...
HE染色攻略:HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,,染色后組織或細(xì)胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的一種染色方法,。這種方法適用范圍***,對組織細(xì)胞的各種成分都可著色,,便于***觀察組織構(gòu)造,,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長期保存,。經(jīng)過HE染色,,細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)紫色,細(xì)胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色,??梢杂^察細(xì)胞結(jié)構(gòu),、組織層次等等。首先切片組織是否完整,,組織有無損傷,;然后看切片有無刀痕;***細(xì)胞核是否清晰可見,,胞核與包漿要對比鮮明,。HE染色需要哪些材料及實驗步驟。廣東比較好的HE染色分析HE染色注意事項:1,、染色時調(diào)節(jié)pH值很重要,。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長...
HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行),可改變組織等電點,,促進(jìn)伊紅與胞漿蛋白質(zhì)結(jié)合,其本身不參與染色的反應(yīng),。當(dāng)蘇木素染色效能極高,很短時間就導(dǎo)致核漿共染時,,可適當(dāng)?shù)靥砑颖姿?一般不超過2%),,抑制蘇木素染色效能,方便控制染色時間,,同時也能提高蘇木素染色的清晰度?,F(xiàn)在有商用的HE染色液賣,但是質(zhì)量參差不齊,。如果課題組較大,,完全可以自己配制,效果也挺好,。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周,即可完全成熟,,染色效果好,氧化膜和結(jié)晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產(chǎn)生氧化膜和結(jié)晶,,這也是提示更換蘇木素的標(biāo)志之一),。骨組織HE染色的操作流程。湖...
HE染色切片中出現(xiàn)類似色素樣的點狀結(jié)晶和黑色光滑的細(xì)胞核原因:切片封片前放置在空氣中時間太長,,以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致,。對策:移去組織切片上的蓋玻片和封固劑,重新處理,。將切片水洗數(shù)分鐘,,然后重新脫水、透明,、封固,。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤,盡量不要讓其干燥,。細(xì)胞核呈紅,、棕色改變原因:蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍(lán)不足。對策:首先,,每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力,,發(fā)現(xiàn)氧化過度應(yīng)及時更換。其次,,可用流水,、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等,,在蘇木精染色后,,給切片以足夠的藍(lán)化時間。HE染色小貼士以及相關(guān)技巧分析,。專業(yè)的HE染色HE染色原理:一,、細(xì)胞核染...
HE染色切片中出現(xiàn)類似色素樣的點狀結(jié)晶和黑色光滑的細(xì)胞核原因:切片封片前放置在空氣中時間太長,以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致,。對策:移去組織切片上的蓋玻片和封固劑,,重新處理。將切片水洗數(shù)分鐘,,然后重新脫水,、透明、封固,。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤,,盡量不要讓其干燥。細(xì)胞核呈紅,、棕色改變原因:蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍(lán)不足,。對策:首先,每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力,,發(fā)現(xiàn)氧化過度應(yīng)及時更換,。其次,可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水,、0.2%碳酸氫鈉等,,在蘇木精染色后,給切片以足夠的藍(lán)化時間,。關(guān)于HE染色,,你不知道的實驗技巧。陜西結(jié)果客觀的HE染色外包HE染色法的...
HE染色在**染色中的應(yīng)用,,小細(xì)胞肺*是肺*中分化程度比較低,、惡性程度比較高的一種惡性**,生長迅速,,轉(zhuǎn)移較早,,五年存活率*為1%-2%,預(yù)后非常差,。其小細(xì)胞肺***細(xì)胞HE染色的特征,,主要表現(xiàn)為組織結(jié)構(gòu),包括巢狀,、小梁狀,、實性片狀,常有菊形團(tuán)形成,,*巢周圍的瘤細(xì)胞呈柵欄狀排列,*細(xì)胞較小,,一般小于三個靜止的淋巴細(xì)胞,,呈圓形、卵圓形或短梭形,,胞質(zhì)稀少,,胞界不清,核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,,核仁缺乏或不明顯,,核分裂象每十個高倍視野大于十一個,常見大片狀壞死,。比較常見的病理染色HE染色,?上海性價比高的HE染色分析HE染色主要是為通細(xì)胞及胞核形態(tài)、大小來區(qū)別各種細(xì)胞的,,并不是直接通過顏色來區(qū)分的,,HE染色細(xì)...
HE染色全名蘇木精—伊紅染色法,屬于化學(xué)染色法,,其主要依靠蘇木精染液為堿性,,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。實驗過程:1,、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來水洗,。2,、蘇木素染色:切片入蘇木素染液染3-5min,自來水洗,,分化液分化,,自來水洗,返藍(lán)液返藍(lán),,流水沖洗,。3、伊紅染色:切片依次入85%,、95%的梯度酒精脫水各5min,,入伊紅染液中染色5min。4,、脫水封片:切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水...
HE染色實驗步驟:(1)樣品制備:對于貼壁生長細(xì)胞,,胰酶消化,調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml,,滴加于蓋玻片上(置于6孔板中),,培養(yǎng)相應(yīng)時間后,取出細(xì)胞爬片,,用PBS洗滌3次,。(2)樣品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗滌2次,,每次1min,。(3)染核:蘇木素染液染色2-3min,自來水洗滌,。(4)分色:鏡下觀察,,若細(xì)胞核染色過深,用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒,,自來水洗滌,。(5)染胞質(zhì):浸入伊紅染液染色1min,自來水洗滌,。(6)吹干或自然晾干細(xì)胞爬片后,,中性樹膠封片。若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定,,則染色時間相應(yīng)延長,,蘇木素染色12-15min,伊紅5min即可HE染色過程中常見的問題以及應(yīng)對方...
HE染色就是用蘇木精和伊紅對細(xì)胞內(nèi)的核糖體和細(xì)胞質(zhì)染色的方法。H:Hematoxylin,,蘇木精E:Eosin,,伊紅蘇木精(Hematoxylin,H)是一種堿染料,可將細(xì)胞核和細(xì)胞內(nèi)核糖體染成藍(lán)紫色,,被堿染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜堿,。伊紅(,E)是一種酸染料,,能將細(xì)胞質(zhì)染成紅色或淡紅色,,被酸染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜酸。染色前,,須用二甲苯脫去切片中的石蠟,,再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精,***入蒸餾水,,就可染色,。 很多細(xì)胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時或發(fā)生退行變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染,。 膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變時,,伊紅著色由淺變深。專業(yè)的HE染色服務(wù)平臺,,南京英瀚斯生物,。安徽靠譜的HE染色哪...
HE染色是蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 ,。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色 ,;伊紅為酸性染料 ,,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 ,。HE染色法是組織學(xué),、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中**基本,、使用*****的技術(shù)方法,。由于組織或細(xì)胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),如處理適宜,,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,使胞漿的各種不同成...
HE染色脫蠟不凈的原因及驗證方法:1)二甲苯使用過久,,含蠟成分太高或脫蠟效果差:可更換二甲苯驗證,。2)切片經(jīng)烤片,冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低,;延長拖拉時間或用熱的切片脫蠟驗證,。3)脫蠟時間太短或振蕩太少,幅度太??;可延長脫蠟時間或以多振蕩來驗證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時間過久,,導(dǎo)致乙醇中二甲苯含量過高,,二甲苯殘留在切片上(由于二甲苯與水不相溶,切片上有二甲苯的地方,,蘇木精就沒有辦法滲透進(jìn)去,,在切片染色完成后留下了點狀的不著**域):更換各道乙醇驗證,。5)二甲苯、乙醇質(zhì)量不佳(偶有試劑瓶內(nèi)裝的試劑與試劑名不相符):換批號驗證,。6)更換脫蠟液體時試劑拿錯:需重新配置驗證。7)更換脫蠟液體時...
HE染色病理技術(shù)中**常用的一種方法,通過它可以做出病理診斷和發(fā)現(xiàn)尋求別的輔助方法,,以達(dá)到準(zhǔn)確,,完整的病理診斷,。一,、染色目的 病理學(xué)的所有切片,,都必須通過一種以上的染料,,通過各種不同的方法,,將切片中各種不同的物質(zhì),,在不同染液的作用下,將其顯示出來,,使之在光學(xué)顯微鏡下,,能夠完全的觀看各種結(jié)構(gòu)。例如,,HE染色,,好質(zhì)量的切片可以清晰地顯示出多不同的結(jié)構(gòu),細(xì)胞核著藍(lán)黑色,,細(xì)胞漿著粉紅色,軟骨著藍(lán)色等,。清晰的結(jié)構(gòu)為診斷提供的依據(jù),因此,染色技術(shù)也是病理技術(shù)中的重要組成部分,必須不斷地總結(jié),,方能提高,。專業(yè)的HE染色服務(wù)平臺,,南京英瀚斯生物,。海南推薦的HE染色檢測HE染色法的話,,不能準(zhǔn)確說出細(xì)胞器的顏色,,實...
HE染色攻略:HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,,染色后組織或細(xì)胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的一種染色方法,。這種方法適用范圍***,對組織細(xì)胞的各種成分都可著色,便于***觀察組織構(gòu)造,,而且適用于各種固定液固定的材料,,染色后不易褪色可長期保存,。經(jīng)過HE染色,,細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)紫色,細(xì)胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色,??梢杂^察細(xì)胞結(jié)構(gòu)、組織層次等等,。首先切片組織是否完整,,組織有無損傷;然后看切片有無刀痕,;***細(xì)胞核是否清晰可見,,胞核與包漿要對比鮮明。常用HE染色試劑配制方法,。河南結(jié)果客觀的HE染色哪家好HE染色知識點1:對送檢組織標(biāo)本的要求送檢組織標(biāo)本在手術(shù)切除或活檢后應(yīng)當(dāng)立即放入...
HE染色細(xì)胞質(zhì)過染分析及應(yīng)對原因:(1)伊紅染色液濃度太高,,特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在,;(2)切片在伊紅染色時間過長,;(3)切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時過的太快,而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生,。對策:適當(dāng)稀釋伊紅染色液,,減少伊紅染色時間,或者使切片在乙醇脫水等步驟時,,停留時間相對均勻,。同樣,也要檢查切片的厚度是否合適,。切片中出現(xiàn)藍(lán)黑色沉淀物分析及應(yīng)對原因:蘇木精染色液中的金屬膜,,黏附在玻片上。對策:每天染色前仔細(xì)過濾蘇木精染色液,,或建議使用半氧化蘇木精染色液,,如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產(chǎn)生。HE染色結(jié)果如果使用計算機(jī)分析軟件分析?遼寧推薦的HE染色服務(wù)HE染色...
HE染色常見問題:Q3:細(xì)胞核染色過淺,,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過短,,或蘇木素過度氧化失效,或分化時間太長,。對策:重新染色,。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水,、飽和的碳酸氫鈉溶液,、乙醇溶液,,每個3-5min即可,,接著重新染色??梢赃m當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強(qiáng)核染色,,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,自來水沖洗5-10min染色,,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,,自來水沖洗10min染色。Q4:細(xì)胞核染色過深,,胞漿著藍(lán)色答:切片在蘇木素染液中停留過長,;或切片太厚;或分化時間太短,。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核),,...
HE染色常見問題:切片染色不均勻,有片狀的弱著**存在答:(1)取材時組織太厚,,固定過久,,導(dǎo)致深部組織固定不佳,而表淺組織過度固定,,而透明,、脫水、浸蠟均是如此,,這樣在后期染色時就會出現(xiàn)染色不均勻,。應(yīng)該將厚的組織剖開固定。(2)制片過程有問題,,切片厚薄不一,,或者有刀痕,或組織與玻片間存在氣泡,。同一張切片厚薄不一,,一般都是在制片時,刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳(一般比較好角度為5°)(3)脫蠟前未烘烤,脫蠟時間過短或脫蠟液使用過久,,導(dǎo)致脫蠟不徹底,。(4)染色液過少,著色不均勻,;或染色時部分組織干涸而另一部分濕潤,,這樣會導(dǎo)致組織吸附染料的能力不一。(5)分化不當(dāng)。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染...
HE染色細(xì)胞核灰藍(lán)原因:(1)組織處理溫度過高,、過熱,,在石蠟停留的時間過長;(2)固定時間太短,,接下來就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對策:理論上來說,加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用,,組織不能在熱的蠟液中停留過長時間。如果由于某些原因不能進(jìn)行下步包埋處理,,完成浸蠟處理后的組織,,可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中,冷卻凝固,,以備包埋,。待需要包埋時再重新加溫直至石蠟融化即可。組織在處理前必須確保固定良好,,脫水比較好能從低濃度的乙醇開始,。HE染色切片知識以及如何做出漂亮的切片。湖北靠譜的HE染色服務(wù)HE染色是目前國內(nèi)外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法,。切片質(zhì)量的好壞,,可直接影響疾病診斷的...
HE染色在**染色中的應(yīng)用,小細(xì)胞肺*是肺*中分化程度比較低,、惡性程度比較高的一種惡性**,,生長迅速,轉(zhuǎn)移較早,,五年存活率*為1%-2%,,預(yù)后非常差。其小細(xì)胞肺***細(xì)胞HE染色的特征,,主要表現(xiàn)為組織結(jié)構(gòu),,包括巢狀、小梁狀,、實性片狀,,常有菊形團(tuán)形成,*巢周圍的瘤細(xì)胞呈柵欄狀排列,*細(xì)胞較小,,一般小于三個靜止的淋巴細(xì)胞,,呈圓形、卵圓形或短梭形,,胞質(zhì)稀少,,胞界不清,核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,,核仁缺乏或不明顯,,核分裂象每十個高倍視野大于十一個,常見大片狀壞死,。HE染色需要哪些材料及實驗步驟,。福建推薦的HE染色價格HE染色常見問題:Q5:細(xì)胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過度氧化;或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致,。...
HE染色伊紅著色淡分析及應(yīng)對原因:(1)伊紅染液的pH值可能大于5,;(2)藍(lán)化液殘留過多,;(3)切片太?。唬?)切片經(jīng)伊紅染色后在乙醇脫水時間過長,。對策:檢查伊紅染液的pH值,,如果必要的話,用乙酸將其調(diào)節(jié)在4~5之間,,從而使伊紅染色彩艷麗,。確保每次藍(lán)化步驟完成后,使用的弱堿性溶液被充分洗去,,玻片上沒有殘留的弱堿性溶液,。檢查切片的厚度。脫水時不要讓切片在低濃度乙醇停留時間過長,,因為含水多的低濃度乙醇會將伊紅的顏色分化掉,。HE染色需要哪些材料及實驗步驟。安徽值得信賴的HE染色檢測HE染色是蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,,簡稱HE染色法 ,,石蠟...
HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行),可改變組織等電點,,促進(jìn)伊紅與胞漿蛋白質(zhì)結(jié)合,,其本身不參與染色的反應(yīng)。當(dāng)蘇木素染色效能極高,,很短時間就導(dǎo)致核漿共染時,,可適當(dāng)?shù)靥砑颖姿?一般不超過2%),抑制蘇木素染色效能,方便控制染色時間,,同時也能提高蘇木素染色的清晰度?,F(xiàn)在有商用的HE染色液賣,但是質(zhì)量參差不齊,。如果課題組較大,,完全可以自己配制,效果也挺好,。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周,,即可完全成熟,染色效果好,,氧化膜和結(jié)晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產(chǎn)生氧化膜和結(jié)晶,,這也是提示更換蘇木素的標(biāo)志之一)。HE染色結(jié)果如何分析和讀片,?...
HE染色原理:一,、細(xì)胞核染色原理:蘇木精為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色,。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,。使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。二,、細(xì)胞漿染色原理:細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),,為兩性化合物、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系,,當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點4.7-5.0時,,胞漿對外不顯電性,此時酸或堿性染料不易染色,。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時,,大于蛋白質(zhì)的等電點pH值,表現(xiàn)酸性電離,,而帶負(fù)電荷的陰離子,,可被帶正電荷的染料染色,現(xiàn)時胞核...
HE染色切片中出現(xiàn)類似色素樣的點狀結(jié)晶和黑色光滑的細(xì)胞核原因:切片封片前放置在空氣中時間太長,,以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致,。對策:移去組織切片上的蓋玻片和封固劑,,重新處理。將切片水洗數(shù)分鐘,,然后重新脫水,、透明、封固,。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤,,盡量不要讓其干燥。細(xì)胞核呈紅,、棕色改變原因:蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍(lán)不足,。對策:首先,每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力,,發(fā)現(xiàn)氧化過度應(yīng)及時更換,。其次,可用流水,、溫水或弱堿性溶液如稀氨水,、0.2%碳酸氫鈉等,在蘇木精染色后,,給切片以足夠的藍(lán)化時間,。比較基礎(chǔ)的病理染色HE染色。黑龍江值得信賴的HE染色分析HE染色攻略:H...
HE染色常見問題:Q3:細(xì)胞核染色過淺,,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過短,,或蘇木素過度氧化失效,,或分化時間太長,。對策:重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉,、0.5%氨水,、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液,,每個3-5min即可,,接著重新染色??梢赃m當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強(qiáng)核染色,,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,自來水沖洗5-10min染色,,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,,自來水沖洗10min染色。Q4:細(xì)胞核染色過深,,胞漿著藍(lán)色答:切片在蘇木素染液中停留過長,;或切片太厚,;或分化時間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核),,...
HE染色注意事項:1,、染色時調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長,,組織酸化而影響細(xì)胞核著色,。因此,要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min,,這樣可以使細(xì)胞核著色較深,。染伊紅時胞漿著色不佳,可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸,。2,、切片染蘇木精后,分色這一步是關(guān)鍵,,應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行,,一般以細(xì)胞核染色清楚(晰)而細(xì)胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長分色時間將導(dǎo)致染色太淺,,應(yīng)重新染色后再行分色,。3、切片經(jīng)酒精脫水后,,入二甲苯時可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài),,此為脫水不徹底,應(yīng)將切片退回?zé)o水酒精,,更換酒精,、二甲苯,以求徹底脫水與透明,。4,、在染色過程中不要讓切片干燥,以免切片...
HE染色常見問題:Q3:細(xì)胞核染色過淺,,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過短,,或蘇木素過度氧化失效,或分化時間太長,。對策:重新染色,。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水,、飽和的碳酸氫鈉溶液,、乙醇溶液,每個3-5min即可,,接著重新染色,??梢赃m當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強(qiáng)核染色,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,,自來水沖洗5-10min染色,,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,自來水沖洗10min染色,。Q4:細(xì)胞核染色過深,,胞漿著藍(lán)色答:切片在蘇木素染液中停留過長;或切片太厚,;或分化時間太短,。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核),...
HE染色不管怎么操作,,始終無法染色或淡染答:這種情況一般因為組織固定時采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸,。補(bǔ)救:防患于未然,要么使用新鮮的中性甲醛固定,,要么在存放的甲醛中加一點碳酸鈉中和甲酸,。對于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定;對于已經(jīng)制出的片子,,染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時以上,,然后自來水漂洗5min,可改善染色,。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中,,補(bǔ)充染色媒介,增強(qiáng)蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,,單純的蘇木素與組織的親和力很弱),。HE染色(脫蠟、水化,、染色,、脫水、封片) - 實驗方法,。四川HE染色公司HE染色法的話,不能準(zhǔn)確...
HE染色常見問題:Q5:細(xì)胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過度氧化,;或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致,。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液?;蛟诹鲃幼詠硭?一般自來水PH7.5-7.8),,或在稀釋的氨水溶液,或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡,,這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果,。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5),;或反藍(lán)液體未漂洗干凈,殘留后影響胞漿嗜酸性染色,;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久,。對策:檢查伊紅染色液PH,可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0,。根據(jù)以上提示,,調(diào)整實驗步驟。肺部組織HE染色如何觀察,。山東比較好的HE染色檢測HE染色:在組織病理學(xué)中,,蘇木素-伊紅染色是一...
HE染色分化作用:染色后,用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,,這個過程稱為分化作用,,所用的溶液稱為分化液。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液,,因酸能破壞蘇木精的醌型結(jié)構(gòu),,使組織與色素分離而褪色。經(jīng)蘇木精染色后,,必須用0.5%鹽酸乙醇分化,,使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木精染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木精染料脫去,在進(jìn)行伊紅染色,,才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明,。因此,在HE染色中分化是極為關(guān)鍵的一步,。返藍(lán)作用:分化之后,,蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色,,在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),,呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色,,故分化之后,,立即用水出去組織切片上的酸而終止分化,...
HE染色等常規(guī)染色,,組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片,。原因:石蠟切片對組織的形態(tài)保存比冰凍切片好,并且對抗原基本無影響,。脂質(zhì)染色(油紅O染**odipy染色,,尼羅紅染色)必須做冰凍切片,不能做石蠟切片,。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,,ATP染色,,膽固醇染色。如果標(biāo)本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片,,將標(biāo)本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內(nèi)固定(在固定液內(nèi)邊解凍邊固定),。組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存完好順序:新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>組織-80°冷凍后投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定冰凍切片>組織-80°冷凍后直接冰凍切片。H...